辽宁省博士科研启动基金(20081044)
- 作品数：8 被引量：14H指数：2
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- 相关机构：沈阳军区总医院中国医科大学附属第一医院辽宁省人民医院更多>>
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- 外源性PTEN对胰腺癌细胞ASPC-1增殖、侵袭及转移的影响
- 2012年
- 目的研究第10染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因（PTEN）对胰腺癌细胞系ASPC-1细胞周期、细胞增殖、血管内皮生长因子（VEGF）和表皮生长因子受体（EGFR）蛋白表达、裸鼠成瘤及转移能力的影响。方法将含PTEN基因的质粒pE—PTEN转染ASPC-1细胞，以空质粒pE转染为对照，分别获得ASPC-1-pE-PTEN（A—pE—P）细胞及ASPC-1-pE（A—pE）细胞。应用RT—PCR检测细胞PTENmRNA表达；免疫细胞化学法检测PTEN、VEGF、EGFR蛋白表达；克隆形成实验观察克隆形成数；Transwell小室观察细胞侵袭能力；裸鼠皮下注射癌细胞法观察成瘤情况。结果与ASPC一1细胞比较，A—pE—P细胞的PTENmRNA表达增加179．3％，PTEN蛋白表达明显增加；VEGF蛋白表达明显减少；EGFR蛋白表达无明显变化；G2／M期细胞数明显增加[（31．5±1．76）％比（26．81±1．03）％，P〈0．05]；克隆形成数降低[（24．0±3．9）比（33．3±3．4），F=4．283，P〈0．01]，克隆形成率降低28％；穿膜细胞数明显减少[每高倍视野（46．3±6．6）比（63．8±7．5）个，F=2．476，P〈0．05]；种植瘤体积明显缩小[（142．4±30．9）比（202．7±43．6）mm^2，t=4．834，P〈0．01]，抑瘤率达42．4％；远处转移灶明显减少[（2．0±0．7）比（5．0±1．3）个，t=0．451，P〈0．01]。结论PTEN基因转染后ASPC-1细胞VEGF表达减少，细胞生长被阻滞在G2／M期，增殖及转移被抑制。
- 李宏宇李建军刘旭吴春燕赵佳钧陈延志郭晓钟
- 关键词：胰腺肿瘤肿瘤抑制
- 外源性PTEN增强放射线诱导胰腺癌ASPC-1细胞G2/M期阻滞
- 2009年
- 目的观察外源性PTEN在乏氧及放射前后对胰腺癌细胞系ASPC-1细胞周期及克隆形成的影响。方法将质粒pEAK8和pEAK8-PTEN分别转染ASPC-1细胞,获得ASPC-1-pEAK8细胞及ASPC-1-pEAK8-PTEN细胞,将ASPC-1、ASPC-1-pEAK8和ASPC-1-pEAK8-PTEN细胞各分成常氧组、乏氧组、照射组、乏氧照射组。乏氧组施加乏氧(1%O2)处理,乏氧时间为24 h,照射组接受4Gy单次照射,乏氧照射组在乏氧下进行照射。应用Western印迹杂交、流式细胞术、成克隆分析法检测外源性PTEN对ASPC-1细胞PTEN蛋白表达、细胞周期分布及细胞克隆形成能力的影响。结果ASPC-1-pEAK8-PTEN细胞较ASPC-1、ASPC-1-pEAK8细胞PTEN蛋白增加明显。常氧下,ASPC-1-pEAK8-PTEN细胞较ASPC-1、ASPC-1-pEAK8细胞G2/M期细胞增多,并且放射线进一步增强了G2/M期细胞阻滞。乏氧8h后,ASPC-1-pEAK8-PTEN细胞较ASPC-1、ASPC-1-pEAK8细胞凋亡比例显著提高。常氧及放射后,ASPC-1、ASPC-1-pEAK8、ASPC-1-pEAK8-PTEN细胞克隆形成率分别为33.33±8.38%、31.67±4.32%、24.00±3.90%和5.53±0.52%、5.33±0.74%、3.73±1.20%。乏氧及放射后,细胞克隆形成率分别为29.67±4.97%、29.50±3.39%、19.83±5.12%和12.08±0.78%、11.17±0.73%和7.38±0.58%。结果表明,ASPC-1-pEAK8-PTEN细胞较ASPC-1,ASPC-1-pEAK8细胞在照射及乏氧前后克隆形成率均明显降低。结论外源性PTEN可使胰腺癌ASPC-1细胞阻滞在G2/M期,增强乏氧诱导细胞凋亡,增强放射线诱导ASPC-1细胞G2/M期阻滞的能力,提高放射线对ASPC-1细胞在常氧及乏氧下的细胞杀伤。
- 李建军李宏宇陈延治李光顾菲辛彦
- 关键词：乏氧转染
- 三级甲等医院外科医护群体功能性肠病及功能性消化不良患病现况调查被引量：10
- 2011年
- 目的调查3级甲等医院外科医护群体功能性肠病及功能性消化不良患病现况。方法选择沈阳军区总医院179例外科医护群体为调查对象,后者分别接受了"功能性肠病调查问卷"(依据罗马Ⅲ标准设计)调查,并与184例内科医护群体相同问卷测试结果比较。结果 179例外科医护群体中确诊功能性肠病及功能性消化不良患者42例,患病率23.46%,明显高于对照组(20例,10.87%,χ2=13.11,P<0.01)。外科医护群体肠易激综合征和功能性消化不良患病例数明显多于对照组(均P<0.05),同时前者中功能性肠病重叠型例数明显多于对照组,而后者中功能性肠病单一型例数明显多于外科医护群体(均P<0.05)。结论 3级甲等医院外科医护群体存在着功能性肠病患病倾向,并以重叠型和功能性消化不良表现为主。
- 赵佳钧申杰李宏宇孙大为
- PTEN、KAI1基因双转染对乏氧条件下胰腺癌细胞增殖的影响
- 2012年
- 为利用乏氧条件下人胰腺癌ASPC-1细胞观察PTEN和KAI1基因双转染后对肿瘤细胞增殖的影响，分别构建PTEN和KAI1基因的过表达载体，同时转染乏氧培养的胰腺癌ASPC-1细胞，Westernblot验证PTEN和KAI1蛋白的表达，并采用MTT法绘制生长曲线，观察细胞增殖情况；克隆形成实验分析肿瘤细胞形成集落能力。结果表明，双基因转染后，乏氧培养的ASPC-1细胞中PTEN和KAI1蛋白均存在过表达。PTEN和KAI1基因双转染后乏氧ASPC-1细胞增殖速率和克隆形成能力显著下降。结论：乏氧条件下PTEN、KAII基因双转染ASPC-1细胞，能够抑制肿瘤细胞的增殖能力，表明PTEN、KAI1基因联合可能对胰腺癌的基因治疗具有潜在应用价值。
- 李宏宇刘旭吴春燕陈江王迪郭晓钟
- 关键词：胰腺癌PTENKAI1乏氧
- 药理浓度抗坏血酸诱导胰腺癌PANC1细胞的死亡方式及机制研究
- 2012年
- 目的探讨抗坏血酸（Asc）对胰腺癌PANC1细胞的生物学影响及其作用机制。方法PANC1细胞用不同浓度（0～40nmol／L）Asc处理24、48、72h。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察Asc对胰腺癌PANC1细胞增殖的影响，流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率，倒置显微镜和透射电镜观察细胞形态，应用JC-1染色流式细胞仪检测线粒体膜电位。同时，观察Asc对抗氧化剂过氧化氢酶（catalase）及红细胞（RBC）预处理的PANC1细胞形态及线粒体膜电位的影响。结果药理浓度Asc选择性抑制PANC1细胞增殖，并呈浓度、时间依赖性。5mmol／LAsc处理后PANC1细胞被阻滞在G2／M期[（32．55±7．14）％比（22．00±1．27）％，t=5．808，P〈0．05]，但凋亡率未见增加[（1．98±1．80）％比（1．09±0．16）％]。≥5mmol／LAsc诱导PANC1细胞发生胀亡性死亡，细胞线粒体膜电位呈浓度依赖性明显降低。catalase及RBC预处理能明显抑制细胞线粒体膜电位的下降，减轻细胞发生胀亡的程度。结论Asc在体外对胰腺癌PANC1细胞有明显的增殖抑制作用。Asc诱导PANC1细胞发生胀亡性死亡，而不是凋亡，其机制可能与线粒体膜电位下降有关。
- 高燕梁丹红宋薇杜冀晖张厚德徐克成
- 关键词：胰腺肿瘤抗坏血酸细胞死亡过氧化氢线粒体膜电位
- 不同症状分腹泻型肠易激综合征患者外周血sIgG及sIgE表达分析被引量：1
- 2011年
- 目的:分析不同症状分腹泻型肠易激综合征患者食物特异性抗体IgG(sIgG)及IgE(sIgE)表达。方法:连续选择近期就诊的腹泻型IBS患者43例,并按IBS总体症状分组(高症状分腹泻型IBS组,23例和低症状分腹泻型IBS组,20例),对照组为35例同龄、同性别的同期健康体检者。入选对象均接受了外周血sIgG及sIgE检测。结果:腹泻型IBS组外周血sIgG及sIgE表达阳性例数和阳性率均明显多于对照组,同时高症状分腹泻型IBS组外周血sIgG表达阳性例数和阳性率均明显多于低症状分腹泻型IBS组(P<0.05～0.01)。结论:腹泻型IBS患者外周血存在明确sIgG及sIgE优势表达,这种表达与腹泻型IBS症状轻重有密切关系。
- 赵佳钧李宏宇孙大为
- 关键词：迟发型过敏反应
- 门诊就诊的北方寒区部队基层官兵功能性胃肠病患病情况分析被引量：3
- 2010年
- 目的分析门诊就诊的北方寒区部队基层官兵功能性胃肠病(FGID)患病情况。方法选择近期前来解放军沈阳军区总医院消化内科门诊就诊的138例基层官兵FGID患者,后者接受了FGID问卷(罗马Ⅲ标准)调查,并与同期就诊的372例非军人FGID患者(对照组)相同问卷测试结果比较。结果两组对象均以功能性消化不良和肠易激综合征分布居前,但组间比较,FGID各亚型分布无明显区别(P均>0.05),但基层官兵组复合亚型(合并两个以上)FGID患者明显多于对照组,单一亚型少于后者(P均<0.05)。结论北方寒区部队基层官兵FGID患者各亚型与同期非军人城市人口中同病就诊患者分布接近。
- 赵佳钧孙大为李宏宇申杰
- 关键词：门诊医疗
- 乏氧条件下PTEN、KAI1基因双转染对胰腺癌AsPC1细胞增殖、转移的影响
- 2012年
- 目的观察乏氧环境下PTEN和KAI1基因双转染人胰腺癌AsPCI细胞后对其增殖、迁移的影响。方法应用我们前期构建的PTEN和KAI1基因过表达载体同时转染乏氧环境培养的人胰腺癌AsPCI细胞，采用蛋白质印迹法检测PTEN和KAI1蛋白的表达，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞的增殖，克隆形成实验观察肿瘤细胞形成集落能力，Transwell小室实验观察细胞的迁移能力。结果双基因转染后，乏氧培养的AsPCI细胞的PTEN、KAI1蛋白表达量较空载体转染组细胞增加2．05倍及1．51倍；细胞增殖显著减缓（0．5比0．8，P=0．000）；克隆形成数显著下降[（41．67±5．03）个比（86．00±7．81）个，P=0．017）]；细胞迁移能力明显减弱（0．68±0．05比1．23±0．03，P=0．003）。结论乏氧条件下PTEN、KAI1基因双转染AsPCI细胞后能够抑制其增殖、迁移能力，基因联合治疗胰腺癌可能具有潜在的应用价值。
- 李宏宇李建军郭晓钟刘旭吴春燕赵佳钧陈延志
- 关键词：胰腺肿瘤细胞系肿瘤转染
