陕西省自然科学基金(2005C215)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 相关作者：吴元明陈南春张晓楠邢小红韩者艺更多>>
- 相关机构：第四军医大学第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家自然科学基金陕西省社会发展科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组人Era蛋白的可溶性表达、纯化及生物学活性测定被引量：2
- 2008年
- 目的:为了得到可溶性表达的人Era(hEra)蛋白,并检测其生物学活性。方法:把人era的cDNA基因从pUC19质粒亚克隆入表达质粒pMAL-p2x中。pMAL-hEra转化大肠杆菌TB1,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果:pMAL-hEra载体表达的融合蛋白是以可溶状态存在,表达量占菌体总蛋白的23.9%。再利用直链淀粉亲和色谱柱对表达的融合蛋白进行纯化,接着用因子X将融合部分切除,但切除后的hEra蛋白不稳定,随着时间的延长而被降解。活性测定结果表明人Era蛋白能与GTP结合,并具有GTP酶的活性。结论:可溶性表达了人Era蛋白,并用体外实验证实人Era蛋白是一种G蛋白,这对人era基因的功能研究具有重要意义。
- 吴元明张晓楠邢小红张俊杰陈南春陈苏民
- 关键词：人ERA可溶性表达生物活性测定
- shRNA表达载体pWH1的构建及用于HIF1基因的沉默被引量：4
- 2008年
- 目的:构建用于RNAi的shRNA(small hairpinRNA)表达载体及检测其对低氧诱导因子-1(Hypoxia-inducibleFactor-1,HIF1)基因的沉默效果。方法:从人血基因组中PCR扩增出H1基因启动子,克隆入酶切处理后的pEGFP-C1载体片段中,此载体命名为pWH1。以人HIF1cDNA基因为靶标设计引物,退火后克隆入pWH1。新的载体转染SGC7901细胞,然后用RT-PCR和Western blot检测HIF1基因的表达改变。结果:构建的pWH1载体能很好地表达针对HIF1基因的shRNA,RT-PCR和Western blot的结果显示HIF1基因的mRNA和蛋白表达水平均明显下降。结论:成功构建了shRNA表达载体pWH1,这对于基因的功能研究具有重要的意义。
- 吴元明张晓楠韩者艺李春英陈南春
- 关键词：SHRNARNA干涉
- 人Bit1蛋白在淋巴瘤组织中分布的研究
- 2008年
- 目的:探究人Bit1分子在淋巴瘤组织中分布情况.方法:利用已制备并纯化的兔抗人Bit1多克隆抗体,对淋巴瘤组织芯片(63点)进行免疫组化染色(SP法)观察.结果:用免疫组化的方法观察到Bit1分子主要(约30%)在大B细胞淋巴瘤瘤细胞阳性或弱阳性表达,淋巴反应性增生的淋巴细胞Bit1蛋白表达为阴性.结论:在正常淋巴细胞表达为阴性,而在大B细胞淋巴瘤瘤细胞为阳性,这对研究Bit1分子在淋巴瘤的发生及治疗中的作用具有重要意义.
- 吴元明邢小红王哲王文勇黄高昇
- 关键词：淋巴瘤
