重庆市教育委员会科学技术研究项目(KJ060304)
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 相关作者：王佚郭振华金先庆罗庆王志刚更多>>
- 相关机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：重庆市教育委员会科学技术研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 超声辐照维拉帕米微泡体外对神经母细胞瘤多药耐药的逆转作用
- 2010年
- 目的探讨超声辐照维拉帕米(verpamil,VER)微泡逆转肿瘤多药耐药的作用及机制。方法制备包裹维拉帕米的乳酸-羟基乙酸共聚物(VER-PLGA)超声微泡造影剂;通过长春新碱(VCR)多次小剂量递增诱导法建立神经母细胞瘤耐药株(SK-N-SH/VCR),并检测其耐药性;根据处理因素不同分为6组:A:空白对照组(SK-N-SH/VCR培养组),B:SK-N-SH/VCR+VER(50μg/ml)组,C:SK-N-SH/VCR+VER(250μg/ml)组,D:SK-N-SH/VCR+超声辐照组,E:SK-N-SH/VCR+PLGA微泡+超声辐照组,F:SK-N-SH/VCR+VER-PLGA微泡(VER50μg/ml)+超声辐照组。48h后,利用RT-PCR和免疫组织化学染色法(ICC)检测各组细胞中MDR1基因及P-gp的表达水平,评估VER在不同处理组中逆转肿瘤细胞耐药的效果。结果①成功制备包裹维拉帕米的VER-PLGA微泡造影剂,包封率为32%;②成功建立神经母细胞瘤耐药株SK-N-SH/VCR,MTT法证实其对不同化疗药物的耐药倍数是野生株的2.3～5.4倍;③ICC证实耐药株高表达MDR1基因;④RT-PCR及免疫组化法检测发现MDR1基因在F组中的光密度值及P-gp表达水平较其他组明显降低(P<0.05)。结论超声辐照包裹小剂量维拉帕米的微泡可有效逆转肿瘤多药耐药。
- 陈镜宇全学模郭振华王荞唐毅王佚
- 关键词：超声微泡维拉帕米多药耐药
- 超声微泡促腺病毒载体转染MDR1基因效率的体外实验研究被引量：6
- 2009年
- 目的探讨超声微泡造影剂在体外促进腺病毒载体介导的MDR1基因转染兔骨髓单个核细胞的效率,并初步探讨其安全性。方法根据是否加入超声微泡造影剂和超声辐照将分选的兔骨髓单个核细胞分为常规培养组(A)、腺病毒MDR1基因转染组(B)、腺病毒MDR1基因转染+超声辐照组(C)、微泡造影剂+腺病毒MDR1基因转染组(D)、微泡造影剂+腺病毒MDR1基因转染+超声辐照组(E)。收集各组细胞,应用RT-PCR法、流式细胞技术等分别从基因、功能及细胞生物学特性等方面检测外源性MDR1基因在骨髓单个核细胞内的功能性表达及安全性。结果收获高滴度的Ad5-MDR1腺病毒载体并成功制备腺病毒微泡造影剂;RT-PCR结果显示,除A组外其余4组在194bp处均观察到特异性MDR1电泳条带,证实外源性MDR1基因通过腺病毒载体整合到细胞基因组中,且E组MDR1电泳条带的光密度比值明显高于B、C、D组(P<0.05);柔红霉素排出实验证实外源性MDR1基因表达产物P-gp有药物外排泵功能,且E组P-gp阳性率最高(P<0.05),而柔红霉素阳性率显著降低;一定强度的超声辐照及微泡造影剂对骨髓单个核细胞的细胞周期无明显影响。结论低频超声波击碎微泡造影剂,能促进以腺病毒为载体介导的外源性MDR1基因转染兔骨髓单个核细胞的效率,且安全可行。
- 王佚郭振华金先庆郭玉霞罗庆王志刚
- 关键词：MDR1基因超声微泡造影剂基因治疗
- 载药微泡逆转恶性肿瘤多药耐药的研究进展
- 2010年
- 陈镜宇全学模王佚
- 关键词：肿瘤多药耐药恶性肿瘤逆转微泡化疗方案重大疾病
- 超声微泡造影剂促腺病毒介导MDR1基因转染兔骨髓单个核细胞的作用机制及安全性研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨超声微泡造影剂促进以腺病毒为载体介导的多药耐药基因1（MDRl）体外转染兔骨髓单个核细胞的作用机制和安全性。方法根据是否加入超声微泡造影剂和进行超声辐照将分选的兔骨髓单个核细胞分为常规培养组（A）、腺病毒转染组（B）、腺病毒转染＋超声辐照组（c）、腺病毒微泡造影剂转染组（D）和腺病毒微泡造影剂转染＋超声辐照组（E）。不同实验因素处理后，采用流式细胞仪检测各组细胞外源性MDRI基因的转染率，同时观测转染后不同时间各组细胞体外扩增情况；台盼蓝拒染法计数各组细胞的存活率；分别用扫描电镜和透射电镜观察超声辐照后细胞超微结构的改变。结果流式细胞仪检测各组细胞MDRl基因的转染率分别为0．39％±0．11％、5．03％±0．35％、4．93％±（0．38％、5．25％±0．80％、19．93％±1．51％，E组明显高于其余4组（P〈0．05）；试验各组细胞住转染后不同时期体外增殖情况差异无统计学意义（P〉0．05），各组细胞存活率差异亦无统计学意义（P〉0．05）；一定强度的超声辐照后，骨髓单个核细胞胞膜出现一过性的小孔，细胞器发生可逆性肿胀改变。结论超声微泡造影剂可使兔骨髓单个核细胞通透性暂时性提高，促进腺病毒载体介导的MDRI基因转染；同时不会对细胞的增殖能力、存活率及超微结构造成严重的不可逆损害，证明其是一种安全可行的基因转移新方法。
- 郭振华王佚金先庆郭玉霞罗庆王志刚
- 关键词：超声检查微气泡P糖蛋白
