国家自然科学基金(31171758)
- 作品数：7 被引量：26H指数：4
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- 酿酒酵母GSH Ⅰ基因的克隆、表达与结构分析被引量：1
- 2013年
- γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSHI)是合成谷胱甘肽的关键酶。通过构建GSHI活性较高的重组菌来提高合成GSH的能力。利用PCR技术扩增获得了酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)2-10515的gshI基因,构建原核表达载体pET-28a-gshI,转化到Escherichia coli BL21(DE3)中,重组菌经诱导表达后,测得GSHI的酶活力为46.09U/mg湿菌,活性较高。进一步利用生物信息学方法分析和预测GSHI基因的序列和蛋白结构,为在基因水平上提高该酶的表达量和活性提供了理论依据。
- 宋冬梅朱益波周丽丽郑丽雪齐斌
- 关键词：谷胱甘肽Γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶
- 原生质体诱变选育高产谷胱甘肽菌株及基因表达分析被引量：3
- 2013年
- 以Saccharomyces cerevisiaeY518为出发菌株,通过原生质体诱变提高产谷胱甘肽的能力。结果表明:用0.03mol/L HNO2处理原生质体3min,致死率为85.96%,突变率为6.85%;经过4轮连续的HNO2诱变,筛选得到一株胞内谷胱甘肽产量(14.85mg/g干质量)约比出发菌株高24%的突变株。进一步研究谷胱甘肽合成相关的基因表达量,发现其合成途径编码限速酶的基因GSH1的表达量上调了2.26倍。因此,突变株胞内谷胱甘肽水平的提高可能是由上调的GSH1的表达量导致的。
- 孙姜朱益波王立梅邓大庆齐斌
- 关键词：SACCHAROMYCESCEREVISIAE原生质体诱变
- 不同pH值酿酒酵母分批发酵生产谷胱甘肽数学模型建立被引量：4
- 2013年
- 以麦芽汁为发酵培养基,考察不同pH值条件下酿酒酵母CS10515-1分批发酵合成谷胱甘肽的影响,对实验数据进行分析并拟合出数学模型。结果表明:两种pH值条件下高斯拟合对谷胱甘肽产量数据的拟合效果较好,相关系数(R2)分别为0.99235(pH5.0)、0.98842(pH6.0),而对生物量、基质消耗拟合效果差。另外,当发酵pH值恒定在5.0时,32h时谷胱甘肽产量达最大,为72mg/L,此时生物量为4.59g/L;当发酵pH值恒定为6.0时,同样也是32h时谷胱甘肽产量达最大,为91mg/L,此时生物量为4.11g/L。
- 郑丽雪谢群凡谢群凡王立梅
- 关键词：谷胱甘肽麦芽汁酿酒酵母
- 内源性氧化胁迫促进酿酒酵母合成谷胱甘肽的潜在机制分析被引量：13
- 2017年
- 利用转录组学分析手段结合生理生化特性来研究酿酒酵母突变株高产谷胱甘肽的潜在机制。结果表明:突变株谷胱甘肽合成限速酶、抗氧化酶活力及其编码基因表达量、过氧化氢和还原型辅酶Ⅱ(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)含量显著提高;丙酮酸激酶活力、丙酮酸、柠檬酸和琥珀酸含量显著降低;此外,三羧酸循环和磷酸戊糖途径的基因表达量分别显著下调和上调。因此,突变株可能在遭受内源性活性氧过氧化氢的胁迫下,通过调节谷胱甘肽合成限速酶活力加强了谷胱甘肽的合成,与抗氧化酶共同抵御氧化胁迫;丙酮酸激酶活力减弱降低了丙酮酸的合成,减少了三羧酸循环的通量,使得磷酸戊糖途径通量增加,从而提高了NADPH含量,为谷胱甘肽的合成提供了充足的还原力。
- 王立梅任清华郑丽雪孙姜齐斌朱益波
- 关键词：谷胱甘肽氧化胁迫酿酒酵母
- 酵母突变株Y518的生理特性分析
- 2014年
- 以酿酒酵母突变株Y518为研究对象,研究其生理特性。本文比较了突变株Y518与原始菌株2-10515的平板菌落形态、在培养过程中生长量、耗糖速率、发酵液pH、酒精产量及菌体蛋白表达量等生理方面的变化规律。结果表明,与2-10515相比,Y518生长缓慢,葡萄糖消耗速率低,发酵过程中发酵液pH低,且菌体蛋白表达量高。Y518在YEPD培养基上的菌落形态与2-10515相似,菌落较小,TTC染色为白色,在非发酵型碳源培养基上几乎不生长。说明Y518生理发生改变,而且存在呼吸缺陷。
- 刘莉娟朱益波齐斌王立梅
- 关键词：酿酒酵母生理改变
- 利用低pH处理促进酿酒酵母2-10515生产谷胱甘肽被引量：6
- 2014年
- 根据酿酒酵母2-10515摇瓶发酵生产谷胱甘肽发酵曲线特点,设计了一种低p H环境,即将种子液先在p H3.5条件下培养6 h,经接种后以适应发酵过程中长时间的低p H环境从而促进其合成谷胱甘肽的能力。低p H环境中的种子液接种发酵过程中,发酵液生物量、胞内谷胱甘肽总产量及胞内谷胱甘肽含量最大值分别为9.7 g/L、25.6 mg/L、4.1 mg/g,比未经处理条件下最大值分别提高了38.3%、39.5%、5.8%。此结果表明,利用低p H处理能够提高酿酒酵母2-10515生产谷胱甘肽能力。
- 郑丽雪王斌朱娉齐斌
- 关键词：酿酒酵母发酵谷胱甘肽
- 不同发酵时期添加金属离子对酿酒酵母合成谷胱甘肽的影响被引量：7
- 2014年
- 通过摇瓶发酵培养,研究了Cu2+,Mg2+,K+,Fe2+,Mn2+5种金属离子在不同发酵时间添加对酿酒酵母CS10515-1生产谷胱甘肽的影响。实验结果表明:在发酵初期(0 h),当K+、Mg2+、Fe2+添加量分别为0.15、0.12、0.09 g/L时,GSH的产量分别为88.53、52.73、41.42 mg/L,相比空白对照分别提高了63.50%、36.58%和44.25%。在15 h时,当Mg2+添加量为0.09 g/L时,GSH产量为61.75 mg/L,比对照组提高82.01%。当发酵至24 h时,金属离子的添加对GSH的产量无明显促进作用。
- 郑丽雪刘梦滢王立梅齐斌
- 关键词：谷胱甘肽酿酒酵母金属离子
