国家自然科学基金(81070981)
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
- 相关作者：赵建华郭乔楠王永飞陈太邦刘明永更多>>
- 相关机构：第三军医大学大坪医院第三军医大学西南医院第三军医大学新桥医院更多>>
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- 体外树突状细胞通过NT-3上调P-ERK1/2的表达促进神经干/祖细胞分化被引量：2
- 2012年
- 目的观察树突状细胞(dendritic cells,DCs)对神经干/祖细胞(neural stem/progenitor cells,NSPCs)分化的影响,探讨神经营养素-3(Neurotrophin-3,NT-3)在DCs调控NSPCs分化中可能的作用机制。方法实验共设5组,分别为NSPCs组、NSPCs/DCs组、NSPCs+NT-3组、NSPCs/DCs+抗NT-3组和DCs组。共培养24、48、72 h后,ELISA法检测各组上清液中NT-3含量;7 d后荧光免疫细胞化学法检测各组NSPCs分化情况。Western blot检测各组NSPCs磷酸化的细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK1/2)表达。结果 NSPCs/DCs组上清液中NT-3含量较NSPCs组、NSPCs/DCs+抗NT-3组和DCs显著升高(P<0.05)。NSPCs/DCs组和NSPCs+NT-3组β-tubulin-Ⅲ阳性细胞数较NSPCs组和NSPCs/DCs+抗NT-3组显著增高(P<0.05),而NSPCs组和NSPCs/DCs+抗NT-3组GFAP阳性细胞较NSPCs/DCs组和NSPCs+NT-3组显著增高(P<0.05)。NSPCs/DCs组和NSPCs+NT-3组NSPCs中的p-ERK1/2的表达较其余两组增高(P<0.05)。结论 NSPCs与DCs共培养能显著促进NSPCs分化为神经元,可能与共培养后NT-3表达量增高,通过其特异性受体TrkC激活下游信号通路MEK-ERK有关。
- 陈太邦赵建华王永飞王钟郭乔楠
- 关键词：树突状细胞共培养分化NT-3
- Ⅱ型胶原体外促进大鼠骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化被引量：3
- 2015年
- 目的探讨Ⅱ型胶原(collagenⅡ)在体外促进大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)向软骨细胞的定向分化作用。方法体外培养BMSCs,分不同collagenⅡ接种浓度组(25、50、100、200μg/m L)和空白对照组,分别作用于BMSCs 7、14、21 d,采用CCK-8法检测各不同浓度组对BMSCs活性的影响;q PCR法和免疫荧光法检测不同浓度组处理BMSCs后,各浓度组与空白对照组相比,collagenⅡ、SOX9及aggrecan mRNA及蛋白表达量的差异。结果 1CCK-8检测结果显示各浓度组在7、14、21 d D(450)值差异无统计学意义(P>0.05);2q PCR检测结果显示21 d后,不同浓度组与空白对照组比较,collagenⅡ、SOX9及aggrecan mRNA表达量均升高(P<0.05),以100μg/m L组最高(P<0.01);14 d时,各浓度组collagenⅡ、SOX9及aggrecan mRNA以100μg/m L组上调最明显(P<0.05),而在7 d时,各组之间三者mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05);3各浓度组21 d时免疫荧光结果显示:在100μg/m LⅡ组collagenⅡ、SOX9及aggrecan mRNA蛋白的表达量较其他各组均明显上调(P<0.05)。结论 collagenⅡ可在体外促进大鼠BMSCs向软骨细胞分化,其中以100μg/m L组促进作用最为明显。
- 王冠陈星星薛鑫郭乔楠刘鹏范伟力刘明永赵建华
- 关键词：骨髓间充质干细胞软骨细胞
- 树突细胞及神经干细胞/前体细胞联合移植促进脊髓损伤大鼠运动功能恢复被引量：5
- 2011年
- 目的观察树突细胞(dendritic cells,DCs)及神经干细胞/前体细胞(neural stem/progenitor cells,NSPCs)联合移植对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)修复的作用,并初步探讨其机制。方法 SD成年大鼠80只制作脊髓损伤模型,随机数字表法分为4组,SCI 9 d后分别移植Hanks平衡盐溶液(Hanks balanced salt solution,HBSS)、DCs、NSPCs、DCs+NSPCs。通过BBB评分法评估SCI大鼠运动功能,组织病理学方法观察损伤局部病理学改变。采用增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)转基因SD大鼠脑来源的NSPCs,损伤局部移植2周后观察存活情况。免疫组织荧光法观察损伤局部神经生长因子-3(neurotrophin-3,NT-3)的表达变化。结果移植84 d后DCs+NSPCs组运动功能明显改善(P<0.05),DCs+NSPCs组、NSPCs组、DCs组、HBSS组BBB评分分别为(11.70±0.99)、(9.75±0.50)、(7.40±0.93)、(5.93±0.78),相邻两组有统计学差异(P<0.05)。DCs+NSPCs组损伤区范围及空洞均明显减少(P<0.05),NSPCs存活数量明显增加(P<0.01),显著上调损伤区NT-3的表达。结论 DCs联合NSPCs移植能够促进神经干细胞存活,减少损伤区范围及空洞形成,改善SCI大鼠运动功能。损伤区NT-3的表达增加可能是促进修复的机制之一。
- 晁瑞赵建华刘明永王永飞郭乔楠
- 关键词：脊髓损伤树突细胞神经干细胞
- DCs和NSPCs共培养促进NSPCs增殖及其机制的初步研究被引量：2
- 2012年
- 目的观察体外Transwell共培养系统中树突状细胞(dendritic cells,DCs)对神经干/前体细胞(neural stem/progenitor cells,NSPCs)增殖的影响,初步探讨神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)在DCs调控NSPCs中的作用机制。方法根据是否采用Transwell小室将DCs和NSPCs共培养分为分隔培养(DCs/NSPCs组)和混合培养(DCs+NSPCs组),ELISA法测定DCs组、NSPCs组、DCs+NSPCs组、DCs/NSPCs组共培养48 h上清中的NT-3的含量。为观察NT-3在DCs调控NSPCs中的作用及可能的机制,成球法检测NSPCs组、NSPCs/DCs+K252a组、NSPCs+DCs组、NSPCs+NT-3组的NSPCs增殖,免疫细胞荧光法和Western blot法检测各组NSPCs表面酪氨酸激酶受体C(TrkC)的表达。结果 ELISA实验结果显示,Transwell共培养48 h上清NT-3的含量,NSPCs/DCs组较DCs组和NSPCs组明显升高(P<0.05)。镜下观察、测量结果显示NSPCs/DCs组和NSPCs+NT-3组神经球数量增多,平均直径明显增大(P<0.05)。免疫细胞荧光和Western blot检测结果表明,NSPCs+DCs组和NSPCs+NT-3组中NSPCs的TrkC表达较NSPCs组和NSPCs/DCs+K252a组高(P<0.05)。结论体外DCs与NSPCs共培养,促进NSPCs增殖、NT-3的分泌及TrkC的表达,NT-3可能是通过TrkC受体参与NSPCs增殖的调控。
- 王永飞赵建华晁瑞陈太邦郭乔楠
- 关键词：神经干细胞树突状细胞神经营养素-3
- 非手术与手术治疗胸腰椎骨质疏松骨折的疗效观察被引量：2
- 2019年
- 目的比较非手术与经皮椎体成形术(PVP)治疗新鲜胸腰椎骨质疏松骨折的临床疗效。方法回顾性分析2016年1月至2017年3月我院收治的201例胸腰椎骨质疏松骨折患者的临床资料,其中非手术治疗48例(保守组),行PVP治疗153例(手术组)。对比2组患者的治疗费用及治疗后1周、1个月、3个月、6个月及12个月的VAS评分、Oswestry功能障碍指数(ODI评分)、治疗后12个月椎体前缘高度丢失率、后凸Cobb角的变化情况。结果所有患者随访12~21个月,平均13.7个月。保守组患者未出现卧床相关并发症,手术组出现1例骨水泥渗漏至椎管。在治疗后1周、1个月,保守组VAS评分较手术组高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后3个月,2组VAS评分差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后1周、1个月、3个月,保守组ODI评分较手术组高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后6个月,2组ODI评分差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后12个月保守组椎体前缘高度丢失率及后凸角较手术组大,差异有统计学意义(P<0.05)。保守组治疗费用较手术组低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论非手术治疗可改善胸腰椎骨质疏松性骨折引起的疼痛和残疾,与PVP相比,症状缓解较慢,但风险低,患者经济负担小,是安全有效的治疗方法。
- 丁权殷翔姜复龄赵建华
- 关键词：非手术治疗经皮椎体成形术经皮椎体后凸成形术
- 树突状细胞通过NT-3/TrkC信号通路调控神经干细胞存活的体外研究被引量：1
- 2013年
- 目的研究共培养状态下树突状细胞(dendritic cell,DC)对神经干细胞(neural stem cell,NSC)存活的影响及其作用机制。方法体外分离、纯化SD大鼠原代DC和NSC,将二者用Transwell技术共培养,用NT-3特异性抗体中和NT-3的表达;然后采用qRT-PCR方法检测DC中神经营养素-3(neurotrophin-3,NT-3)的mRNA水平,流式细胞术检测NSC凋亡;同时用免疫荧光、Western blot技术确定NSC表面NT-3特异性受体Trk C的表达。结果与DC单独培养组相比,共培养体系中,DC表达NT-3水平显著性增强(P<0.05);同时共培养能显著增加NSC存活,该效应能被NT-3特异性中和性抗体阻断;共培养能够增加NSC中NT-3特异性受体TrkC表达(P<0.05),并上调TrkC磷酸化水平,而NT-3特异性抗体能够抑制TrkC表达和磷酸化上调(P<0.05)。结论 DC和NSC共培养能够增加DC中NT-3表达,高表达的NT-3则通过NSC膜上的TrkC受体促进NSC的存活。
- 王钟陈太邦王永飞郭乔楠赵建华
- 关键词：树突状细胞NT-3TRKC存活信号通路
