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氧化亚铁硫杆菌铁氧化系统分子生物学研究进展被引量：17: 2002年; 氧化亚铁硫杆菌（Thiobacillus ferrooxidans,简称T.f）是目前研究最多、最具经济价值的浸矿微生物。由于该菌的能量代谢对于生物浸矿起决定作用,因此其机制的研究必然能促进对该菌生理特性的认识及其遗传改造。氧化亚铁硫杆菌生长方式代表了迄今所知的能够进行生长的热力学极限,可供该菌生长利用的△Eh仅有340mV,氧化Fe2+所能得到的能量很少。在 Fe2+氧化过程中,电子通过电子传递链最终传递给氧,; 田克立林建群张长铠颜望明; 关键词：氧化亚铁硫杆菌分子生物学

大肠杆菌磷酸果糖激酶基因在氧化硫硫杆菌Tt-7中的表达被引量：1: 2004年; 专性自养极端嗜酸性氧化硫硫杆菌缺乏EMP、ED途径以及三羧酸循环的关键酶 (如磷酸果糖激酶等 ) ,不能氧化有机物获得能量 .本文利用PCR技术扩增E .coliK 12磷酸果糖激酶 1基因 (pfkA) ,将该基因与广泛寄主的IncQ质粒pJRD2 15连接构建重组质粒pSDK 1,该质粒可与pfk基因缺陷株E .coliDF10 10互补 .通过接合转移的方式将其导入氧化硫硫杆菌Tt 7中并得到表达 .pSDK 1在宿主Tt 7中有较好的稳定性 ,在无选择压力条件下连续传 5 0代仍可保留 75 % .酶活性测定表明 ,pSDK 1的pfkA基因在缺陷株E .coliDF10 10中表达水平〔(96 .6± 0 .6 6 )U/g蛋白〕略高于原始菌株E .coliK 12〔(85 .9± 1.12 )U/g蛋白〕 ;而在氧化硫硫杆菌中则以较低水平进行表达〔(12 .4± 0 .73)U/g蛋白〕 ,并且其表达水平不受培养基中葡萄糖的影响 .实验表明 ,在无机盐培养基中加入葡萄糖时 ,含质粒pSDK 1的氧化硫硫杆菌Tt 7可利用培养基中的葡萄糖而加快生长 ,而对照菌株的生长则未受明显影响 ;但是重组菌利用葡萄糖的速度较缓慢 .图 5表 2参; 田克立林建群刘相梅刘缨张长铠颜望明; 关键词：氧化硫硫杆菌

大肠杆菌磷酸果糖激酶基因在极端嗜酸性氧化硫硫杆菌中的表达被引量：1: 2003年; 构建了含大肠杆菌磷酸果糖激酶 (EC 2 .7.1 .1 1 )基因pfkA的重组质粒pSDK 1 ,利用大肠杆菌pfk缺陷株筛选含目的基因的重组质粒 ,通过接合转移的方式将其导入氧化硫硫杆菌Tt Z2中 ,接合转移频率达 2 6× 1 0 - 6 。重组质粒在Tt Z2中有较好的稳定性 ,在无选择压力条件下传代 5 0次基本保持稳定 (重组质粒保留 68%以上 )。酶活性测定、SDS PAGE及RT PCR结果表明 ,pfkA基因在氧化硫硫杆菌中得到表达 ,但其表达水平低于大肠杆菌。葡萄糖可促进含pSDK 1的氧化硫硫杆菌Tt Z2的生长 ,而对照菌株的生长则未受明显影响。; 田克立林建群刘相梅刘缨张长铠; 关键词：大肠杆菌

大肠杆菌磷酸果糖激酶基因在野生型专性自养嗜酸性氧化硫硫杆菌Tt-Z2中的表达被引量：3: 2004年; 利用PCR技术扩增E .coliK 12磷酸果糖激酶 1基因 (pfkA) ,将该基因与广泛寄主的IncQ质粒pJRD2 15连接构建重组质粒pSDK 1,该质粒可与pfk基因缺陷株E .coliDF10 10互补 .通过接合转移的方式将其导入专性自养极端嗜酸性氧化硫硫杆菌Tt Z2中并得到表达 .pSDK 1在宿主Tt Z2中有较好的稳定性 ,在无选择压力条件下连续传5 0代仍可保留 6 8% .酶活性测定表明 ,pSDK 1的pfkA基因在缺陷株E .coliDF10 10中表达水平略高于出发菌株E .coliK 12 ;而在氧化硫硫杆菌中则以较低水平进行表达 .葡萄糖可促进含pSDK 1的氧化硫硫杆菌Tt Z2的生长 ,而对照菌株的生长则未受明显影响 .说明重组菌可部分利用葡萄糖作为碳源而生长 .; 田克立林建群刘相梅刘缨张长铠颜望明; 关键词：氧化硫硫杆菌

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国家自然科学基金(30170026)