国家自然科学基金(30370997)
- 作品数：4 被引量：21H指数：3
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- 利用茎尖培养与病毒净处理脱除砂梨病毒
- 本试验分离培养获得3个梨品种黄花梨、丰水梨和5-6-45的离体试管苗,经检测确认这些样品均带有苹果茎沟病毒（ASGV）、苹果褪绿叶斑病毒（ACLSV）和苹果茎痘病毒（ASPV）。通过在培养基中添加不同浓度的病毒净处理60...
- 张虹洪霓邓晓云王国平
- 关键词：砂梨茎尖培养脱病毒
- 文献传递
- 生物素标记cDNA探针杂交检测梨树上3种潜隐病毒研究被引量：3
- 2006年
- 本研究合成了苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎痘病毒(ASPV)的生物素标记cDNA探针,对斑点杂交和免疫印迹杂交检测这3种病毒的效果进行了分析。以含ACLSV和ASGV克隆片段的大肠杆菌菌液为样品时,斑点杂交检测灵敏度分别为80 cfu/μL和50 cfu/μL。以离体培养砂梨植株为材料,采用斑点杂交法检测砂梨离体培养植株粗提液中的3种病毒,均产生强的杂交信号,且特异性好。比较斑点杂交和ELISA检测病毒含量相对较低的热处理再生植株中ASGV和ACLSV,结果表明斑点杂交具有较高的灵敏度。组织印迹杂交检测砂梨离体植株ASGV和ACLSV的结果显示,这2种病毒在离体植株的各部位均有分布,自基部至茎尖各部位印迹均产生很强的杂交信号。
- 王利平王国平谭荣荣洪霓
- 关键词：斑点杂交潜隐病毒
- 来源于桃和苹果的苹果褪绿叶斑病毒的部分分子生物学特性和cp基因的原核表达被引量：6
- 2007年
- 从桃和苹果上分离得到苹果褪绿叶斑病毒ACLSV-HBP和ACLSV-C2个分离物,采用RT-PCR法进行扩增,所获扩增片段经序列测定,其全长分别为1768nt(ACLSV-HBP)和1751nt(ACLSV-C)。这2个分离物扩增片段全长的同源性为83%,mp基因片段核苷酸和推导编码氨基酸序列同源性分别为82.6%和87.1%;cp基因均由582nt组成,其核苷酸和推导编码氨基酸序列同源性分别为87.8%和95.9%。将2个分离物的cp基因与已报道ACLSV分离物进行序列同源性比较,结果显示ACLSV-HBP与SX/2的cp基因核苷酸序列及推导编码氨基酸序列同源性最高,分别为94.0%和96.4%。将ACLSV-HBP分离物的cp基因克隆到原核表达载体pGEX-KG,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE分析表明,融合蛋白大小约为46kDa。Western-blot分析表明,该基因在大肠杆菌内得到高效表达,融合蛋白具有抗原性。
- 郑银英王国平洪霓宋艳苏游红
- 关键词：苹果褪绿叶斑病毒CP基因分子生物学特性SDS-PAGE分析序列同源性RT-PCR法
- 不同热处理技术脱除砂梨病毒效果比较
- ＜正＞苹果茎沟病毒（ASGV）、苹果褪绿叶斑病毒（ACLSV）和苹果茎痘病毒（ASPV）是梨树上发生最普遍和研究较深入的梨病毒。这些病毒在梨树上常混合发生,我国栽培梨品种大部分有病毒感染。热处理和茎尖培养是病毒脱除中最常...
- 洪霓谭荣荣王利平王国平
- 文献传递
- 苹果茎沟病毒梨分离物的生物学特性及CP基因序列分析
- 通过昆诺藜（Chenopodium qumoa）接种鉴定、ELISA和TC-RT-PCR检测,从梨上分离获得苹果茎沟病毒（Apple stem grooving virus,ASGV）20个分离物。选取生物学和血清学特性...
- 郑银英洪霓王国平
- 关键词：苹果茎沟病毒CP基因
- 文献传递
- 苹果茎沟病毒部分分离物的生物学特性与分子鉴定被引量：6
- 2005年
- 通过昆诺藜接种鉴定和 ELISA 检测,从梨和苹果上分离获得苹果茎沟病毒(Apple stem groo-ving virus,ASGV)23个分离物。采用 TC-RT-PCR 对这些分离物进行扩增,均获得特异的扩增片段,PCR 产物经5%PAGE 电泳,出现大小约500、530和600bp 的3种迁移率不同的泳动带型。根据PCR 产物电泳迁移率的差异,选取3个来源于梨的分离物 P-L4、P-6-1-17和 P-3-2-67的 PCR 产物进行克隆与序列测定。经 BLAST 搜索,3个分离物的扩增片段与苹果分离物 P-209的 CP 基因3′端核苷酸序列同源性分别为92.2%、90.4%和88.4%。3个分离物间的核苷酸序列也有较大差异,P-L4/P-6-1-17为95.5%、P-L4/P-3-2-67为90.4%、P-6-1-17/P-3-2-67为88.6%。
- 郑银英王国平洪霓
- 关键词：苹果茎沟病毒酶联免疫吸附反应分离物生物学特性分子鉴定PAGE电泳
- 苹果茎沟病毒梨分离物外壳蛋白基因的克隆和序列分析被引量：11
- 2006年
- 选取生物学和血清学特性存在较大差异的苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)梨分离物P-6-1-17、P-4- 1-69、P-L2和P-D-21,采用RT-PCR法对3’端进行扩增,所获扩增片段经序列测定,全长分别为1089 nt(P-6-1-17、P-L2)和 1069 nt(P-4-1-69、P-D-21)。4个分离物的CP基因均由714 nt组成,其核苷酸和推导编码蛋白氨基酸序列同源性分别为 89．8％-96．4％和94．9％-97．9％。将我国4个分离物的CP基因与已报道ASGV分离物及分子变种进行序列同源性比较和系统进化树分析,结果表明我国ASGV分离物至少可分为2个组群,其中生物学表现明显不同于其它分离物的P-L2, 其CP基因核苷酸序列显示较大的变异。
- 郑银英洪霓王国平胡红菊
- 关键词：苹果茎沟病毒CP基因
