黑龙江省自然科学基金(D2004-23)
- 作品数：2 被引量：23H指数：2
- 相关作者：吴德全张新晨徐华锋杨维良张东伟更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学附属第二医院哈尔滨医科大学黑龙江大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小干扰RNA对胃癌细胞葡萄糖调节蛋白94表达的抑制作用被引量：3
- 2007年
- 目的构建Grp94靶向RNA干扰质粒载体,观察其对人类胃癌细胞株SGC-7901 Grp94基因表达的抑制作用。方法从GenBank中选取人类Grp94基因序列,采用siRNA Target Designer-Version 1.51设计软件设计1对Grp94基因发卡寡核苷酸,序列符合siRNA表达载体siS- TRIKE^(TM)U6的要求并与psiSTRIKE^(TM)质粒载体连接,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6的真核表达载体。采用Lipofectamne^(TM)2000转染试剂进行转染,将重组质粒导入人类胃癌细胞株SGC- 7901内,分别在转染前、转染后24、48和72h通过逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot及免疫荧光技术检测Grp94 mRNA及蛋白水平的表达情况。结果成功构建RNA干扰质粒载体,靶向Grp94干扰质粒载体命名为psiSTRIKE^(TM)/Grp94,将上述质粒转染到人类胃癌细胞株后,观察到psiSTRIKE^(TM)/Grp94能够明显下调Grp94 mRNA及蛋白水平的表达,并随着时间推移稳定存在。结论构建的RNA干扰真核表达载体psiSTRIKE^(TM)/Grp94能明显抑制Grp94 mRNA及蛋白的表达,提示通过降低胃癌细胞中Grp94的表达,可能抑制或辅助抑制胃癌细胞的生长的作用。
- 张新晨杨维良徐华锋吴德全杨宝峰
- 关键词：胃癌RNAI
- 葡萄糖调节蛋白78在胃癌组织中的表达及意义被引量：21
- 2005年
- 目的探讨胃癌组织中葡萄糖调节蛋白78(Grp78)的表达及其与胃癌病理类型、临床分期、分化程度及是否转移的关系。方法胃癌手术切除标本30例,用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Grp78 mRNA相对表达量;免疫组织化学方法检测Grp78蛋白表达情况。结果半定量RT-PCR显示胃癌组织与正常组织中都有Grp78表达,胃癌组织为1．02±0．16,正常组织为0．62±0．14,差异具有统计学意义。其表达程度与肿瘤大小成正比、随肿瘤分化程度降低而升高,Ⅲ、Ⅳ期患者显著高于I、Ⅱ期,有淋巴结转移者表达程度显著高于无淋巴结转移者,与患者年龄及性别无关。免疫组织化学显示:胃癌组织大多数表达在++～+++,正常组织大多表达在-～++。 Grp78蛋白表达程度与肿瘤大小成正比、随肿瘤分化程度降低而升高,Ⅲ、Ⅳ期患者显著高于I、Ⅱ期,有淋巴结转移者表达程度显著高于无淋巴结转移者。结论胃癌组织的Grp78表达呈增高趋势,参与了胃癌的发展过程,并与胃癌部分生物学行为有关。
- 张新晨杨维良徐华锋吴德全张伟峰张东伟
- 关键词：GRP78胃癌免疫组织化学葡萄糖调节蛋白78基因表达
