厦门市科技计划项目(3502Z20094019)
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
- 相关作者：李志鹏更多>>
- 相关机构：北京师范大学更多>>
- 发文基金：厦门市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 多重连接探针在无精子症和严重少精子症患者AZF微缺失检测中的应用被引量：9
- 2012年
- 目的:探讨多重连接探针扩增技术(MLPA)在无精子症及严重少精子症不育男性无精子因子(AZF)微缺失筛查中的应用可能。方法:提取147例无精子症或严重少精子症患者及154例正常对照男性外周血DNA,经95℃变性后与设计合成的AZF区域探针特异杂交,杂交产物经连接酶连接后用带有FAM荧光标记的通用引物扩增,毛细管电泳将产物分离生成MLPA图谱。所有样本同时行AZF序列标签位点(STS)的多重PCR分析。结果:病例组STS缺失检出率为15.0%(22/147),对照组中未检出STS缺失者;MLPA法于病例组中检出40例AZF区探针缺失患者,检出率为27.2%,其中包括22例STS缺失型患者。对照组中亦有20例AZF探针缺失者。结论:相比较传统的多重PCR,MLPA技术在AZF微缺失筛查中具有更佳的检测灵敏度,同时MLPA图谱所展现的高分辨的AZF区遗传学信息将有助于男性生精障碍病因学机制的深入探索。
- 江雨王文博郭奇伟沙艳伟欧阳洪根周裕林
- 关键词：无精子因子微缺失无精子症少精子症多重连接探针扩增技术
- 应用于乳腺癌HER2基因定量检测的分子生物学新方法研究进展被引量：2
- 2013年
- HER2基因的定量检测对于乳腺癌的预后与个体化治疗具有十分重要的意义,常规的检测方法存在着一些不尽人意的方面。近几年来,许多新的基因定量技术相继发展起来并被应用于这一检测领域,如实时荧光PCR、多重探针连接扩增技术,实时荧光多重探针连接扩增技术等。现将相关技术的基本原理、应用评价、存在优缺点等方面作一综述,以期对乳腺癌HER2基因定量检测的发展有所帮助。
- 蔡美娇林英李志鹏郭奇伟周裕林
- 关键词：乳腺癌HER2基因实时荧光PCR
- 石蜡包埋乳腺癌组织HER-2基因mRNA表达检测体系的建立被引量：2
- 2012年
- 目的构建石蜡包埋乳腺癌组织人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)基因mRNA表达相对定量检测体系,探讨反转录定量PCR(reverse transcription quantitative real-time PCR,RT-qPCR)技术在石蜡包埋组织HER-2检测中的应用可行性。方法 石蜡包埋乳腺癌组织切片经二甲苯溶解去蜡后提取总RNA,反转录后的cDNA由水解探针检测HER-2、ACTB及GAPDH等基因序列,△CT法计算HER-2基因mRNA相对表达量,并与荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测结果一致性进行分析。结果 7例FISH检测阳性标本中有6例经RT-qPCR检测为阳性,16例FISH检测阴性标本经RT-qPCR检测均为阴性。本研究中RT-qPCR与FISH结果符合率为95.7%。结论 石蜡包埋乳腺癌组织是HER-2基因mRNA表达检测的实用材料,完善的RT-qPCR实验设计和质量控制可确保其结果与FISH有较高的一致性。
- 江雨孔令员郑良楷林义斌周裕林
- 关键词：逆转录聚合酶链反应基因信使
