国家重点基础研究发展计划(2000016107)
- 作品数:3 被引量:41H指数:2
- 相关作者:王玉阁杜淼齐冰陈清轩郝茹更多>>
- 相关机构:中国科学院遗传与发育生物学研究所泰山医学院更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 干扰素在哺乳动物早期胚胎发育中的作用被引量:1
- 2006年
- 干扰素是由多种细胞产生的可溶性糖蛋白,具有广泛的抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用。但是越来越多的实验结果表明干扰素在哺乳动物胚胎植入子宫、怀孕的维持以及早期胚胎发育中发挥着重要作用。结合本实验室的研究工作对干扰素的作用机制和近年来这一领域的研究进展做一综述。
- 齐冰何新常正尧陈清轩
- 关键词:干扰素早期胚胎发育哺乳动物
- 兔植入前移核胚中发育相关基因的差异表达分析被引量:12
- 2003年
- 与早期胚胎发育相关的一些重要基因异常表达致使克隆胚细胞核的再程序化过程受阻,是导致动物克隆失败的重要原因.为了分离鉴定再程序化相关基因,我们改进了mRNA差异显示技术,成功地建立了单胚差示技术体系.以不同发育时期的兔克隆胚(MⅡ卵、2细胞、4细胞、8~ 16细胞克隆胚胎)为材料进行单胚差示,分离了 80个差异片段.经反向RNA印迹验证、亚克隆、序列分析及NCBIGenBank数据库检索,结果表明:A0 2 8片段与CstF3基因有 93%的同源性,在早期胚胎发育过程中的表达有阶段特异性,该基因在兔克隆胚的早期发育过程中起重要作用.RNA印迹显示:该基因在所检测的组织中,只在卵巢中有表达.
- 李文雍齐冰王玉阁郁卫东杜淼陈清轩
- 关键词:差异表达分析发育相关基因再程序化
- 转基因克隆奶山羊大量生产重组人的抗凝血酶Ⅲ蛋白质(rhATⅢ)被引量:28
- 2008年
- 利用转基因克隆奶山羊乳腺生物反应器大量生产重组人的抗凝血酶Ⅲ(rhATⅢ)蛋白质。其中包括:筛选出人的抗凝血酶Ⅲ蛋白基因的cDNA序列;利用山羊的β-酪蛋白基因的启动区,终止信号和Enterokinase蛋白酶酶切DNA序列,构建在乳腺中特异表达rhATⅢ的表达载体。同时在转基因载体的末端连接一个新酶素筛选基因(Neomycin)。再以细胞转染、G418筛选和体细胞核移植(动物克隆)等过程,最后获得含有人的抗凝血酶Ⅲ基因的转基因克隆奶山羊。我们共获得了5个原代转基因公羊。第一只克隆羊在出生后78 d死亡,解剖表明:羊的肺部和肾脏等器官有异常。其它克隆公羊经过与崂山种母羊交配,得到转基因后代,其中两个原代转基因羊的后代母羊已成熟、所获得的奶经蛋白质电泳证明:转基因克隆羊后代奶中含有约60 kD大小的rhATⅢ糖蛋白;经Elisa检测表明:在奶中含有大量活性的rhATⅢ,在来源于两个不同克隆公羊的后代母羊奶中的rhATⅢ含量分别为0.4mg/L和3 g/L。此研究证明:转基因奶山羊可以大量地生产具有很高活性的rhATⅢ。用这种方法生产的rhATⅢ通过蛋白质提纯,制成注射针剂,将可用于人的抗凝血酶Ⅲ缺乏症的治疗、预防血栓和重大手术过程中的止血的作用等。
- 邹贤刚袁三平鲜建赵雅琳李狄尔王玉阁郝茹解居伦刘身庆杜淼
- 关键词:山羊转基因