新疆维吾尔自治区自然科学基金(200221103)
- 作品数：6 被引量：44H指数：3
- 相关作者：张富春马正海梅新娣马彩玲刘开江更多>>
- 相关机构：新疆大学新疆医科大学第一附属医院新疆医科大学更多>>
- 发文基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌组织中HPV-16型L2基因多态性分析被引量：10
- 2004年
- 目的探讨新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌组织中人乳头瘤病毒16型(humanpapillomavirus16,HPV16)L2基因的变异,并预测L2蛋白的功能变化。方法从19份中国新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌活检组织标本中提取DNA,以此DNA为模板,PCR扩增HPV16L2全长基因,PCR产物直接测序或克隆后测序,分析新疆维吾尔族妇女宫颈癌组织HPV16L2基因多态性及HPV16L2蛋白功能的变化。结果PCR检测结果显示宫颈癌组织中HPV16L2阳性率为84.21%(1619);测序和序列分析表明L2基因核苷酸多处发生变异,并引起编码氨基酸的变异;L2基因在核苷酸水平上形成7种突变模式(XJL21～XJL27),各模式与HPV16原型比较,同源性在99.37%～99.79%之间;在氨基酸水平上形成5种突变模式,其中XJL1123突变模式占66.67%(812),是突变的主流模式,各模式与HPV16原型比较,同源性在98.31%～99.58%之间;以上突变引起HPV16L2蛋白疏水性和抗原性的改变,继而改变了L1蛋白的结构及功能。结论中国新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌组织中HPV16L2基因发生多位点变异,并形成多种突变模式和突变主流模式;这些突变引起HPV16L2蛋白疏水性和抗原性的改变,提示HPV16L2基因突变可能与HPV16的系统发生以及病毒逃避机体免疫识别有关。
- 马正海梅新娣张富春
- 关键词：宫颈癌组织L1蛋白PCR产物
- 新疆维吾尔族妇女宫颈癌组织中HPV16型E6基因突变分析被引量：21
- 2004年
- 背景与目的:高危型人乳头状瘤病毒16和18(humanpapillomavirustype16and18,HPV16,HPV18)是宫颈癌主要病因之一,尤其以HPV16最为常见,其中HPV16E6是主要癌基因之一。在一些地区,特定的E6基因突变株是宫颈癌发生的危险因素。新疆南部维吾尔族聚居区是宫颈癌高发区,我们已在前期的研究中发现该地区HPV16E6基因发生突变,本研究旨在检测该突变在新疆南部维吾尔族妇女宫颈癌组织中的分布规律,并探讨其与该地区宫颈癌高发的关系。方法:从35例中国新疆南部维吾尔族妇女宫颈癌活检标本中提取组织DNA作为模板,PCR扩增HPV16E6全长基因,PCR产物直接测序或克隆后测序,分析新疆维吾尔族妇女宫颈癌组织中HPV16E6基因的突变。结果:PCR检测结果表明宫颈癌组织中HPV16E6阳性率为82.86%(29/35);26例中E6分离片段的测序和序列分析表明,15例(57.69%)分离株E6基因与原型相同,另有11例(42.31%)E6基因突变,其中9例(34.62%)分离株发生了L83V突变,2例(7.69%)分离株发生了L83V/D63E突变。结论:中国新疆南部地区HPV16E6基因发生变异,其原型和变异型在该地区维吾尔族宫颈癌患者中的分布规律可能与该地区宫颈癌高发存在一定关系。
- 马正海张富春梅新娣马彩玲刘开江
- 关键词：宫颈癌人乳头状瘤病毒E6基因基因突变
- 宫颈癌组织中转录因子Skn-1 a cDNA的克隆及表达
- 2006年
- 目的:从宫颈癌组织中扩增与上皮细胞分化和人乳头瘤病毒(HPV)基因表达相关的转录因子Skn-1acDNA,进而在真核细胞中表达该转录因子以了解其功能。方法:从宫颈癌组织中提取总RNA,以此为模板,RT-PCR扩增Skn-1acDNA片段,将该cDNA片段克隆至pMD18-T载体并进行序列分析,构建Skn-1a真核表达载体,并转染Hela细胞,检测其表达情况。结果:RT-PCR扩增得到约1 300 bp的cDNA片段,将其克隆至pMD18-T载体,DNA测序表明,得到片段长度为1 308 bp,为转录因子Skn-1a基因编码的cDNA,获得的Skn-1acDNA序列与已公布的Skn-1acDNA序列具有99.85%同源性,有1个碱基的差异,但并未导致编码氨基酸的改变,继而构建了Skn-1a真核表达载体pcDNA3/Skn-1a,其转染Hela细胞后可正确表达。结论:转录因子Skn-1a在宫颈癌组织中有一定量的表达,并在体外培养的Hela细胞中获得表达。
- 王艳萍马正海余勐热西旦.尼格买提马彩玲张富春
- 关键词：宫颈癌克隆
- 35例维吾尔族妇女宫颈癌组织中HPV16型E7致癌基因突变分析被引量：3
- 2006年
- 目的本研究旨在检测HPV16E7基因在新疆南部维吾尔妇女宫颈癌组织中的突变。方法从35份新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌活检组织标本中提取组织DNA,作为模板,PCR扩增HPV16 E7全长基因,PCR产物直接测序或克隆后测序,分析新疆维吾尔族妇女宫颈癌组织HPV16E7基因的突变。结果PCR检测结果宫颈癌组织中HPV16E7阳性率为82.86%(29/35);27个E7分离片段的测序和序列分析表明,26个分离株E7基因与原型相同,1个分离株E7基因核苷酸发生2处突变,即647位(在HPV16基因组中的位置)的A→G,氨基酸由Asn变异为Ser;845位的T→C,氨基酸不变。结论新疆南部地区维吾尔妇女宫颈癌患者感染的HPV16中存在E7基因的变异株,该变异株可能是由人口流动传入。
- 余勐马正海热西旦.尼格买提刘开江张富春
- 关键词：人乳头状瘤病毒16型宫颈癌E7
- HPV16 L1基因的原核表达及免疫反应性鉴定被引量：3
- 2005年
- 目的:在大肠杆菌中表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)主要衣壳蛋白L1,并鉴定其免疫反应性。方法:将HPV16L1基因克隆入原核表达载体pThioHisC中,构建重组表达载体。以重组载体分别转化大肠杆菌Top10和DH5α,在IPTG诱导下表达外源基因,用SDSPAGE和Westernblot对表达产物进行鉴定和分析。结果:构建了HPV16L1基因的原核表达质粒pThioHisC/HPV16L1,并在大肠杆菌中表达出相对分子质量(Mr)约为70800的蛋白。表达的蛋白能与抗HPV16L1抗体发生特异性反应。结论:在原核细胞中成功地表达HPV16L1基因,为HPV16L1疫苗的研制提供了必要的基础。
- 郝东风马正海王艳萍热西旦张富春
- 关键词：人乳头状瘤病毒16型原核表达免疫反应性
- 新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌组织中人乳头状瘤病毒16型L1基因突变谱分析被引量：22
- 2004年
- 目的 探讨新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌组织中人乳头状瘤病毒 16型L1基因的变异 ,并预测L1蛋白的功能变化。方法 从 19份中国新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌活检组织标本中提取DNA ,以此DNA为模板 ,PCR扩增HPV16L1全长基因 ,PCR产物直接测序或克隆后测序 ,分析新疆维吾尔族妇女宫颈癌组织HPV16L1基因多态性及HPV16L1蛋白功能的变化。结果PCR检测结果显示宫颈癌组织中HPV16L1阳性率为 84 2 1% (16 / 19) ;测序和序列分析表明L1基因核苷酸多处发生变异 ,并引起编码氨基酸的变异 ,L1基因在核苷酸水平形成上 6种突变模式(XJL1 1～XJL1 6 ) ,各模式与HPV16原型比较 ,同源性在 99 6 9%～ 99 87%之间。XJL1 1发生的 4处变异是所有变异序列所共有的 ,XJL1 2～XJL1 6在XJL1 1变异的基础上增加了不同的变异 ;在氨基酸水平上形成 4种突变模式 ,其中XJL1 1/ 2 / 3突变模式占 76 92 % (8/ 13) ,是突变的主流模式 ;以上突变引起HPV16L1蛋白疏水性和抗原性的改变 ,继而改变了L1蛋白的结构及功能。结论 中国新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌患者组织中HPV16L1基因发生多位点变异 ,并形成多种突变模式和突变的主流模式 ;这些突变引起HPV16L1蛋白疏水性和抗原性的改变 。
- 马正海张富春梅新娣马彩玲刘开江
- 关键词：维吾尔族妇女宫颈癌癌组织人乳头状瘤病毒16型宫颈肿瘤
