目的研究甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-dc)对石英恶性转化人支气管上皮细胞系(M-16HBE)DNA依赖的蛋白激酶复合物催化亚单位(DNA-PKcs)启动子区甲基化状态和mRNA表达的影响。方法应用不同浓度的5-Aza-dc(分别为5、10、20μmol/L)处理M-16HBE细胞后,用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation specific PCR,MSP)方法检测DNA-PKcs基因启动子区甲基化状态,用反转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)检测DNA-PKcs基因mRNA表达情况。结果对照组细胞未发生DNA-PKcs甲基化,而M-16HBE组发生了DNA-PKcs完全甲基化。5-Aza-dc处理M-16HBE细胞后,DNA-PKcs基因甲基化逐渐降低、mRNA表达水平则逐渐增高,并呈剂量依赖趋势。结论启动子区DNA高甲基化是M-16HBE细胞DNA-PKcs基因表达下调的主要原因之一,甲基化抑制剂5-Aza-dc可逆转DNA-PKcs甲基化状态,从而上调DNA-PKcs基因的表达。
