国家教育部博士点基金(08Y10512)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 相关作者：张云龙孟清陈格飞陈国亮李文更多>>
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- 发文基金：上海大学生创新活动计划国家教育部博士点基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 蜘蛛HMW-gDNA的电洗脱纯化提取被引量：3
- 2009年
- 该文研究了蜘蛛大分子量基因组DNA(HMW-gDNA)的提取以及一种高效电洗脱纯化装置的构建。以蜘蛛胸部肌肉组织为原料,通过自改良CTAB法提取蜘蛛HMW-gDNA,利用透析膜和2mL离心管构建一种新的HMW-gDNA快速凝胶回收装置,并对蜘蛛HMW-gDNA进行电洗脱分离回收。结果显示,改良CTAB法可高效提取蜘蛛HMW-gDNA(>48.5kb),且通过透析膜的截留作用,对普通琼脂糖凝胶中目的HMW-gDNA进行快速电洗脱分离,其回收率超过75%,OD260/OD280处于1.8～2.0之间,对HMW-gDNA完整性无影响。综合结果表明,改良CTAB法可用于蜘蛛HMW-gDNA的提取,此电洗脱纯化装置可从普通琼脂糖中高效回收HMW-gDNA,是一种低成本、简捷、高效且实用性强的凝胶回收方法。
- 陈格飞张云龙林森珠李文孟清
- 关键词：蜘蛛电洗脱
- 大腹圆蛛Fosmid文库的构建及MaSp基因筛选方法的探讨被引量：3
- 2010年
- 介绍了构建大腹圆蛛Fosmid基因组文库及牵引丝蛋白(MaSp)基因克隆筛选的全过程.采用改良CTAB法提取大片段基因组DNA,通过自主构建的电洗脱核酸回收装置分离回收30～40kbDNA片段,经补平磷酸化、与pCC2FOS载体连接、体外包装和转染EPI300TM-T1R,首次构建了无偏向性的大腹圆蛛Fosmid文库,其滴度为4.5×105cfu/mL,覆盖基因组倍数为10.以α-32P标记寡核苷酸探针对文库进行初步筛选,获得含MaSp基因的12个阳性克隆.该文库符合Fosmid文库的品质要求,为进一步筛选并研究大腹圆蛛MaSp基因序列奠定了基础.
- 张云龙陈格飞陈国亮林森珠张蒙恩孟清
- 关键词：大腹圆蛛FOSMID文库
