天津市高等学校科技发展基金计划项目(20030110)
- 作品数：3 被引量：17H指数：2
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- 脑缺血及再灌研究中电针应用状况的文献分析和初步研究被引量：2
- 2006年
- [目的]探讨电针在脑缺血及再灌研究中电针参数的选择分析存在的问题。[方法]对采用的35篇文献的电针参数做详细的分析。[结果]35篇文献中无1篇明确标出所选择的全部参数。[结论]目前在针刺治疗缺血性脑卒中的研究中,缺乏统一的参数选择规范影响了实验结果的可比性,故制定一套规范的参数选择标准势在必行。
- 温景荣赵晓峰王舒石学敏
- 关键词：脑缺血及再灌注电针电针参数
- 正常与脑缺血大鼠的脑皮质蛋白质差异分析鉴定被引量：14
- 2005年
- Wistar大鼠随机分为正常组和模型组,采用改进的线栓法制备模型,在规定的时间点快速断头取脑,分离脑皮质组织,提取蛋白质后双向电泳展示,以ImageMaster2DElitev3.01软件对2_DE图谱进行差异表达分析,目标蛋白点用基质辅助激光解析电离质谱测定肽质量指纹图进行鉴定。线粒体应激70蛋白前体、血小板活化因子乙酰基水解酶IBβ亚单位、ADP核糖基化因子蛋白3、电压依赖性阴离子选择通道蛋白1、泛素C末端水解酶同工酶L1、突触结合蛋白等11个蛋白在模型6h组表达上调,谷胱甘肽S_转移酶omega1、谷胱甘肽S_转移酶P、Cu_Zn超氧化物歧化酶、ATP合酶D链、G蛋白β亚单位1、微管蛋白β链15、苹果酸脱氢酶等15个蛋白在模型6h组表达上调。胆绿素还原酶B、细胞因子A4前体为模型组新出现点,腺苷酸激酶同工酶1在模型组消失,Thioredoxinperoxidase1在模型组分为2个点。以双向电泳技术得到分辨率较好的电泳图谱,并初步鉴定脑缺血后差异表达蛋白,为深入研究缺血性脑损伤病理机制奠定了基础。
- 赵晓峰温景荣王舒石学敏
- 关键词：比较蛋白质组学双向电泳脑缺血
- 局灶性脑缺血与正常大鼠海马蛋白质双向电泳比较被引量：2
- 2006年
- 目的:建立高分辨率的大鼠脑海马蛋白质组双向电泳技术,初步分析正常与局灶性脑缺血模型大鼠脑海马蛋白质表达的差异,探讨局灶性脑缺血性损伤的病理机制。方法:实验时间为2003-10/2004-07。模型制备及蛋白质的提取在天津中医学院第一附属医院分子生物学实验室完成,双向电泳部分在国家生物医学分析中心完成。Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、局灶性脑缺血模型组,各组又分为6h、24h两个时间段。局灶性脑缺血动物模型参照Longa线栓法并加以改进。各组大鼠在规定时间快速断头取脑,提取脑海马蛋白质,进行双向电泳。①第一向固相pH等电聚焦电泳:分别取正常组和模型组的蛋白样品1.2mg,选用pH3～10非线性IPG胶条,采用胶内泡胀的方法,样品和再水化液共350μL。设置聚焦参数:30V,12h;200V,1h;500V,1h;1000V,1h;5000V,1h;8000V,10h。固相pH等电聚焦电泳后,IPG胶条分别在十二烷基磺酸钠平衡液a/b中平衡1次,15min/次。②第二向垂直平板SDS-PAGE:将平衡好的胶条转入预先灌制好的130g/LSDS-PAGE胶上,在PROTEIN-Ⅱ(R)XICell上进行第二向电泳,参数设置为:恒流20mA,40min;30mA,4h。考马斯亮篮R-350染色后,扫描至Dell工作站中,Image-Master2DElitev3.01软件对2-DE图谱进行蛋白质点匹配率及差异表达分析。结果:正常组、假手术组6h和24h时间段及局灶性脑缺血性模型组6h和24h时间段分别分离出蛋白质点865个、857个和878个、865个和835个。通过对比发现45个差异表达蛋白质点,其中在局灶性脑缺血性模型组6h新出现2个,表达上调的12个,表达下调的19个;在局灶性脑缺血性模型组24h时间段新出现1个,表达上调的14个,表达下调的25个。结论:以双向电泳技术得到分辨率较好的电泳图谱,并初步找到脑缺血后差异表达的蛋白质点,为深入研究脑缺血性损伤病理机制奠定基础。
- 温景荣赵晓峰王舒石学敏
- 关键词：脑缺血海马蛋白质组学
