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野百合试管鳞茎诱导与增殖的研究被引量：13: 2008年; 以贵州野百合鳞片不同部位为外植体,用3%次氯酸钠进行消毒,以MS为基本培养基,附加不同浓度的激素进行培养。结果表明,用3%次氯酸钠对野百合鳞茎进行外植体进行消毒完全可行,且对操作人员,实验材料和环境都不存在不良影响,价格低廉;最佳的诱导培养基为MS＋6-BA1.5mg/L＋NAA0.3mg/L;最适合的外植体为百合鳞片基部。用相同的培养基进行增殖培养,25d后,可获得繁殖系数高、生长势好、并有新根生成的试管鳞茎;将直径为1～2cm的试管鳞茎移栽培养,成活率高于90%。该研究得出的方法可在短时间内提供大量的贵州野百合种苗。; 刘红美令狐克勇方小波; 关键词：野百合试管鳞茎增殖

热胁迫后家蝇幼虫cDNA文库构建与随机EST测序分析被引量：12: 2010年; 目的构建家蝇幼虫cDNA文库,筛选重要免疫因子。方法采用热激法处理家蝇3日龄幼虫,提取处理后培养24h的家蝇幼虫总RNA,运用SMART技术构建cDNA文库并随机挑选克隆进行EST测序分析。结果 cDNA文库的滴度为1.2×106。PCR扩增鉴定显示所选的30个克隆均含有重组的插入片段,大小均大于1kb。随机挑取192个克隆进行表达序列标签(EST)测序,有效序列为171条,根据EST测序结果计算文库重组率达94%。经序列拼接得到129个Unigenes。通过序列比对发现其中72个Unigenes与GenBank中的已知基因同源,并从中鉴定出热激蛋白、变态原、转铁蛋白、几丁质酶、副肌球蛋白、丝氨酸蛋白酶抑制因子等重要免疫因子。结论高质量的家蝇幼虫cDNA文库构建成功,该文库的构建将有助于家蝇热应激免疫相关功能基因分离和进一步研究。; 刘红美张洁王贇付萍国果张勇吴建伟; 关键词：家蝇热激 CDNA文库 EXPRESSED

家蝇相关序列扩增多态性扩增体系的建立与优化被引量：2: 2008年; 目的:建立和优化家蝇的相关序列扩增多态性(SRAP-PCR)扩增体系。方法:以驯养家蝇为材料,通过单因子实验分别研究了模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物浓度及Taq DNA聚合酶用量对家蝇SRAP分子标记扩增体系的影响,并对扩增体系进行了优化。结果:优化后的反应体系总体积为30μl,含50ng模板DNA、1.5mmol/LMg2+、0.20mmol/L dNTPs、0.15μmol/L引物和0.50U Taq DNA聚合酶。结论:家蝇SRAP-PCR扩增优化系统的建立,为今后利用SRAP技术进行家蝇遗传多样性分析、基因定位奠定了基础。; 刘红美方小波郑勤妮胡仕明吴建伟; 关键词：蝇科随机扩增多态DNA技术

紫花南桔梗工厂化育苗技术研究被引量：2: 2009年; 通过对野生紫花南桔梗进行离体快繁技术的研究,解决生产栽培中优良种源短缺问题。方法:用野生紫花南桔梗幼茎为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的激素进行培养。结果表明:用MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L诱导培养,60 d可获得丛生芽;继代用MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2mg/L培养,增殖率高达20倍以上;用1/2 MS+NAA 0.2 mg/L培养20 d可获得生根植株。本研究得出的方法可为栽培桔梗提供大量优良种苗。; 刘红美方小波李娟郑勤妮; 关键词：丛生芽再生植株

用家蝇取代果蝇制作唾腺多线染色体新技术: 2008年; 组建学生科技兴趣小组,对家蝇唾液腺染色体制片方法进行研究,开发了制片新技术,即加热处理家蝇三龄幼虫,然后用改进的缓冲液进行解离前预处理,再酸性解离、染色、观察、永久制片、显微照相。利用新方法,学生均能一次就获得细胞膜破裂、背景清晰、染色体分散良好、横纹清楚的制片。; 刘红美令狐克勇方小波杨桂华郑晴妮; 关键词：家蝇唾液腺染色体

The Study on Induction and Proliferation of Tube Bulbs in Lilium brownii被引量：21: 2008年; With different parts of bulb scale as explants, the proliferation method of Guizhou Lilium brownii were studied with 3% sodium hypochlorite and MS medium with different concentrations of hormones. The results show that it is feasible to disinfect the bulbs of Lilium brownii with 3% sodium hypoehlorite, moreover, the sodium hypochlorite is very cheap and harmless to researchers, experimental materials and environment. MS ＋ NAA 0.3 mg/L ＋ 6-BA 1.5 mg/L is optimum for the induction of bulbs and, the basal part of Lilium brownie is the optimum explants. After culture for 25 d on the same medium, the tube bulbs could be obtained with the characteristics of high propagation coefficient, strong and new roots. The survival rate is over 90% for transplantation of tube bulbs with diameter between 1-2cm. The method developed in the present study can proliferate abundant Lilium brownii seedling in short time.; 刘红美令狐克勇方小波; 关键词：INDUCTION PROLIFERATION

按蚊防御素基因家族转录模式和启动子的生物信息学分析被引量：1: 2008年; 运用生物信息学方法分析冈比亚按蚊(Anopheles gambiae)中防御素基因家族的表达模式和启动子保守区。在ENSEMBL数据库中搜索防御素基因家族序列,然后将基因编号输入angaGEDUCI数据库中进行分析。结果在冈比亚按蚊中存在有4个防御素基因的异构体分子,其中DEF1基因表达模式与其它3个基因存在明显差异。4个防御素基因启动子序列都存在AP-1、GATA-1、GCN4、GR、HNF-3B、TFIID 6个转录因子的识别结合位点,表明这6个转录因子是冈比亚按蚊防御素基因家族表达调控所必需的。值得注意的是,DEF1基因启动子序列中存在与性别决定有关的SOX proteins转录因子的结合位点,暗示DEF1基因的转录调控可能与性别分化有关;而在DEF2基因启动子序列中存在有热激因子(HSTF)的识别结合位点,表明热刺激会调控DEF2基因的表达。; 刘红美吴建伟; 关键词：防御素冈比亚按蚊转录因子

仙客兰组织培养快繁技术的研究: 2012年; 目的:建立仙客来组织培养快速繁殖体系。方法:以仙客来叶片为外植体,消毒后将其置于富含不同激素配比的培养基中培养,筛选各阶段合适的培养基。结果:在MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L的培养基组合中,诱导愈伤率达到80%,增殖培养以MS+6-BA3.5 mg/L+NAA0.5 mg/L为最好,可达到10倍以上。MS+NAA3.0 mg/L培养基为最佳诱导生根培养基,生根苗移栽成活达到90%。结论:实验初步建立了仙客来的组培快繁体系。; 刘红美陈琴张洁; 关键词：仙客来快繁体系

家蝇幼虫防御素基因的克隆和序列分析被引量：1: 2009年; 目的:克隆家蝇幼虫防御素(defensin)基因并进行序列分析。方法:根据Genbank公布的家蝇成虫defensin基因序列设计一对引物,以家蝇幼虫基因组DNA为模板,进行PCR扩增、测序,并利用软件进行序列分析。结果:克隆得到的defensin基因的长度为330bp,编码92个氨基酸,4个阳性克隆的DNA序列编码的多肽在第27位氨基酸残基不同,为K或N。结论:从家蝇幼虫基因组DNA中克隆得到了defensin基因,发现了两种相差一个氨基酸残基的defensin前体蛋白,并初步预测了两种前体蛋白的化学性质和二级结构,为该基因的重组表达奠定了基础。; 张洁刘红美; 关键词：家蝇幼虫

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贵州省高层次人才科研条件特助经费项目(Q2005-4)