广西壮族自治区科学研究与技术开发计划(1140003A-39)
- 作品数：18 被引量：43H指数：4
- 相关作者：童亚林辛海明朱富军詹球刘亮更多>>
- 相关机构：广西师范大学解放军第一八一医院解放军181医院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同浓度人羊膜匀浆上清液培养大鼠许旺细胞的增殖被引量：4
- 2014年
- 背景:许旺细胞是周围神经修复过程的重要细胞,而研究发现人羊膜细胞分泌的多种细胞因子能够促进许旺细胞增殖。目的:观察不同浓度人羊膜匀浆上清液对鼠许旺细胞(RSC96)生长的影响。方法:使用含体积分数20%胎牛血清的高糖DMEM培养基原代培养RSC96细胞株,传代至第2代用于实验研究。根据人羊膜匀浆上清液在培养基中的不同体积分数(0,10,15,20,25%)分组。结果与结论:人羊膜匀浆上清液的总蛋白浓度为675 mg/L,表皮生长因子、碱性成纤维生长因子和血管内皮生长因子浓度分别为(470.625±2.546),(4.121±0.026)和(0.172±0.002)ng/L。在培养第1-7天,10%和15%人羊膜匀浆上清液组的增殖率大于20%和25%人羊膜匀浆上清液组(P<0.05);10%、15%人羊膜匀浆上清液组显示出促进细胞增殖的作用,而20%、25%人羊膜匀浆上清液组显示出抑制细胞增殖的作用;各实验组的细胞活力与对照组接近(P>0.05)。提示人羊膜匀浆上清液低浓度时(10%和15%)具有促进RSC96增殖作用,高浓度时(20%和25%)抑制RSC96增殖。
- 刘亮王磊童亚林莫永亮吕璐陈云鹏杨文贤吕礼芳詹球朱富军辛海明龚震宇
- 关键词：许旺细胞细胞生长曲线MTT法
- 救治成批严重烧伤合并吸入性损伤留守儿童八例被引量：2
- 2013年
- 留守儿童作为一类特殊群体出现成批严重烧伤伴吸入性损伤时,其治疗牵涉到烧伤与吸入性损伤救治以及疼痛关爱、心理疏导、康复治疗等诸多方面[1].笔者单位于2009年11月救治了8例严重烧伤伴中（重）度吸入性损伤留守儿童[2],效果较佳,现介绍如下.
1 临床资料
本组患儿中男1例、女7例,年龄9～14岁.因室内鞭炮爆炸致所有患儿颜面、四肢、躯干均有烧伤,其中面颈部深度为Ⅱ～Ⅲ度.烧伤总面积为16％ ～ 98％,其中深Ⅱ度16％ ～ 54％ TBSA,Ⅲ度12％～98％ TBSA,且均伴有吸入性损伤.
- 童亚林蒋晓臣杨福旺朱金红冯小艳缪洪城邓建军辛海明朱富军
- 关键词：伴吸入性损伤严重烧伤留守儿童救治TBSA
- 高迁移率蛋白族B1通过调控p53表达抑制T细胞增殖被引量：2
- 2016年
- 目的:探讨高迁移率蛋白族B1(HMGB1)对T细胞的增殖抑制作用及其分子机制。方法:将培养的Jurkat细胞分为对照组、HMGB1(100 ng/ml)12、24、48 h组,HMGB1组加入HMGB1培养相应时间;将细胞分为对照组、HMGB1 10、100、1 000 ng/ml组,予不同浓度HMGB1培养24 h;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞增殖率,采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测各组细胞中p53m RNA、磷酸化p53及p53总蛋白的表达水平。将载有p53 sh RNA、p53 m RNA表达序列及空白质料的病毒转染入Jurkat细胞中,并选择100 ng/ml HMGB1刺激24 h,采用同样方法检测细胞增殖率。最后,将细胞分为正常组、HMGB1组、SB203580[p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂]+HMGB1组进行相应处理。收集各组细胞,RT-PCR和Western blot法检测p53 m RNA、磷酸化p53及p53总蛋白的表达水平。结果:HMGB1(100ng/ml)刺激细胞24、48 h后细胞增殖率降低,较正常组差异有显著性(P<0.05);100、1 000 ng/ml HMGB1刺激细胞24 h后,增殖率明显下降,与正常组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。HMGB1(100 ng/ml)刺激细胞后,p53 m RNA、磷酸化及总蛋白表达水平在24、48 h逐步上升,且有明显统计学意义(P<0.05);HMGB1刺激24 h,10、100 ng/ml HMGB1刺激组细胞p53 m RNA、p53磷酸化及总蛋白表达水平较正常组显著上升,但1 000 ng/ml HMGB1没有明显变化;在不同转染组中,予HMGB1刺激细胞,空载组增殖率降低,而p53 sh RNA表达组细胞增殖趋于正常,p53 m RNA过表达组增殖率较空载组下降更为明显。Jurkat细胞在p38 MAPK阻断剂和HMGB1共同作用后,p53 m RNA、磷酸化及总蛋白表达水平比HMGB1刺激组明显下降(P<0.05)。结论:胞外HMGB1可通过诱导p38 MAPK信号通路激活p53蛋白,抑制T细胞增殖。
- 贾敏张卉童亚林姚咏明
- 关键词：高迁移率族蛋白B1P53P38丝裂原活化蛋白激酶T细胞增殖
- 不同层级重度蒸汽吸入性损伤动物模型的建立被引量：4
- 2015年
- 目的建立严重、危重与极危重3个层级重度蒸汽吸入性损伤兔模型。方法随机将136只新西兰大白兔分为假伤组(n=34)与致伤组(n=102)。致伤组按蒸汽吸入致伤时间分为0.25、0.50、1.00 s组(均n=34),0.25、0.50、1.00 s组兔用自动控时调压烫伤仪[11-12]控制蒸汽压力0.02 MPa/cm2、温度105℃条件下通过气管切开处分别致伤,假伤组兔除不予吸入蒸汽致伤外其它处理同致伤组。0.25、0.50、1.00 s组与假伤组于伤后1、4、12、24 h各取兔6只检测或观察动脉血氧分压(Pa O2)与二氧化碳分压(Pa CO2)、肺组织病理、肺组织含水率变化,各组另取10只兔观察伤后6、12、24 h死亡率。结果 1.00 s组伤后1 h即出现明显的肺充血水肿和出血、缺氧以及炎症细胞浸润状况并逐渐加重,伤后6 h兔死亡率达100%。0.50 s组伤后1 h也出现肺充血水肿和出血、缺氧,至伤后4 h加重并出现炎症细胞浸润,伤后1、4 h的Pa O2较1.00 s组高,差异有统计学意义(P<0.05),0.50 s组兔伤后12、24 h死亡率分别为25%、75%。0.25 s组在伤后4 h出现肺充血水肿、缺氧,伤后12 h肺充血水肿加重并出现出血、炎症细胞浸润,伤后4、12、24 h Pa O2均小于60 mm Hg(1 mm Hg=0.133 k Pa),较0.50 s组同时相点高,差异有统计学意义(P<0.05),较假伤组同时相点低,差异均有显著性统计学意义(P<0.01),0.25 s组伤后24 h兔死亡率为25%。结论在蒸汽压力为0.02 MPa/cm2,温度105℃条件下,致伤时间1.00、0.50、0.25 s可分别造成兔极危重、危重和严重吸入性损伤。
- 朱富军詹球童亚林梁静阳齐琼刘亮李泳夏樱花吕璐莫永亮陈云鹏朱金红冯小艳龚震宇辛海明邹篪
- 关键词：蒸汽
- 人羊膜匀浆上清液对脂多糖致伤条件下肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖及炎症因子分泌的影响被引量：1
- 2016年
- 目的观察人羊膜匀浆上清液（human amniotic homogenate supernatant,hAHS）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）致伤条件下大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（alveolar typeⅡepithelial cell,AT-Ⅱ）增殖及肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）和白细胞介素1β（interleukin1 beta,IL-1β）分泌的影响。方法 1取健康胎盘来源的新鲜人羊膜制备hAHS,配制含hAHS体积分数不同的5组培养基（对照组、10%hAHS组、20%hAHS组、40%hAHS组、80%hAHS组）对大鼠AT-Ⅱ行分组培养,四甲基偶氮唑盐（microculture tetrazolium,MTT）法测不同时间点OD630值。2对对照组、LPS致伤组、40%hAHS干预组大鼠AT-Ⅱ行分组培养,MTT法和酶联免疫吸附剂测定（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法测不同时间点OD630值和培养液中大鼠TNF-α和IL-1β含量。结果 1对数期内前4组间各时间点比较,hAHS体积分数相对较高组别的OD630值也相对较高（即40%hAHS组〉20%hAHS组〉10%hAHS组〉对照组）,且第3-5天均有统计学差异（P〈0.05）,而hAHS含量更高的80%hAHS组,各时间点均低于40%hAHS组,且第3-5天有统计学差异（P〈0.05）。2 hAHS干预组在24 h后各时间点的OD630值不仅均高于LPS致伤组,也均高于对照组,且均有统计学差异（P〈0.05）。与此同时,hAHS干预组各时间点大鼠TNF-α和IL-1β含量均低于LPS致伤组,且二者均分别于前6 h各时间点组间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 hAHS可显著促进体外正常培养条件下AT-Ⅱ的增殖,且对LPS致伤条件下AT-Ⅱ的增殖和TNF-α、IL-1β等促炎因子分泌具有保护和抑制作用。
- 莫永亮刘亮童亚林王磊吕璐陈云鹏阳齐琼詹球梁静朱富军辛海明
- 关键词：脂多糖细胞增殖炎症因子
- 白烟吸入致不同程度急性呼吸窘迫综合征患者的救治被引量：7
- 2017年
- 目的总结因吸入烟雾弹燃烧产生白烟致不同程度ARDS患者的救治经验。方法2016年2月，笔者单位收治一批共13例因吸入烟雾弹燃烧产生的白烟引起不同程度ARDS患者，其中2例后期并发肺纤维化。参照ARDS柏林诊断标准，将患者分为轻度9例、中度2例、重度2例。轻、中度ARDS患者应用糖皮质激素常规治疗。重度ARDS患者序贯应用糖皮质激素、吡非尼酮治疗，行呼吸机辅助呼吸等。所有患者根据病情及时监测生命体征、动脉血氧合指数、肺部影像学变化、肺通气功能、一般情况及其他重要器官/系统功能等。伤后10～15个月随访，对上述指标进行监测。采用SPSS 18.0统计软件对数据进行统计。结果（1）轻、中度ARDS患者治疗3 d后呼吸系统症状基本消失；动脉血氧合指数伤后1～4 d降低，伤后7 d基本恢复正常，伤后1个月完全正常。重度ARDS患者伤后1～3个月呼吸系统症状静息情况下基本消失；动脉血氧合指数伤后3～21 d降低，伤后1～3个月逐渐恢复正常，伤后15个月复查正常。（2）轻、中度ARDS患者胸部CT或X线检查显示其伤后24 h内无明显异常或仅有肺纹理增粗。1例中度ARDS患者伤后96 h出现弥漫斑片状、磨玻璃样密度增高影（简称肺渗出影）。所有轻、中度ARDS患者伤后10个月复行胸部影像学检查，结果无异常。2例重度ARDS患者伤后45、75 h双肺出现明显肺渗出影，其中1例患者伤后10个月复行胸部影像学检查，结果无异常；1例患者伤后15个月复行胸部影像学检查，结果显示双肺叶内存留小范围网格样密度增高影，胸膜轻微粘连。（3）所有患者入院时肺功能检查提示重度限制性肺通气功能障碍。轻、中度ARDS患者肺通气功能于伤后1个月均恢复正常，能进行跑步等运动。1例重度ARDS患者肺通气功能于伤后6个月恢复正常，能进行跑步等运动；1例重度ARDS患者伤后15�
- 杨福旺辛海明朱金红冯小艳蒋晓臣龚震宇童亚林
- 关键词：呼吸窘迫综合征肺纤维化糖皮质激素类白烟吡非尼酮
- 不同年龄段成批烧创伤患者的临床救治与监护被引量：1
- 2014年
- 目的总结分析三批不同年龄段成批烧创伤患者的临床特点,为成批烧创伤的临床救治、监护及康复治疗提供经验。方法对解放军第一八一医院2009年至2013年救治的三批26例不同年龄段成批烧创伤临床资料进行回顾性分析。结果 26例患者中学龄期儿童组2例患者和老年组1例特重度烧伤合并吸入性损伤患者均死于多脏器功能衰竭,其余23例患者治愈出院。结论区域烧创伤救治网的建立、政府层面的行政协调、早期综合救治及监护方案的实施与系统康复训练的有效结合是成批烧创伤救治的关键,能提高救治成功率。
- 辛海明童亚林朱金红冯小艳朱富军缪洪城杨福旺龚震宇蒋晓臣
- 关键词：临床救治监护康复
- 不同抗冻剂预处理对直接快速液氮冻存人羊膜活性的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:筛选一种抗冻剂配方,为建立深低温高活性保存的羊膜库提供依据。方法:选取12只健康剖宫产产妇羊膜,根据预处理抗冻剂的不同随机分为4组:A组(空白对照组),B组(DMEM/甘油组),C组(DMEM/甘油/DMSO组),D组(DMEM/甘油/DMSO/海藻糖组)。冷冻保存后第1,3个月取羊膜行HE与台盼蓝染色,分别观察羊膜结构,计算羊膜上皮细胞死亡率,并与新鲜羊膜(E组)比较。结果:E组:上皮细胞呈柱状、排列整齐紧密,细胞膜清晰,细胞核圆润蓝染,基底膜连续,细胞死亡率为(6.95±1.95)%。A组:保存1,3个月羊膜上皮层结构完整性均破坏、核固缩呈深蓝染,基底膜渐变为模糊不清。细胞死亡率分别为(39.96±5.84)%,(81.50±4.50)%,两组比较差异有统计学意义(t=13.796,P<0.05)。B组:保存1,3个月细胞变形,核固缩加剧,基底膜渐变为不连续。细胞死亡率分别为(21.61±6.65)%,(36.76±10.72)%,两组比较差异有统计学意义(t=2.940,P<0.05)。C组:保存1个月后类似新鲜羊膜,保存3个月后羊膜上皮细胞扁平,细胞核深染固缩,基底膜较完整。细胞死亡率分别为(14.08±3.21)%,(29.68±8.19)%,两组比较差异无统计学意义(t=4.344,P>0.05)。D组保存1,3个月形态结构接近新鲜羊膜,死亡率分别为(8.51±1.75)%,(12.70±5.70)%,两组比较差异无统计学意义(t=1.722,P>0.05)。保存1个月的A、B、C组死亡率与D、E组比较均有统计学差异(P<0.05),D、E组间比较差异无统计学意义(P>0.05);保存3个月的A、B、C、D、E各组间比较均有统计学差异(P<0.05),但D组存活率仍然达到87.3%。结论:DMEM/甘油/DMSO/海藻糖可作为新型抗冻剂用于深低温高活性保存羊膜。
- 齐映亮朱富军杨文贤詹球吕礼芳王磊刘亮辛海明林源童亚林
- 关键词：抗冻剂液氮
- 成批烧冲复合伤的监护与救治被引量：7
- 2014年
- 近距离大当量炸药爆炸导致严重烧冲复合伤[1与多发伤,临床救治难度大,病死率与致残率高.笔者单位成功救治了一批11例大当量炸药爆炸造成的烧冲复合伤病例,现总结如下.
- 杨福旺朱富军缪洪城辛海明冯小艳朱金红童亚林周亚辉汤桂花龚震宇邓建军刘顺财石立文邹篪陆德斌
- 关键词：烧冲复合伤临床救治监护多发伤致残率
- 人羊膜匀浆上清液对脂多糖致伤的大鼠肺微血管内皮细胞增殖及分泌炎症因子的影响被引量：2
- 2015年
- 目的：探讨人羊膜匀浆上清液（hAHS）对脂多糖（LPS）致伤的大鼠肺微血管内皮细胞（RPMVECs）增殖及其分泌促炎因子的影响。方法：用新鲜人羊膜制备hAHS,用考马斯亮蓝法和ELISA法分别测定hAHS中总蛋白和表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、血管内皮生长因子（VEGF）、白介素-4（IL-4）、IL-10、血管生成素-1（Ang-1）、人β-防御素2（HBD2）的含量。MTT法检测不同体积分数hAHS（0、10%、15%、20%、25%）作用于RPMVECs后细胞增殖活性的变化,确定hAHS促进RPMVECs增殖的最佳浓度。根据共培养条件不同,将RPMVECs随机分为4组：N组（10%FBS＋DMEM/F12）,A组（10%FBS＋DMEM/F12＋15%hAHS）,B组（10%FBS＋DMEM/F12＋LPS）和C组（10%FBS＋DMEM/F12＋15%hAHS＋LPS）。各组细胞在干预后0、12、24、48、72h用MTT法测定吸光度值（A值）,并分别于培养6、8、10、12、24h时用ELISA法测定RPMVECs培养上清液中TNF-α、IL-6、IL-8的含量。结果：hAHS中总蛋白浓度为（725.125±12.625）mg/L,其中EGF、bFGF、VEGF、IL-4、IL-10、Ang-1、HBD2的浓度分别为（504.785±4.665）、（4.426±0.138）、（0.185±0.006）、（25.650±4.104）、（13.733±2.197）、（15.561±0.496）和（4.763±0.714）ng/L。hAHS的体积分数在10%~20%时均具有促进RPMVECs增殖的作用且以15%hAHS培养后第7、9天的增殖率最佳,而25%hAHS在第7、9、11天使RPMVECs增殖率小于0%hAHS组（P〈0.05）。A组48和72h细胞增殖活性较N组显著增加,B组24、48和72h的增殖活性较N组显著降低;C组24、48和72h的增殖活性较B组显著升高（P〈0.05）。ELISA结果显示,B组各时间点的IL-6和TNF-α的含量以及8、10、12和24h的IL-8含量均显著高于N组（P〈0.05）;C组10和12h的IL-6含量,8、10、12和24h的IL-8含量及各时间点的TNF-α含量均显著低于B组（P〈0.05）。结论：hAHS含有促进组织修复、调节免疫反应、降低血管通透性及杀伤致�
- 陈云鹏王磊童亚林刘亮吕璐莫永亮詹球阳齐琼梁静朱富军龚震宇辛海明
