国家自然科学基金(30370891)
- 作品数：4 被引量：51H指数：4
- 相关作者：肖玲卢长明吴刚武玉花更多>>
- 相关机构：中国农业科学院油料作物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国农业科学院杰出人才科研启动经费资助国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 以油菜脂肪酸延长酶基因fae1为靶标RNAi载体的构建被引量：13
- 2004年
- 通过基因工程手段抑制脂肪酸延长酶基因fae1的表达,以阻止芥酸合成,培育不受高芥酸窜粉影响的低芥酸品种。利用GenBank中的fae1基因序列AF490462为模板设计引物和多聚酶链式反应(PCR)从白菜、甘蓝和甘蓝型油菜的12个不同品种中扩增出长1007bp的fae1基因片段,通过对fae1基因片段DNA序列的测定和序列比较,找到长度为428bp高度保守区作为RNA干涉(RNAi)的靶标区。根据RNA干涉(RNAi)双向表达载体设计原则,将428bpfae1基因片段以正反两个方向插入双向表达载体pMCG161中,两个片段用一个wax基因的内含子连接,植物筛选标记基因采用bar基因,从而构建以油菜fae1基因为靶标的RNAi载体。
- 肖玲卢长明
- 关键词：油菜酶基因BAR基因低芥酸白菜RNA干涉
- 油菜脂肪酸延长酶基因fae1片段的克隆与SNP分析被引量：15
- 2005年
- 脂肪酸延长酶基因fae1是调控油菜芥酸合成的关键基因。本研究利用GenBank中的fae1基因序列AF490462为模板设计引物,通过多聚酶链式反应(PCR)从白菜、甘蓝和甘蓝型油菜(包括2个人工合成种)的12个不同品种中扩增出长1007bp的fae1基因片段。PCR产物经与克隆载体pGEM-Tvector连接和序列测定,获得12个品种的fae1基因片段的DNA序列。对来自12个不同品种的fae1基因序列进行比较分析表明:fae1基因具有高度序列保守性,扩增长度均为1007bp,核苷酸序列相似度达98%以上,氨基酸序列的保守性更高。在1007bp的区间内共发现23个SNP(singlenucleotidepolymorphism)位点,其中有11个单核苷酸变异导致了编码氨基酸的改变。人工甘蓝型油菜和天然甘蓝型油菜的fae1基因片段未发现明显差异。发现了高芥酸品种与低芥酸品种的fae1基因、以及A基因组与C基因组的fae1基因特有SNP位点。
- 肖玲卢长明
- 关键词：油菜基因克隆SNP芥酸
- 芸薹属植物脂肪酸延长酶基因FAE1的克隆与A/C基因组的分子鉴别被引量：4
- 2007年
- 通过同源序列法,从我国大面积栽培的高芥酸甘蓝型油菜品种“中油821”和低芥酸品种“中双9号”的基因组中克隆得到脂肪酸延长酶基因,并对它们进行了测序分析.发现中油821FAE1基因全长1521bp,没有内含子;中双9号FAE1基因全长1517bp.分析白菜、甘蓝和甘蓝型油菜的FAE1基因,在DNA水平上共发现31个核苷酸变异位点(占2.03%),在蛋白质水平上有7个氨基酸位点出现变异.进一步分析表明,有18个核苷酸变异是A/C基因组特异性变异,而且95%(17/18)A/C基因组特异性核苷酸变异都是同义突变.第1217位的核苷酸变异导致A基因组的FAE1基因不能被AvrII识别,而C基因组的FAE1基因可以被AvrII识别.用核酸内切酶AvrII酶切供试材料白菜、甘蓝和甘蓝型油菜的FAE1基因序列,证实甘蓝来源的FAE1基因序列可以被AvrII识别并酶切,白菜来源的不能被AvrII酶切.实验结果表明,采用AvrII酶切FAE1基因序列的方法,不仅可以识别白菜和甘蓝,而且可鉴别甘蓝型油菜的A/C基因组.此外,FAE1基因还可用作转基因油菜花粉漂移检测时的标记基因,为基因漂移风险分析提供了新方法.
- 武玉花肖玲吴刚卢长明
- 关键词：芸薹属
- 植物芥酸合成代谢与遗传调控研究进展被引量：27
- 2005年
- 芥酸是十字花科植物种子中特异积累的长链脂肪酸,是目前油菜品质育种的重要对象之一。FAE1基因是控制芥酸合成的关键基因。由FAE1基因编码的β-酮酯酰-CoA合酶(KCS)是芥酸合成的限速酶。目前发现的FAE1基因在植物中高度同源,只含一个开放阅读框,长度为1521bp左右,不含有内含子。目前的低芥酸油菜品种主要来自ORO低芥酸血缘,其低芥酸特性是由于高芥酸品种FAE1基因的点突变造成的,导致编码的蛋白质在282位上的氨基酸产生差异,高芥酸品种中是丝氨酸,低芥酸品种中是苯丙氨酸。卢长明等在我国双低油菜品种中发现并克隆获得一种新型FAE1基因,标志着在国际上找到第二个低芥酸基因源。对FAE1基因的深入了解使得从分子水平培育高芥酸和低芥酸品种成为可能。
- 武玉花卢长明吴刚肖玲
- 关键词：芥酸
