河北省自然科学基金(C2012204032) 作品数:6 被引量:39 H指数:3 相关作者: 邢继红 董金皋 张靖 赵斌 陈展 更多>> 相关机构: 河北农业大学 河北省农林科学院 更多>> 发文基金: 河北省自然科学基金 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
拟南芥AtBT4基因在抗灰霉病过程中的功能 本研究将拟南芥抗灰霉病生态型Col-0接种灰葡萄孢后,利用DDRT-PCR等技术获得了拟南芥抗灰霉病相关基因AtBT4;从拟南芥SALK库中获得了AtBT4基因的T-DNA插入突变体SALK_ 015577(bt4)和S... 樊锦涛 蒋琛茜 郝丛丛 赵福鑫 李培芬 邢继红 董金皋关键词:拟南芥 灰葡萄孢 拟南芥AtBT4对灰葡萄孢的抗性机制分析 被引量:4 2013年 【目的】揭示AtBT4在拟南芥抗灰葡萄孢中与SA、JA信号途经的相互关系。【方法】利用RT-PCR技术,检测用SA、SA类似物BTH、JA、ACC及灰葡萄孢处理拟南芥野生型Col-0后其AtBT4的表达情况;检测经SA和JA处理后拟南芥SA、JA途径相关突变体AtBT4的表达情况;并检测接种灰葡萄孢后拟南芥野生型Col-0、bt4突变体和回复突变体抗病相关基因的表达情况。【结果】JA处理和接种灰葡萄孢后,拟南芥野生型Col-0中AtBT4的表达明显增强。但经JA处理后,JA不敏感突变体jar1的AtBT4表达变化趋势与野生型明显不同,AtBT4的表达水平不受JA诱导。SA信号途径相关突变体eds5、sid2和npr1中AtBT4的表达明显低于野生型,但变化趋势与野生型基本一致。bt4突变体中抗病相关基因PR1、PR4、PDF1.2和BIK1的表达明显低于野生型和回复突变体。【结论】AtBT4的表达受JA和灰葡萄孢的诱导,AtBT4突变影响抗病相关基因PR1、PR4、PDF1.2和BIK1的表达,AtBT4可能通过SA、JA信号途径影响拟南芥对灰葡萄孢的抗性。 郝丛丛 杨萍 陈展 贾娇 赵斌 司贺龙 韩建民 邢继红 董金皋关键词:拟南芥 灰葡萄孢 BPR1 Gene Is Required for Pathogenicity in Botrytis cinerea <正>Botrytis cinerea,a typical necrotrophic pathogenic fungi,causes severe diseases in a wide range of plant sp... ZHENG Hui-Xing ZHAO Fu-Xin ZHAO Bin XING Ji-Hong~(**) DONG Jin-Gao~(**) (Mycotoxin and Molecular Plant Pathology Lab,College of Life Science,Agricultural University of Hebei,Baoding 071001,China)文献传递 拟南芥转录因子AtMYB73转录活性区域分析及互作蛋白的筛选 被引量:7 2014年 【目的】确定拟南芥抗逆转录因子At MYB73的转录活性区域并筛选获得与其互作的蛋白,为进一步阐明At MYB73调控拟南芥抗逆的分子机制奠定基础。【方法】构建转录因子At MYB73的酵母诱饵表达载体p AS1-At MYB73,检测p AS1-At MYB73的自激活性及其对酵母Y190的细胞毒性。克隆At MYB73的N端区域(含有R2R3结构域)和C端区域(不含R2R3结构域),检测At MYB73的N端和C端的转录激活活性,分析At MYB73自激活结构域的位置。利用酵母双杂交技术,以At MYB73为诱饵筛选拟南芥的c DNA文库,将阳性克隆进行鉴定、测序;利用TAIR数据库对筛选获得的At MYB73的候选互作蛋白进行分析。构建At MYB73和F12F1.4的酵母双杂交载体p GBDT7-At MYB73和p GADT7-F12F1.4,通过酵母双杂交技术,对其互作关系进行分析。【结果】含p AS1-MYB73的酵母菌在不同浓度的3-AT的SD/-His/-Trp/、SD/-Ade/-Trp培养基上均能生长,表明At MYB73具有较高的自激活活性。含p AS1-At MYB73的酵母菌在SD/-Trp/Amp液体培养基中培养24 h的OD600值大于0.8,表明诱饵载体对酵母Y190没有细胞毒性。成功构建了p AS1-At MYB73-N和p AS1-At MYB73-C载体,获得了含有p AS1-At MYB73-N和p AS1-At MYB73-C的酵母;含p AS1-At MYB73-N的酵母在含X-a-gal的YPAD培养基上呈现无色,而含p AS1-At MYB73-C的酵母则呈现蓝色,表明At MYB73的C端有明显的自激活性,而N端没有自激活性。以At MYB73为诱饵,筛选拟南芥的c DNA文库,获得了与光合作用、防御反应途径、抗逆等相关的8个蛋白。利用酵母双杂交技术,确定了MYB73与F12F1.4之间存在一定的互作。【结论】拟南芥抗逆转录因子At MYB73具有较高的转录激活活性,其活性区域位于C端;以At MYB73为诱饵,筛选获得了与光合作用、防御反应途径、抗逆等相关的8个At MYB73的候选互作蛋白;利用酵母双杂交技术,确定了At MYB73与F12F1.4之间的互作关系。 樊锦涛 贾娇 蒋琛茜 王冠宇 张靖 邢继红 董金皋关键词:拟南芥 转录活性 酵母双杂交 AP22.65基因调控拟南芥开花的机制分析 2014年 为揭示AP22.65基因在拟南芥开花过程中的调控机制,对AP22.65基因与拟南芥开花调控途径的关系进行了分析,发现拟南芥ap22.65突变体中赤霉素途径基因SPY,光周期途径基因GI、CO和FT,春化途径基因VNR2、VIN4和FLC,整合途径基因LFY、TFL1和EMF1的表达水平均明显下调,FVE、CCA1、VNR1和SOC1表达变化不明显。CO超表达突变体WT/CO和spy、gi、lhy突变体中AP22.65基因的表达水平均不同程度上调,而FLC超表达突变体WT/FLC中AP22.65基因的表达水平明显下调。春化处理后,ap22.65、回复及超表达突变体的花期和AP22.65基因的表达变化不明显;赤霉素处理后,ap22.65突变体的花期明显延迟,且AP22.65基因的表达明显增强,明确AP22.65基因主要参与光周期途径和赤霉素途径调控拟南芥开花。 张靖 樊锦涛 蒋琛茜 王冠宇 董丽萍 邢继红关键词:拟南芥 开花 拟南芥T1N622基因的亚细胞定位分析 拟南芥T1N62基因编码的蛋白为NAD(P)结合Rossmann-折叠蛋白家族的成员,具有葡萄糖脱氢酶活性,短链氧化还原酶活性,参与植物体内各种催化反应和新陈代谢过程。实验室前期获得了拟南芥抗病相关基因T1N62,明确了... 蒋琛茜 樊锦涛 王冠宇 董丽萍 邢继红 董金皋关键词:拟南芥 GFP 亚细胞定位 文献传递 拟南芥T1N6_22在抵抗Pst DC3000侵染过程中的功能分析 被引量:3 2013年 【目的】明确拟南芥抗灰霉病基因T1N6_22在抗Pst DC3000过程中的功能,分析T1N6_22影响拟南芥对Pst DC3000的抗性原因。【方法】对t1n6_22突变体和转基因回复突变体(t1n6_22/T1N6_22)接种Pst DC3000,检测其症状;采用间苯胺蓝染色法检测接种突变体中胼胝质的积累情况;测定接种叶片中Pst DC3000的生长量,明确T1N6_22在拟南芥抗Pst DC3000过程中的功能。利用RT-PCR技术,检测SA、JA和ET对T1N6_22表达的影响及T1N6_22对抗病防御相关基因表达的影响;利用quantitative real-time PCR技术,检测Pst DC3000对T1N6_22及抗病相关基因表达的影响,分析T1N6_22影响拟南芥对Pst DC3000的抗性原因。【结果】t1n6_22突变体接种Pst DC3000后表现明显的抗病症状,而回复突变体t1n6_22/T1N6_22和拟南芥野生型表现明显的感病症状。SA处理拟南芥野生型,T1N6_22的表达量明显增强,经JA和ACC处理,该基因的表达量无显著变化。t1n6_22突变体中,PAL、PR4、PPO、SOD和CAT的表达水平均明显高于野生型Col-0和转基因回复植株。接种Pst DC3000后,拟南芥野生型中T1N6_22及抗病相关基因PR1、PR3、PR5和PDF1.2的表达量明显增强。【结论】T1N6_22在拟南芥抗Pst DC3000过程中起负调控作用,T1N6_22的表达受SA诱导,可能主要通过调节植物的次生代谢产物的分泌影响拟南芥对Pst DC3000的抗性。 郝丛丛 郑会欣 贾娇 司贺龙 陈展 赵斌 张靖 邢继红 董金皋关键词:拟南芥 PST 拟南芥AtBT4在抵抗Pst DC3000侵染过程中的功能 被引量:1 2018年 为明确拟南芥AtBT4基因在抵抗Pst DC3000侵染过程中的功能,本研究检测AtBT4基因的T-DNA插入突变体bt4和bt4-1、回复突变体CE和超表达突变体OE对Pst DC3000的敏感性,结果发现,bt4、bt4-1突变体感病症状较为严重、病菌cfu值明显增强、胼胝质含量明显降低,表明AtBT4基因在拟南芥抵抗Pst DC3000侵染过程中发挥正调控的作用。利用Real-time PCR技术,检测野生型和突变体bt4、bt4-1、CE、OE接种Pst DC3000后SA、JA/ET信号途径关键基因ICS1、NPR1、JAR1、PDF1.2的表达情况,发现bt4和bt4-1突变体中各基因的表达水平显著低于野生型、回复突变体和超表达突变体,表明AtBT4基因正调控ICS1、NPR1、JAR1、PDF1.2的表达。由此推测,AtBT4基因通过调控SA、JA/ET信号途径影响拟南芥对Pst DC3000的抗性。研究结果为进一步阐明AtBT4基因调控拟南芥抵抗Pst DC3000侵染的分子机制奠定了良好基础。 郑旭 黄聪聪 庞茜 藏金萍 曹宏哲 张康 董金皋 邢继红关键词:拟南芥 PST Functional Analysis of T1N622 from Arabidopsis thaliana against Botrytis cinerea Gray mould caused by Botrytis cinerea is one of the important world diseases,and always results in significant... HAO Cong-Cong JIA Jiao CHEN Zhan XING Ji-Hong" DONG Jin-Gao~(**) (Mycotoxin and Molecular Plant Pathology Lab,College of Life Science,Agricultural University ofHebei,Baoding 071001,China)文献传递 拟南芥R2R3-MYB家族第22亚族的结构与功能 被引量:25 2014年 拟南芥R2R3-MYB转录因子在拟南芥生长发育、代谢及响应生物和非生物胁迫的调控网络中具有重要作用。根据保守的氨基酸序列,R2R3-MYB转录因子被分为25个亚族,其中第22亚族包含AtMYB44、AtMYB77、AtMYB73和AtMYB70 4个基因,主要响应生物和非生物胁迫。文章从基因功能的相似性、基因表达的一致性和基因结构的保守性3方面综述了第22亚族的4个基因,并综合讨论了其在结构与功能上的冗余性和多样性。 樊锦涛 蒋琛茜 邢继红 董金皋关键词:拟南芥