辽宁省自然科学基金(20102140)
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
- 相关作者：刘学政左中夫张强刘万鹏更多>>
- 相关机构：辽宁医学院锦州医科大学更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金国家自然科学基金辽宁省科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 糜蛋白酶抑制剂保护糖尿病仓鼠肾功能的机制研究
- 2016年
- 目的观察糜蛋白酶抑制剂对糖尿病仓鼠肾脏的保护作用,进而探讨其保护肾脏损伤的机理。方法链脲佐菌素腹腔注射法制备仓鼠糖尿病模型。通过分子生物学技术、免疫组织化学技术、免疫印记技术检测各组动物糜蛋白酶,RAS成分:ACE、肾素、ANG-I、ANG-II;氧化应激水平:8-Ohd G,NOX-4,p22phox,以及TGF-β1的表达情况。结果糜蛋白酶抑制剂抑制了糖尿病仓鼠肾内ANG-II升高,同时明显降低了8-OHd G分泌水平。NOX-4和p22phox染色表明糖尿病组血管球和肾小管区域氧化产物显著增高,而糜蛋白酶抑制剂抑制氧化产物的升高(P<0.01)。Western blot证实了糖尿病组血管球NOX-4和p22phox蛋白的水平较对照组高,糜蛋白酶抑制剂显著降低了其表达。血管球TGF-β1表达糖尿病组高于对照组,同样糜蛋白酶抑制剂治疗后大大降低了TGF-β1水平。结论糜蛋白酶抑制剂能保护糖尿病仓鼠的肾功能,其机制是通过降低肾内ANG-II水平和氧化应激水平来保护糖尿病肾脏损伤。
- 张孟姝刘金磊刘学政周红丽张荣明
- 关键词：氧化应激糖尿病仓鼠
- Nogo受体在早期糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡中的作用被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨Nogo受体(nogo receptor,NgR)在糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠视网膜神经节细胞凋亡中的作用及机制。方法:链脲佐菌素诱导SD大鼠DM模型,实验分4组,对照组;DM组;siNgR组:DM大鼠玻璃体内给予NgR反义核苷酸序列;siRNA空白组:DM大鼠玻璃体内给予阴性核苷酸序列。1mo后TUNEL染色检测视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)凋亡,试剂盒检测视网膜丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,Western-blot检测视网膜NgR及caspase-3含量。结果:对照组、DM组、siRNA空白组及siNgR组MDA含量分别为3.74±0.49,7.21±0.96,6.41±1.34及4.02±0.53nmol/mg prot。与对照组相比,DM组及siRNA空白组视网膜RGC凋亡增加,NgR及caspase-3表达上调,MDA含量升高(P<0.05),而siNgR组视网膜RGC数量、NgR及caspase-3表达、MDA含量较对照组均无明显变化(P>0.05)。结论:NgR表达增加是糖尿病RGC凋亡的重要原因之一,其机制可能与NgR诱导视网膜氧化应激、上调caspase-3表达有关。
- 左中夫刘万鹏刘学政
- 关键词：糖尿病视网膜病变视网膜神经节细胞凋亡NGR
- NgR-Rhoa-Rock信号通路在早期糖尿病大鼠RGC凋亡中的作用被引量：2
- 2014年
- 目的:研究NgR-Rhoa-Rock信号通路在糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠视网膜神经节细胞凋亡中的作用及机制。方法:健康SD大鼠,以50mg/kg体质量单次腹腔注射1%链脲佐菌素的方法处理,以血糖值大于16.7mmol/L定为糖尿病模型;然后随机分成3组,每组10只。另取10只健康SD大鼠作对照组。再依次对4组大鼠进行双侧眼球玻璃体腔内注射NgR小干扰病毒10μL(siRNA组)、NgR小干扰病毒稀释液10μL(DM组)、NgR小干扰病毒阴性对照液10μL(siRNA空白组)、NgR小干扰病毒稀释液10μL(正常对照组),正常喂养。期间对血糖、体质量等一些生命指标进行观查、测量并记录。12wk后,行视网膜Western blot检测NgR、Rhoa的表达,HE染色、TUNEL染色。结果:Western检测:与正常对照组相比,DM组和siRNA空白组中NgR、Rhoa表达明显增加(P<0.01),而siRNA组无明显变化(P>0.05);与DM组和siRNA空白组相比,siRNA组NgR、Rhoa表达明显下调。HE染色:与正常对照组相比,三组模型鼠均有不同程度节细胞排列紊乱、形态不规则、间距不一致;与DM组和siRNA空白组相比,siRNA组节细胞在排列顺序、外形大小等有一定程度改善。TUNEL染色:与正常对照组相比,三组模型鼠均有节细胞凋亡;与DM组和siRNA空白组相比,siRNA组凋亡细胞数量较少,细胞外形有明显改善。结论:DM时大鼠视网膜NgR、Rhoa表达上调,抑制NgRRhoa-Rock可以改善糖尿病视网膜神经节细胞的凋亡。
- 付云杰刘学政
- 关键词：糖尿病视网膜神经节细胞凋亡
- 糜蛋白酶抑制剂对糖尿病仓鼠肾功能保护作用的实验研究
- 2017年
- 目的:观察糜蛋白酶抑制剂对糖尿病仓鼠肾脏的保护作用,进而探讨其保护肾脏损伤的机制。方法:(1)通过链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射法制备仓鼠糖尿病模型。实验分为5组,每组8只。(2)通过Western blot检测各组动物糜蛋白酶抗体、血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin I-converting enzyme,ACE)、过氧化物酶4(NADPH oxidase-4,NOX-4)、还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶亚单位p22phox的表达情况。(3)通过免疫荧光检测各组动物糜蛋白抑制剂对血管紧张素系统(reninangiotensin system,RAS)的成分,氧化应激的影响。(4)通过q RT-PCR及Western blot检测糜蛋白抑制剂对人血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,ANG-Ⅱ)来源的基质蛋白合成影响。结果:(1)免疫组化结果显示糖尿病组仓鼠肾小管和血管球糜蛋白酶表达明显。qRT-PCR结果显示糜蛋白酶m RNA水平较对照组普遍增高(P<0.01)。而胰岛素治疗后降至正常水平。(2)糜蛋白酶抑制剂抑制了糖尿病仓鼠肾内ANG-Ⅱ升高,同时明显降低了8-羟化脱氧鸟苷(8-hydroxy-2’-deoxyguanosine,8-OHd G)分泌水平。(3)NOX-4和p22phox染色表明糖尿病组血管球和肾小管区域氧化产物明显增高,而糜蛋白酶抑制剂抑制氧化产物的升高(P<0.01)。(4)Western blot证实了糖尿病组血管球NOX-4和p22phox蛋白的水平较对照组高,糜蛋白酶抑制剂明显降低了其表达。(5)血管球转化生长因子-β1(transforming growth factor-β,TGF-β1)表达糖尿病组高于对照组,同样糜蛋白酶抑制剂治疗后大大降低了TGF-β1水平。结论:糜蛋白酶抑制剂能保护糖尿病仓鼠的肾功能,其机制是通过降低肾内ANG-Ⅱ水平和氧化应激水平来保护糖尿病肾脏损伤。
- 张孟姝刘金磊刘学政周红丽张荣明
- 关键词：肾脏氧化应激糖尿病仓鼠
- 姜黄素对高浓度葡萄糖培养的RF/6A细胞活力的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨姜黄素对高浓度葡萄糖培养的猴脉络膜-视网膜内皮细胞(rhesus choroidoretinal endothelial cell,RF/6A)活力的影响及其机制。方法:RF/6A分4组培养(n=6):对照组;高浓度葡萄糖组(培养基添加30mmol/L葡萄糖);姜黄素组(培养基添加30μmol/L姜黄素);姜黄素-葡萄糖组(培养基添加30mmol/L葡萄糖及30μmol/L姜黄素)。以噻唑蓝比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测培养1,3,5d后各组细胞活力的变化;试剂盒检测分组5d后各组细胞丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;Western-blot检测分组5d后各组增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及抑癌基因p27蛋白(protein 27,p27)表达。结果:与对照组相比,高浓度葡萄糖组RF/6A活性明显降低,MDA含量增加,SOD活力降低,PCNA表达下调,p27表达上调(P<0.01);而姜黄素组及姜黄素-葡萄糖组RF/6A活力、MDA含量、SOD活力、PCNA与p27的表达均无明显变化(P>0.05)。结论:姜黄素维持高浓度葡萄糖培养的RF/6A活力,可能与姜黄素抑制高浓度葡萄糖诱发的氧化应激,恢复RF/6A的PCNA及p27蛋白表达有关。
- 张强左中夫刘学政
- 关键词：高浓度葡萄糖姜黄素氧化应激细胞活力
