博士科研启动基金(YS29030804)
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
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- 谷胱甘肽键合柱对变性核糖核酸酶的复性研究被引量：2
- 2012年
- 将氧化还原型谷胱甘肽(GSH/GSSG)共价键合到色谱固定相上,实现了对变性核糖核酸酶(RNase)的复性.实验发现,谷胱甘肽键合柱具有典型的弱阳离子交换性质,在离子交换(IEC)模式下能够对4种标准蛋白进行基线分离,且具有较高的柱效.当蛋白浓度为5 mg/mL,流速为0.2 mL/min时,在流动相中不加GSH/GSSG的条件下,GSH/GSSG柱对变性核糖核酸酶的活性回收率可达(39.5±3.8)%,而普通IEC柱对变性核糖核酸酶的活性回收率几乎为0,说明其对变性蛋白二硫键的正确对接具有明显的促进作用;在收集液中加入GSH/GSSG后,其活性回收率可达到(81.5±4.3)%.本文结果对蛋白折叠液相色谱法的发展及降低蛋白复性成本具有一定的应用价值.
- 柯从玉孟祖超
- 关键词：蛋白折叠核糖核酸酶离子交换色谱
- 谷胱甘肽键合柱对蛋白的选择性研究被引量：2
- 2012年
- 通过将谷胱甘肽键合到硅胶表面合成了同时具有弱阳离子交换(WCX)、疏水(HIC)和氢键作用的多功能色谱填料,该固定相在HIC和WCX模式下对蛋白都有很好的分离效果.实验通过计量置换保留模型对蛋白在谷胱甘肽键合柱上的色谱保留行为及机理进行了研究,结果发现,在流动相盐浓度较低时蛋白根据自身等电点高低通过静电作用力得以分离,而在高盐浓度下疏水和氢键作用力共同决定蛋白的保留.这种多作用力保留模式可有效提高色谱柱的选择性,尤其为蛋白质、多肽及氨基酸的高效分离提供新的解决思路.
- 柯从玉孙妩娟张群正郑莉
- 关键词：离子交换色谱计量置换保留模型蛋白质分离
