浙江省自然科学基金(Y2110623)
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
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- 相关机构：温州医科大学温州医学院附属第一医院温州医学院更多>>
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- 外源性17β-雌二醇促进HER2阳性乳腺癌细胞的侵袭和增殖被引量：2
- 2017年
- 目的:研究外源性雌激素是否对乳腺癌中人表皮生长因子受体2(HER2)阳性乳腺癌细胞产生作用。方法:分别以乳腺癌细胞SKBR3和MCF-7为材料,选择17β-雌二醇(E2)为外源雌激素,配制10^(-5)、10^(-6)、10^(-7)、10^(-8)、10^(-9)、10^(-10) mol/L的6种浓度培养环境,每种浓度培养时间设置24、48、72 h 3个梯度。检测HER2、ERα等标志物表达水平变化,分析E2对HER2阳性乳腺癌细胞增殖能力及侵袭性的影响。结果:在MCF-7中处理组HER2、ERα的转录水平都明显高于阴性对照组。在SKBR3细胞中仅HER2转录水平明显高于阴性对照组(P<0.05)。在蛋白水平SKBR3中HER2蛋白表达量增加(P<0.05);而在MCF-7中,ERα蛋白表达量随着时间的延长而增加,HER2几乎检测不到。在细胞增殖方面,MCF-7和SKBR3均随着E2浓度的上升细胞增殖率上升,差异有统计学意义(P<0.05)。而在侵袭性方面,MCF-7的侵袭性在72 h时较空白对照组增强(P<0.05),SKBR3侵袭性在24 h和48 h时较空白对照组增强(P<0.05),但是自身随浓度变化的规律不明显。结论:外源性雌激素对HER2阳性乳腺癌细胞的侵袭和增殖有促进作用。
- 徐宝宝姜阳王金丹李昔琪何媛媛阮青青柳鹏程高国辉金龙金
- 关键词：17Β-E2肿瘤侵润
- Anti HER2 ScFv-GFP融合抗体靶向检测HER2的表达被引量：2
- 2012年
- 为验证真核表达的携带绿色荧光的抗HER2单链抗体应用于临床诊断HER2阳性肿瘤细胞和病理组织的可靠性,构建融合基因Anti HER2 ScFv-GFP,重组入pFAST Bac HT A载体,在昆虫细胞Sf9中表达,以Ni2+-NTA亲和层析法纯化Anti HER2 ScFv-GFP融合蛋白,测定其浓度与纯度,将同浓度的纯化蛋白分别与3种乳腺癌细胞BT474、SKBR3和MCF7各混合12 h、24 h和48 h,分析其在不同时间段结合HER2阳性肿瘤细胞的稳定性。用纯化蛋白直接检测经抗原修复的乳腺癌病理组织,与免疫组织化学法检测结果对比。结果在昆虫细胞Sf9中可观察到明显绿色荧光,纯化的融合蛋白相对分子量约60 kDa,浓度为115.5μg/mL,纯度约97%,SKBR3和BT474鉴定为HER2阳性。结合12 h、24 h、48 h后其细胞表面均有明显绿色荧光,而HER2阴性MCF7被洗脱后无荧光,该抗体滴度为1:64,48 h内该荧光抗体仍具有稳定性。携带绿色荧光的融合抗体检测病理组织与IHC法的结果完全一致。表明成功表达的携带绿色荧光的抗HER2单链抗体可特异性检测HER2阳性乳腺癌细胞BT474和SKBR3,在HER2阳性肿瘤细胞和临床病理组织检测上具有应用前景。
- 高国辉陈翀杨艳梅杨涵王金丹郑易黄奇迪胡孝渠
- 关键词：绿色荧光蛋白分子诊断
