国家科技重大专项(2008ZX09101)
- 作品数：8 被引量：46H指数：4
- 相关作者：陈乃宏贺文彬胡金凤张俊龙薛薇更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院山西中医学院北京大学第六医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金山西省青年科技研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- KGF-2单克隆抗体间接ELISA筛选方法的建立被引量：3
- 2010年
- 目的建立KGF-2单克隆抗体间接ELISA的筛选方法 ,制备KGF-2单克隆抗体.方法以KGF-2为抗原免疫BALB/c小鼠,获得抗血清.通过棋盘滴定方法确定间接ELISA的抗原包被浓度及一抗、二抗最佳工作浓度;利用建立特异性好的间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞株.结果通过棋盘滴定最终确定了500μg/L的抗原包被浓度、1∶1 000的一抗血清稀释倍数及1∶2 000的二抗血清稀释倍数;筛选到两株可稳定分泌抗体、效价较高的杂交瘤细胞株.结论该研究建立了灵敏度高、特异性好的间接ELISA筛选体系,可用于KGF-2单克隆抗体的制备及检测.
- 朱佳男姚娜官丽莉车莹李校堃
- 关键词：杂交瘤细胞
- 过表达α-synuclein的细胞毒性及对损伤性刺激的影响
- 2010年
- 目的构建过表达α-synuclein的细胞模型,研究过表达α-synuclein的细胞毒性作用及其分子机制,为揭示帕金森病(PD)可能的发病机制和寻找治疗药物潜在靶点提供依据。方法脂质体法转染及过表达α-synuclein稳定株的构建,MTT法、PI染色、荧光显微镜观察用于检测过表达α-synuclein对细胞活性和分化、撤血清及MPP+损伤的影响,荧光素酶报告基因检测和Western印迹检测用于研究过表达α-synuclein对NF-κB信号通路及相关蛋白的影响。结果过表达α-synuclein对细胞的分化表型无明显影响,但能明显降低DA能细胞存活率,并显著增加撤血清损伤及MPP+毒性对细胞的损伤程度。过表达α-synuclein能够明显加重MPP+对NF-κB转录激活活性的抑制作用,其机制可能与抑制IκB-α的磷酸化有关。结论基于遗传背景与环境因素相结合的PD研究模型能够更好地拟合其病理过程,更加科学合理。NF-κB信号通路活性的抑制可能是PD发病的又一新机制,针对该通路上相关蛋白的深入研究可能成为PD治疗药物开发的新型研究方向。
- 金金苑玉和杨波孙建栋陈乃宏
- 关键词：Α-SYNUCLEIN细胞毒性MPP+NF-ΚB
- 左旋奥硝唑剂量递增人体耐受性及药动学研究被引量：7
- 2011年
- 目的研究中国健康志愿者静脉滴注左旋奥硝唑剂量递增的耐受性、安全性及药动学。方法 20名健康男性、20名健康女性受试者按体重分层随机分入4组,分别接受500,1 000,1 250,1 500 mg单次用药试验;单次用药试验结束清洗2周后,500 mg剂量组再次接受每天早、晚500 mg连续5 d的多次用药试验;1 000 mg剂量组再次接受1 000 mg奥硝唑(阳性对照比较不良反应)的单次用药试验。观察不良事件,HPLC测定血浆中左旋奥硝唑浓度,BPSS2.0计算主要药动学参数。结果单次静脉滴注左旋奥硝唑500,1 000,1 250,1 500 mg的不良反应为0/9,0/10,0/10,2/10;多次静脉滴注左旋奥硝唑500 mg的不良反应为3/10;单次静脉滴注消旋奥硝唑1 000 mg的不良反应为5/10。单次用药500,1 000,1 500 mg,多次用药500 mg的ρmax分别是(8.63±2.57),(18.6±4.08),(27.5±10.6),(23.4±4.67)mg·L-1;AUC0-60分别为(109.5±24.0),(293.1±69.9),(422.9±84.0),(412.3±99.4)mg.h.L-1。结论中国健康志愿者静脉滴注左旋奥硝唑500～1 500 mg单剂量,500mg多剂量是安全,能够耐受的;500～1 500 mg内呈线性药动学特征,多次用药后体内有一定蓄积。
- 赵亚男吴佩孙华杨菁菁过怿赟柳晓泉
- 关键词：耐受性药动学
- 异地衣糖和藏红花醇提物对海马齿状回长时程增强影响的比较研究
- 2009年
- 长时程增强是神经系统信息储存的细胞水平模型,被认为是学习和记忆的形成机制。长时程增强电生理技术常用于促进记忆药物的筛选实验。海马齿状回长时程增强筛选研究发现,异地衣糖能在20 pulses/100Hz的刺激条件下诱导出长时程增强,而单独应用该刺激条件并不能诱导出长时程增强。研究经验表明具有这样作用的受试药物,往往能够拮抗30%乙醇抑制30 pulses/60Hz刺激条件诱导的长时程增强,比如藏红花醇提物。但在随后的研究中发现,异地衣糖不能拮抗30%乙醇对30 pulses/60Hz刺激条件诱导的长时程增强,提示异地衣糖与藏红花醇提物的促进长时程增强作用机制不同,是通过某一未知的新机制实现的。
- 贺文彬张俊龙薛薇胡金凤武冬慧陈乃宏
- 关键词：海马长时程增强
- 鹿茸醇提取物对大鼠海马长时程增强的易化作用被引量：4
- 2009年
- 目的研究鹿茸醇提物对海马CA3区Schaffer侧枝-CA1区通路长时程增强的影响。方法采用立体定位仪固定大鼠头部,按照脑立体定位图谱确定刺激电极坐标和记录电极坐标,在体电生理技术检测海马CA1区长时程增强。本研究共包括3组实验,LRE和LRW对基础突触传递的作用,实验分为两组LRE(500mg/kg)组和LRW(500mg /kg)组,每组各5只大鼠;LRE和LRW对强高频刺激S-HFS诱导LTP的影响,实验分为3组,即溶剂对照组(Vehicle)(n=8)、LRE(500mg/kg)组(n=5)和LRW(500mg k/g)组(n=5);LRE和LRW对弱高频刺激W-HFS诱导LTP的影响,实验分为5组,即Vehicle组(n=7)、LRW(500mg/kg)组(n=6)、LRE(100mg/kg)组(n=5)、LRE(250mg/kg)组(n=5)、LRE(500mg/kg)组(n=5)。结果单独给予20pulses100Hz的弱刺激不能诱导出长时程增强;灌胃给予鹿茸醇提物500mg/kg,作用30min后,应用同等强度的弱刺激能够成功诱导出长时程增强;而鹿茸水提物则无此作用。结论鹿茸醇提物能够易化海马CA1区长时程增强,具有潜在的促智作用。
- 贺文彬张俊龙薛薇胡金凤王晓峰陈乃宏
- 关键词：海马突触可塑性长时程增强易化作用
- 黄酮类化合物杨梅酮促进大鼠海马长时程增强的作用被引量：4
- 2009年
- 目的:研究黄酮类化合物杨梅酮对海马CA1区突触可塑性的影响。方法:采用立体定位仪固定大鼠头部,按照脑立体定位图谱确定刺激电极坐标和记录电极坐标,在体电生理技术检测海马CA1区长时程增强。结果:黄酮类化合物杨梅酮对强高频刺激(100 pulse 100Hz)诱导的长时程增强无显著影响;单独给予弱高频刺激(20 pulses 100 Hz)不能诱导出长时程增强,杨梅酮口服作用30 min后,应用该强度的弱刺激能够成功诱导出长时程增强。结论:黄酮类化合物杨梅酮能够易化弱高频刺激诱导出长时程增强现象,具有潜在的益智作用。
- 贺文彬张俊龙薛薇胡金凤王晓峰陈乃宏
- 关键词：黄酮类化合物海马长时程增强
- 巴戟天寡糖对海马神经细胞再生及神经元生长的影响被引量：27
- 2012年
- 目的:考察巴戟天寡糖对海马神经细胞再生及神经元生长的影响。方法:成年ICR小鼠随机分为生理盐水对照组、氟西汀对照组(18 mg.kg-1)和巴戟天寡糖高、低剂量组(50,25 mg.kg-1),各组连续腹腔注射14 d。采用免疫组化法测定小鼠海马齿状回新增殖神经细胞的数目;通过原代细胞培养观察不同剂量巴戟天寡糖(1.25,2.5,5,10 mg.mL-1)对大鼠海马神经元树突生长的影响。结果:巴戟天寡糖50mg.kg-1能够显著促进成年小鼠海马神经细胞的再生;10 mg.mL-1巴戟天寡糖能够增加原代培养的海马神经元树突及分支数目(P<0.05)。结论:巴戟天寡糖对海马神经可塑性具有调节作用,该作用是否是其抗抑郁作用机制之一仍需进一步证实。
- 邹连勇马远林宓为峰李玲芝张鸿燕
- 关键词：巴戟天寡糖抗抑郁药海马
- Ca^(2+)和突触融合蛋白1对突触前膜5-HT转运体转运活性的调控研究被引量：1
- 2010年
- 目的:考察Ca2+和/或囊泡胞吐相关蛋白突触融合蛋白1(syntaxin 1)对5-HT转运体(SERT)转运功能的调控作用。方法:通过增加突触前膜外Ca2+水平和利用离子霉素促Ca2+内流,观察Ca2+对SERT活性和syntaxin 1/SERT复合体的影响;通过肉毒毒素C(BoNT/C)阻断syntaxin 1的作用,考察syntax-in 1对SERT转运功能的调控。结果:增加突触膜外Ca2+水平和/或促其内流将促进SERT的磷酸化,降低SERT的再摄取活性,促进蛋白激酶C(PKC)激动剂佛波酯(PMA)诱导的SERT磷酸化,降低功能性SERT/syntaxin 1复合体的水平;而BoNT/C预处理能阻断syntaxin 1的功能,显著抑制SERT的再摄取功能,减少功能性SERT/syntaxin1复合体的水平。结论:介导神经信号传递的Ca2+和调控囊泡膜融合和释放神经递质的syntaxin 1可能通过磷酸化SERT和调节SERT/syntaxin 1复合体的水平,调控SERT的再摄取活性。
- 刘治军赵明陈乃宏
- 关键词：5-羟色胺转运体磷酸化
