国家自然科学基金(301709361)
- 作品数：4 被引量：20H指数：2
- 相关作者：周昕陈方耿红全谢华陆建华更多>>
- 相关机构：上海第二医科大学附属新华医院上海市儿科医学研究所浙江大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育发展基金会“曙光计划”项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 尿路移行上皮细胞的培养鉴定被引量：4
- 2003年
- 为建立尿路上皮细胞分离、培养、扩增的常规 ,获得构建组织工程学泌尿系器官所需的大量尿路移行上皮细胞 ,分别采用刮削法和组织块法分离出尿路上皮细胞 ,在角化细胞培养基 (Keratinocyte_SFM)中培养 ,观察细胞形态、扩增情况 ,并用免疫组化方法检测细胞类型特异性蛋白质。结果 :尿路移行上皮细胞生长良好 ,呈现出典型的移行上皮形态特征。细胞经10次传代后仍扩增迅速 ,免疫组化染色显示CKAE1/AE3 阳性、CK34βE12 阴性。提示该常规中细胞分离方法可靠 ,传代顺利 ,扩增迅速 ;尿路上皮细胞经10次传代仍保持其固有生物学特性 。
- 耿红全陈方吴湘如周昕谢华陆建华
- 关键词：移行上皮细胞细胞培养
- 无细胞基质组织工程膀胱的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的探讨以膀胱无细胞基质为细胞载体的无细胞基质组织工程膀胱作为膀胱替代材料的可行性。方法采用叠氮钠、DNase、PBS反复振荡洗涤膀胱组织，形成膀胱无细胞基质。自8只杂交长风白猪手术获取小块膀胱组织，分离出膀胱平滑肌细胞、移行上皮细胞培养、增殖，将增殖的两种细胞种植于膀胱无细胞基质两面，共培养后回植，大面积替代自体猪的部分膀胱。分别观察1个月（2只）、3个月（3只）、6个月（3只）后处死，HE免疫组化观察替代部分膀胱组织结构，组织浴槽中研究无细胞基质组织工程膀胱肌条的体外功能情况。结果无细胞基质中已无细胞成分残留，培养的膀胱细胞可粘附于无细胞基质并生长。细胞无细胞基质复合物替代膀胱后，3个月、6个月组均见替代处完整的移行上皮细胞覆盖于腔面，其下膀胱肌层形成，均排列良好，与正常膀胱组织无明显区别。组织浴槽研究提示无细胞基质组织工程膀胱肌条具有与正常膀胱肌条相似的体外功能。结论无细胞基质组织工程膀胱技术有望为临床提供可行的替代材料来源。
- 徐国锋耿红全潘骏陈方
- 关键词：膀胱
- 膀胱粘膜下层无细胞基质作为细胞载体的可行性研究被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨膀胱粘膜下层无细胞基质作为组织工程学细胞载体的可行性。方法 采用胶原酶自膀胱组织分离出平滑肌细胞,在DMEM(含10％胎牛血清)中培养、传代。自膀胱显微解剖出膀胱粘膜下层,以0.5％SDS、双蒸水彻底洗涤后形成无细胞基质。平滑肌细胞以5.0×10~6/cm^2密度种植于膀胱无细胞基质,分别于1周、2周、3周、4周时取标本,HE染色、扫描电镜等观察细胞生长情况。结果 平滑肌细胞可在膀胱粘膜下层无细胞基质上粘附。1周时,平滑肌细胞主要位于膀胱粘膜下层无细胞基质的表面。第2、3周,细胞数量明显增多,并可见细胞向膀胱粘膜下层无细胞基质的中间部位侵入。第4周细胞数量减少。结论 膀胱粘膜下层无细胞基质可以作为细胞载体应用于组织工程学研究。该细胞-载体复合物的回植时间应在3周前。
- 耿红全唐达星陈方周昕吴湘如谢华徐卯升刘国华
- 关键词：细胞载体胶原酶细胞培养生物材料
- 尿路平滑肌细胞的培养和鉴定被引量：14
- 2003年
- 目的 建立尿路 (膀胱、输尿管、肾盂 )平滑肌细胞分离、培养、扩增的常规方法。 方法 人肾盂及输尿管标本各 1例、人膀胱标本 3例 ,猪输尿管标本 1例、猪膀胱标本 5例 ,采用胶原酶消化法从中分离尿路平滑肌细胞 ,在含 10 %胎牛血清的DMEM中培养 ,观察细胞形态及扩增情况 ,用免疫组化方法鉴定细胞类型特异性蛋白质α 肌动蛋白 (α actin)。 结果 尿路平滑肌细胞生长良好 ,呈现典型的平滑肌细胞形态。细胞经 6次传代仍扩增迅速 ,免疫组化染色显示α actin阳性。 结论 此培养方法简单、可靠 ,短期内可获得大量纯净的尿路平滑肌细胞。
- 周昕耿红全吴湘如谢华陆建华蔡冰徐卯生薛皓亮陈方
- 关键词：胶原酶消化法DMEM免疫组织化学Α-肌动蛋白
