国家自然科学基金(30070476)
- 作品数：13 被引量：281H指数：10
- 相关作者：李晚忱付凤玲荣廷昭潘光堂朱祯更多>>
- 相关机构：四川农业大学中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省应用基础研究计划项目长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 可去除选择标记的转CpTI基因抗虫玉米研究被引量：4
- 2005年
- 将组成型表达的玉米泛素启动子与豇豆胰蛋白酶抑制剂基因CpTI连接,插入根癌农杆菌双T-DNA质粒,构建一个T-DNA结构域含有抗潮霉素选择标记基因hyg;另一个T-DNA结构域含有抗虫基因的双T-DNA单子叶植物表达载体,用以转化农杆菌菌株,再通过共培养转化玉米胚性愈伤组织。通过潮霉素培养基抗性筛选,用特异PCR扩增和Southern杂交检测,从分化再生的T0代植株中,鉴定出7个转化CpTI基因的阳性植株。目前,正结合进行田间分离纯合和DNA分子鉴定,培育去除选择标记基因的转基因抗虫玉米自交系。
- 于海清渠柏艳付凤玲李晚忱
- 关键词：玉米转基因抗虫CPTI
- 玉米未成熟胚胚性愈伤组织诱导率与内源激素含量的关系被引量：41
- 2006年
- 以胚性愈伤组织诱导率高低不同的9个玉米自交系未成熟胚为外植体,用改良N6培养基诱导培养愈伤组织。酶联免疫法测定不同培养时间后未成熟胚,以及由此诱导的胚性和非胚性愈伤组织,内源脱落酸(ABA)、吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA3、GA4)和细胞分裂素(DHZRI、PA、ZR)含量。结果发现,胚性愈伤组织诱导率与未成熟胚ABA和IAA含量正相关,与胚性和非胚性愈伤组织ABA含量正相关,与胚性愈伤组织GA3含量负相关。在胚性愈伤组织开始发生之际,外植体的ABA和IAA含量出现峰值,GA3含量出现低谷。因此认为,未成熟胚高水平的ABAI、AA含量和低水平的GA3含量,有利于胚性愈伤组织的诱导。但是胚性愈伤组织的ABA含量却低于非胚性愈伤组织,且胚性愈伤组织诱导率与胚性愈伤组织IAA含量负相关。由此看来,胚性愈伤组织的诱导和保持,可能还与各种激素的协同作用有关。
- 付凤玲冯质雷渠柏艳李晚忱
- 关键词：玉米未成熟胚胚性愈伤组织诱导率内源激素
- N6培养基添加钙和烯效唑对玉米幼胚培养的作用被引量：25
- 2005年
- 通过浓度筛选和比较试验,将以N6培养基为基础的诱导培养基和继代培养基的钙浓度,从1 .13mmol L提高到5mmol /L ,并分别添加1 .0 0mg L和0 .5 0mg/ L烯效唑(S -330 7) ,对玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导和继代具有促进作用,而不影响胚性愈伤组织的分化再生。在分化培养基中添加低浓度(0 .2 5mg L)S -330 7,能显著提高分化再生率,并有利于壮苗。但增加钙浓度或添加烯效唑并不能使R15等难以诱导愈伤组织的自交系产生胚性愈伤组织。钙浓度提高以后,在培养基中再添加钙调蛋白(CaM)抑制剂盐酸氯丙嗪(CPZ) ,可抑制Ca2 + 的促进作用,说明该促进作用与Ca2 + CaM系统的信息调节有关。本研究改进的N6培养基,可提高优良玉米自交系的胚性愈伤组织诱导率和继代生长量,为转基因研究提供遗传基础优良的受体系统。
- 付凤玲李晚忱荣廷昭
- 关键词：玉米胚性愈伤组织钙烯效唑
- 提高N_6培养基钙浓度对玉米幼胚培养的影响被引量：18
- 2003年
- 筛选试验结果表明 ,将 N6 培养基 Ca2 + 浓度从 1.13mmol/ L提高到 5 m mol/ L ,对玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导、继代和分化具有促进作用。在一次继代过程中 ,Ca2 +浓度为 5 m mol/ L 的培养基上培养的胚性愈伤组织相对生长量比 1.13m mol/ L 的原培养基增加 0 .8倍。 Ca2 +浓度提高以后 ,在培养基中再添加钙调蛋白 (Ca M)抑制剂盐酸氯丙嗪 (CPZ) ,可抑制 Ca2 +的促进作用 ,说明钙增加后对玉米胚性愈伤组织诱导和继代的促进作用受Ca2 + / Ca M信息系统控制。用改进后的 N6 培养基 。
- 付凤玲李晚忱荣廷昭潘光堂
- 关键词：培养基钙浓度玉米幼胚胚性愈伤组织
- 外源超氧化物歧化酶基因MnSOD在玉米中的过量表达及抗逆性的提高(英文)被引量：36
- 2006年
- 为研究过量表达的超氧化物歧化酶基因MnSOD对玉米抗逆性的作用,构建了小麦来源MnSOD基因的单子叶植物高效表达载体,用基因枪法转化优良玉米自交系胚性愈伤组织。经潮霉素梯度浓度培养基筛选,从阳性愈伤组织再生获得9个正常结实的植株。其中5株经PCR和Southern印迹检测表现为阳性,表明外源基因已整合到玉米基因组中。提取SOD酶液,非变性聚丙烯酰胺浓度梯度凝胶电泳分离,用H2O25mmol/L抑制FeSOD和Cu/ZnSOD活性,氯化硝基四氮唑蓝染色检测MnSOD酶活性。Southern印迹呈阳性的5个植株,MnSOD酶活性均高于未转基因的对照。甲基紫精氧化损伤处理后,用电解质渗漏率法测定阳性株系的叶片渗透液的电导率。结果表明,转基因株系的抗氧化损伤能力显著高于对照。
- 杜娟朱祯李晚忱
- 关键词：活性氧超氧化物歧化酶抗逆性玉米
- 57个常用玉米自交系的耐旱性鉴定被引量：35
- 2002年
- 利用塑料大棚遮挡降水 ,在土壤含水量略高于萎蔫系数的干旱条件下 ,调查 5 7个常用自交系的籽粒产量 ,并以正常灌水条件下的籽粒产量为对照 ,转换为耐旱系数。鉴定结果认为 ,815 6 5为耐旱自交系 ,N87- 1、R0 9、96 35、96 5 1、南 2 1- 3、TF1和 5 0 0 3的耐旱性也较强。另外 ,在相同条件下调查 12个耐旱性不同自交系与生长发育和产量有关的 9个农艺性状 ,根据其与正常灌水对照的差异计算耐旱系数 ,并与籽粒产量耐旱系数进行多元线性回归分析。雌雄花期间隔、穗位叶面积、根重和百粒重对籽粒产量的偏回归系数均达极显著水平 。
- 周树峰李晚忱付凤玲荣廷昭
- 关键词：玉米自交系耐旱性籽粒
- 钙在玉米愈伤组织继代及盐诱导脯氨酸积累中的作用被引量：10
- 2003年
- 通过筛选试验 ,将N6 培养基Ca2 + 含量从原来的 1 13mmol/L提高到 5mmol/L ,对玉米幼胚胚性愈伤组织的继代具有明显促进作用 ,在一次继代过程中 ,Ca2 + 含量 5mmol/L的培养基培养的胚性愈伤组织相对生长量比Ca2 + 含量 1 13mmol/L的原培养基增加 0 8倍。将愈伤组织接种于含NaCl的N6 继代培养基上 ,其生长极显著受抑制 ,脯氨酸积累增加。培养基中同时添加 5mmol/LCa2 + ,不仅在一定程度上缓解盐分对生长的抑制作用 ,而且能明显促进游离脯氨酸的积累。
- 付凤玲李晚忱潘光堂
- 关键词：玉米盐胁迫钙脯氨酸
- 农杆菌介导豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(cpti)在玉米中的遗传转化被引量：13
- 2004年
- 伍晓丽朱祯李晚忱潘光堂曹墨菊荣廷昭
- 关键词：农杆菌介导豇豆胰蛋白酶抑制剂基因玉米抗虫性
- 植物逆境诱导启动子mwcs120的克隆及表达特性研究被引量：16
- 2005年
- 以小麦基因组DNA为模板,通过特异PCR扩增,克隆逆境诱导表达启动子mwcs120。序列分析表明,该启动子与冷诱导启动子wcs120的序列同源性为97.1%,有2个位点发生了突变,但逆境调控保守元件的序列未发生改变。瞬时表达实验表明,在单子叶和双子叶植物中,mwcs120启动子均受低温和高盐逆境诱导,使GUS基因的表达增强。因此,mwcs120启动子在作物抗逆基因工程中具有较好的应用前景。
- 杜娟朱祯李晚忱
- 关键词：逆境诱导启动子克隆
- 19个玉米自交系的数量性状和AFLPs的遗传差异比较研究被引量：12
- 2004年
- 以3个新近选育和16个生产上常用骨干系总计19个玉米自交系为材料,比较它们在数量性状和AFLPs上的遗传差异。结果表明,表型数量性状与AFLPs数据的两种聚类结果都与自交系系谱有较好的一致性,且AFLP的吻合程度较高,两种聚类结果都一致把19个自交系所组配的生产推广优势组合的双亲分在不同的组或亚组;其中新选系中的21-ES、A318与其他骨干系在数量性状与AFLPs上有较大差异,被单独聚为一类;各自交系间的数量性状和AFLPs的遗传距离与其F1的中亲优势值呈正相关。
- 高世斌荣廷昭李晚忱潘光堂
- 关键词：玉米自交系数量性状AFLPS聚类分析杂种优势
