山东省自然科学基金(Y2007C003)
- 作品数：8 被引量：18H指数：2
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- SIRT1在NAD保护神经轴突作用中的表达变化被引量：1
- 2009年
- 目的探讨沉默信号调控因子(SIRT1)在烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)保护神经轴突中的作用。方法应用长春新碱毁损法制备背根神经节轴突变性细胞模型,应用透射电镜、RT-PCR、Western blot方法,观察正常背根神经节培养组、长春新碱毁损组、NAD保护组神经轴突的生长变化、超微结构变化和SIRT1 mRNA及SIRT1蛋白的表达变化。结果NAD保护组毁损8h后轴突远端始发生轻微肿胀,断离。透射电镜结果显示,长春新碱毁损组轴突肿胀,大量髓样小体出现,微丝微管排列紊乱,聚集,溶解,被絮状沉淀物和膜性结构所代替。NAD保护组可见较多平行排列的微丝微管,轴突肿胀较轻。RT-PCR结果显示,NAD保护组的SIRT1基因表达较毁损组上调。Western blot结果显示,损伤组可见其蛋白表达量明显降低,NAD保护组中SIRT1蛋白表达较毁损组上调。结论SIRT1参与NAD对轴突变性的保护作用。
- 綦晓霞李振华张静房卢静杨淑华孙晋浩
- 关键词：NAD
- 神经上皮干细胞粘附壳聚糖纤维生长分化的实验研究
- 2010年
- 目的检测神经上皮干细胞与壳聚糖纤维的生物相容性,并探讨其在壳聚糖纤维材料上的生长、分化情况。方法从胚胎神经管取材神经上皮干细胞,并与壳聚糖纤维进行体外共培养。采用MTT法检测细胞在壳聚糖纤维上的活性,采用光镜和扫描电镜技术观察细胞在壳聚糖纤维上的存活、生长状况,采用免疫细胞化学染色鉴定神经上皮干细胞的分化情况。结果神经上皮干细胞可以贴附在壳聚糖纤维表面生长,并可分化为神经元和神经胶质细胞,细胞活性与单纯神经上皮干细胞培养组没有明显差别。结论壳聚糖纤维与神经上皮干细胞有良好的生物相容性,二者在外周神经损伤的治疗中具有良好的应用前景。
- 房芃李振华杨昆张静刘文静綦晓霞杨淑华孙晋浩
- 关键词：干细胞壳聚糖纤维
- 寻常型银屑病皮损组织中骨桥蛋白的表达变化及意义
- 2013年
- 目的观察骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)在寻常型银屑病皮损组织中的表达变化,并探讨其意义。方法采用PV-9000免疫组织化学法检测20例寻常型银屑病皮损组织及15例健康对照皮肤组织中OPN的表达,在显微镜下选取阳性程度最高的"热点区域",使用Image-Pro Plue软件计算两者灰度值并进行比较。结果银屑病皮损中OPN为角质形成细胞的细胞质着色,为棕黄色,主要表达于表皮的基底层和棘层;健康对照皮肤组织中为黄色及淡黄色着色,主要位于基底层和棘层的下部。两者的灰度值分别为107.23±21.67和56.82±9.92(P<0.05)。结论 OPN在寻常型银屑病皮损组织中表达上调,可能参与了银屑病的发病过程。
- 张岩刘盈杉于晓静苏英张杰
- 关键词：寻常型银屑病骨桥蛋白
- 二甲双胍对HaCaT细胞增殖及miR-21-5p和PDCD4表达的影响被引量：2
- 2015年
- 目的 探讨二甲双胍对角质形成细胞增殖的影响及其可能的作用机制.方法 以HaCaT细胞为研究对象,分别给予不同浓度二甲双胍（25、50、75、100 mmol/L）刺激24 h,CCK8法检测HaCaT细胞增殖活性;实时定量PCR法检测HaCaT细胞中miR-21-5p及其下游靶基因PDCD4 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测HaCaT细胞中PDCD4蛋白表达水平.多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验.结果 二甲双胍可抑制HaCaT细胞增殖,25、50、75、100 mmol/L二甲双胍作用于HaCaT细胞24 h后,细胞抑制率分别为5.43％±3.67％、19.61％±6.95％、45.93％±9.56％、61.91％±6.93％,各组细胞抑制率差异有统计学意义（F=246.90,P＜0.05）;25 mmol/L组与对照组（0.00％±3.00％）相比,差异无统计学意义,其余各组抑制率均较对照组显著增高（P＜0.05）;实验组不同浓度组间比较,差异也均有统计学意义（P＜0.05）.25、50、75、100 mmol/L二甲双胍实验组miR-21-5p mRNA相对表达量（2-△△Ct）分别为0.90±0.11、0.33±0.05、0.21±0.07、0.14±0.04,PDCD4mRNA相对表达量（2-△△Ct）分别为2.11±0.64、7.22±1.13、11.16±1.23、19.12±3.16,各组细胞miR-21-5p mRNA和PDCD4 mRNA的表达差异均有统计学意义（F值分别为36.99和96.26,均P＜0.05）;25 mmol/L组与对照组相比,差异无统计学意义,其余各组miR-21-5p及PDCD4 mRNA的表达均较对照组显著下调或上调（均P＜0.05）;实验组不同浓度组间比较,差异也均有统计学意义（P＜0.05）.与对照组相比,25、50、75、100 mmol/L二甲双胍实验组PDCD4蛋白表达明显升高,其相对表达量分别为1.22±0.08、2.09±0.20、2.26±0.11、2.37±0.07,组间表达差异有统计学意义（F=75.37,P＜ 0.05）.25 mmol/L组与对照组相比差异无统计学意义,其余各组均较对照组明显升高（P＜0.01）.结论 二甲双胍在体外能够显著抑制HaCaT细胞的增殖,可能通过下调miR-21-5p的表达,使其下游靶基因PD
- 江萌马伟元孙青
- 关键词：角蛋白细胞二甲双胍细胞增殖PDCD4
- 躯干神经嵴干细胞体外分离培养及其增殖、分化的实验研究被引量：5
- 2009年
- 目的体外分离培养鉴定躯干神经嵴干细胞,探讨其生物学特性,为研究周围神经再生修复提供新的细胞来源。方法取大鼠胚胎躯干部神经管,组织块法培养获取躯干神经嵴干细胞,通过形态学及免疫细胞化学观察其细胞生长、增殖、分化等特性。结果原代培养的躯干神经嵴干细胞呈梭形,其特异性标记物nestin和p75表达阳性,并有较高的增殖活性。传代培养后,在含血清培养基中,其分化细胞呈GFAP、MAP-2、α-SMA阳性。结论成功地培养了躯干神经嵴干细胞,细胞表现出多潜能干细胞特性,为研究周围神经组织工程种子细胞来源提供实验依据。
- 卢静孙晋浩张静丛丽綦晓霞庄园杨洁李振华
- 关键词：神经嵴干细胞细胞培养细胞分化
- 转录因子CCAAT／增强子结合蛋白α在银屑病皮损中的表达及意义被引量：2
- 2014年
- 目的探讨转录因子CCAAT，增强子结合蛋白α（c／EBP—d）在寻常性银屑病皮损中的表达及与角质形成细胞异常增殖及皮损严重程度间的相关性。方法用免疫组化二步法及Westem印迹检测30例寻常性银屑病患者皮损和30例健康对照皮肤的表皮中C／EBP-α。免疫组化法检测Ki-67的表达，并根据Ki-67阳性表达数量计算增殖指数，Pearson相关分析法分析寻常性银屑病皮损中C／EBP-α的表达水平与角质形成细胞Ki一67增殖指数及银屑病皮损面积和严重程度指数（PASI评分）间的相关性。结果C／EBP—a主要在角质形成细胞胞质中表达，寻常性银屑病皮损中C／EBP—d的表达较健康对照皮肤明显下调（t=7．82，P〈0．05）。Ki-67主要在角质形成细胞胞核中表达，寻常性银屑病皮损中角质形成细胞的增殖指数明显高于健康对照皮肤（t=4．54，P〈0．05）。经Pearson相关分析，寻常性银屑病皮损中C／EBP-α表达水平与增殖指数呈负相关，与PASI评分呈负相关。Western印迹结果亦显示，C／EBP-α在银屑病皮损处的表达量显著下调。结论C／EBP—α在寻常性银屑病皮损中表达下调，可能参与了寻常性银屑病的发病过程。
- 贾琨张晓峰董宇昊张岩马伟元
- 关键词：银屑病增殖指数
- 应用胶原-壳聚糖桥接管引导大鼠坐骨神经再生被引量：7
- 2008年
- 目的:观察胶原-壳聚糖桥接管促进大鼠坐骨神经损伤后再生与修复的作用。方法:用壳聚糖和胶原蛋白按1∶3的比例采用冷冻干燥法制成胶原-壳聚糖复合导管;将20只雄性Wistar大鼠随机分为2组,胶原-壳聚糖导管组和硅胶管组,切断坐骨神经,建立10mm的缺损动物模型;分别用胶原-壳聚糖导管和硅胶管进行桥接。于术后不同时间对2组动物进行大体观察,并于术后14周进行电生理、组织学及逆行示踪检测,比较2组大鼠坐骨神经的再生和功能恢复情况。结果:术后14周2组动物坐骨神经再生和功能恢复情况的各项检测指标显示,胶原-壳聚糖桥接组明显优于硅胶管桥接组。结论:胶原-壳聚糖导管可用来桥接损伤神经,在周围神经缺损修复方面具有良好的应用前景。
- 刘文静高英茂李振华暴利华王家增孙晋浩
- 关键词：胶原壳聚糖周围神经
- NAD延缓背根神经节轴突变性的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)对神经轴突变性的保护作用。方法用长春新碱处理原代培养的背根神经节细胞,建立轴突变性细胞模型,然后加入不同浓度的NAD,观察神经轴突生长状况,MTT检测背根神经节细胞的生长活性,行神经丝蛋白(NF)免疫组化染色观察神经轴突的变化。结果损伤组加入长春新碱8 h后,轴突远端发生典型的轴突变性,12 h后轴突肿胀,断裂,24 h后见不到完整的轴突结构。保护组加入NAD后可明显延缓轴突变性,在12 h后仍能保持比较完整轴突结构,24 h后远端发生轻微变性。MTT结果显示:NAD保护组可提高细胞存活率(P<0.01)。轴突计数显示:NAD保护组在加入长春新碱后12 h,只有35%左右的轴突发生变性,而损伤组却高达60%的轴突发生了变性(P<0.01)。结论NAD对轴突变性具有明显的保护作用,可延缓轴突变性。
- 綦晓霞李振华张静刘文静卢静房芃杨洁孙晋浩
- 关键词：轴突背根神经节烟酰胺腺嘌呤二核苷酸WISTAR
