国家自然科学基金(30672225)
- 作品数：4 被引量：25H指数：2
- 相关作者：廖秦平于丽陈锐赵健张乃怿更多>>
- 相关机构：北京大学第一医院中国科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部科学技术研究重大项目国家教育部“985工程”更多>>
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- 基质金属蛋白酶2基因启动子的甲基化状态对子宫内膜癌侵袭力调控的分子机制被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨DNA甲基化对子宫内膜癌细胞株中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)基因表达的调控作用及DNA甲基化酶抑制剂5-氮-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-aza-CdR)对子宫内膜癌侵袭能力的作用。方法:选取人子宫内膜癌细胞株Ishikawa和HEC-1A作为研究对象,采用亚硫酸氢盐修饰后的克隆测序法检测5-aza-CdR处理前后MMP-2启动子区CpG位点甲基化状态及其变化。用不同浓度的5-aza-CdR处理Ishikawa和HEC-1A细胞株后,利用实时定量PCR和Matrigel Invasion Transwell方法测定分析其mRNA水平表达和侵袭能力的变化。结果:在Ishikawa和HEC-1A细胞中检测到MMP-2基因启动子区域整体甲基化水平较低,但关键转录调控元件结合部位的CpG位点甲基化频率较高,在HEC-1A细胞中分别为80%和70%,在Ishikawa细胞中分别为60%和40%,5-aza-CdR作用后,其甲基化程度降低,HEC-1A细胞中分别为20%和10%,在Ishikawa细胞中完全去甲基化。不同浓度5-aza-CdR作用72 h后,各组细胞中MMP-2 mRNA表达水平、穿膜细胞数均明显上调,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MMP-2启动子区特异CpG位点的甲基化状态可能参与其转录水平表达的调控,5-aza-CdR可能通过上调MMP-2 mRNA表达促进子宫内膜癌细胞Ishikawa和HEC-1A的体外侵袭。
- 胡倩于丽廖秦平
- 关键词：基质金属蛋白酶类肿瘤侵润脱氧胞苷
- 子宫内膜细胞学检查在筛查子宫内膜癌中的应用被引量：20
- 2010年
- 子宫内膜癌是女性生殖道三大恶性肿瘤之一,占女性恶性肿瘤总数的6%[1],在欧美地区其发病率已占妇科恶性肿瘤的第一位[2].近年来,由于我国经济的迅速发展、生活方式及饮食结构的改变、性激素的广泛应用等因素,子宫内膜癌的发病率明显上升.
- 张乃怿吴成赵健陈锐廖秦平
- 关键词：子宫内膜癌细胞学检查妇科恶性肿瘤女性生殖道饮食结构
- 子宫内膜癌中孕激素受体亚型表达及其甲基化状态的研究被引量：3
- 2008年
- 目的:研究子宫内膜癌中孕激素受体亚型PRA、PRB表达与其启动子区甲基化状态的关系,探讨子宫内膜癌中孕激素受体亚型表达下调的机制。方法:(1)应用Real-Time PCR法检测子宫内膜癌及正常组织中孕激素受体亚型PRA、PRB mRNA的表达及去甲基化试剂5-Aza-CdR处理Ishikawa细胞前后孕激素两种受体亚型及DNA甲基化转移酶mRNA的表达;(2)应用甲基化特异性PCR(MS-PCR)检测子宫内膜癌细胞系Ishikawa中PRA、PRB的甲基化状态。结果:与正常子宫内膜组织比较,子宫内膜癌组织中,总PR表达显著降低,与病理类型相关;PRB表达显著下降,与其临床特征无关。子宫内膜癌细胞系Ishikawa中,加入5-Aza-CdR2.5μmol/L48h后,孕激素受体亚型PRA、PRB甲基化条带均消失;孕激素受体亚型PRA、PRB mRNA表达水平增加;同时Ishikawa细胞中DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3B表达下调。结论:子宫内膜癌组织中,孕激素受体亚型mRNA表达下调可能与子宫内膜癌的发生相关;孕激素受体亚型表达下调与其启动子区甲基化状态相关;去甲基化试剂5-Aza-CdR可逆转基因启动子区的甲基化状态,恢复PR基因的表达。
- 陈锐于丽廖秦平
- 关键词：子宫内膜肿瘤孕激素受体亚型甲基化
- 雌激素受体亚型α对子宫内膜癌细胞HEC-1B侵袭能力调控的研究被引量：1
- 2008年
- 目的:特异性下调子宫内膜癌细胞中的ERα基因,探讨ERα亚型表达在子宫内膜癌侵袭中的作用。方法:将ERα的小干扰RNA(siRNA-small interfering RNA)转染子宫内膜癌细胞HEC-1B,通过RT-PCR和Western blot证实ERα基因的有效阻断。通过transwell小室法检测下调ERα基因表达前后HEC-1B细胞的侵袭能力;应用RT-PCR检测转染前后细胞MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2mRNA表达水平的变化;Western blot及明胶酶谱分别检测细胞分泌TIMP-1、TIMP-2、MMP-2和MMP-9蛋白的水平。结果:(1)将ERα-siRNA转染HEC-1B细胞后,转染效率大于90%,ERαmRNA及蛋白的表达水平均明显下调(分别为72%,67%);(2)下调ERα基因表达后,肿瘤细胞的侵袭能力下降(P<0.05);在mRNA水平和蛋白水平均可检测到ERα-siRNA组细胞的MMP-2、MMP-9表达下降(P<0.05),TIMP-1、TIMP-2表达增加(P<0.05)。结论:使用ERα-siRNA能够有效地阻断ERα基因表达;子宫内膜癌细胞中,17β-雌二醇对MMPs/TIMPs具有调节作用,这种作用可通过ERα介导;ERα表达水平影响子宫内膜癌细胞的侵袭能力。
- 欧奇志张岩于丽祝诚廖秦平
- 关键词：子宫内膜肿瘤雌激素受体Α金属蛋白酶类组织抑制剂
