江苏省高校自然科学研究项目(06KJB320101)
- 作品数：5 被引量：19H指数：2
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- 胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1基因在儿童急性白血病中的表达及临床意义被引量：11
- 2010年
- 目的:探讨胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(insulin-like growth factor-binding protein related protein 1,IGFBP-rP1)基因在儿童急性白血病中的表达及临床意义。方法:应用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative-PCR,RFQ-PCR)法检测168例(次)急性白血病患儿骨髓细胞中IGFBP-rP1 mRNA的表达水平,并与同期30例非白血病患儿作对照。根据儿童急性白血病的预后因素,分析IGFBP-rP1 mRNA的表达与患者临床预后的关系。结果:初诊组急性白血病患儿的IGFBP-rP1 mRNA表达水平明显高于非白血病患儿(P<0.01)。初诊组急性髓细胞白血病(acute myelocytic leukemia,AML)患儿的IGFBP-rP1 mRNA表达水平高于急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)患儿(P=0.013)。完全缓解(complete remission,CR)组AML患儿的IGFBP-rP1 mRNA表达最低,接近非白血病患儿组;复发组AML患儿的IGFBP-rP1 mRNA表达水平再度上升,明显高于CR时的表达水平。而ALL患儿的IGFBP-rP1 mRNA表达水平在初诊组、CR组及复发组间的差异无统计学意义。结论:IGFBP-rP1基因可能参与儿童AML的发生和发展,并有望成为新的治疗靶点。
- 满孝蕊胡绍燕岑建农陈子兴何海龙李捷柴忆欢
- 关键词：白血病儿童
- WT1基因在急性白血病患儿中的表达及其临床意义被引量：4
- 2010年
- 目的探讨WT1基因在急性白血病患儿中的表达及其临床意义。方法采用实时定量RT-PCR方法检测198例急性白血病患儿（男124例,女74例;年龄1～13岁）WT1基因的表达水平。应用SPSS 13.0软件进行统计学分析。结果急性白血病患儿WT1基因的中位数为932.99,对照组儿童为38.50,病例组显著高于对照组;ALL患儿WT1基因的中位数为195.73,AML患儿WT1基因的中位数为6 297.75,ALL患儿与急性髓性白血病（AML）患儿之间存在统计学差异（P〈0.01）,且在AML患儿FAB分型中M3、M4表达水平相对较高（中位数分别为8 081.83和8 123.54）;WT1基因在急性白血病初诊组及复发组患儿中表达水平较高（WT1基因中位数分别为932.99和2 840.54）,而完全缓解组表达水平显著下降（WT1基因中位数为144.32）;可进行临床疗效评估的97例急性白血病患儿中,第1个疗程后完全缓解组与未缓解组初诊WT1基因表达水平差异有统计学意义,其中位数分别为311.98和3 768.43;对3例复发患儿进行WT1基因表达水平动态监测,发现复发前WT1的表达水平均有上升趋势。结论WT1基因在各类急性白血病患儿骨髓中呈高表达水平,动态监测WT1基因的表达可了解急性白血病的发展,为疾病的复发提供依据。WT1基因作为一个＂泛白血病＂标志,可用于微小残留病的检测。
- 王旭莉柴忆欢胡绍燕岑建农
- 关键词：WT1基因儿童
- IGFBP7基因表达下调对急性髓系白血病细胞的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白7（IGFBP7）基因表达下调对急性髓系白血病细胞系U937细胞增殖及侵袭能力的影响。方法利用肝癌细胞株SMMC7721细胞，筛选最有效的IGFBP7干扰序列，瞬时转染处于对数生长期U937细胞，用Westernblot法检测转染后U937细胞IGFBP7蛋白表达。观察转染IGFBP7基因干扰序列后U937细胞的增殖、黏附、穿膜和浸润能力。结果IGFBP7基因干扰序列转染24h后U937细胞增殖能力明显下降，明显低于对照1组（未转染siRNA组）和对照2组（阴性干扰序列组）（A值分别为0．580±0．159、1．049±0．274、0．946±0．195）（P〈0．01）。IGFBP7基因下调后的U937细胞黏附于人脐静脉内皮细胞系ECV304细胞的数量明显低于对照1组和对照2组（A值分别为0．247±0．031对0．406±0．023和0．395±0．011）（P〈0．01）；穿越ECV304细胞包裹的细胞培养小室到底层的细胞明显减少[（0．387±0．021）×10^5对（1．017±0．031）×10^5、（0．908±0．027）×10^5]；实验组黏附于Matrigel基质膜的细胞数明显低于对照组[（0．197±0．098）×10^5对（0．493±0．067）×10^5和（0．469±0．083）×10^5]，差异有统计学意义（P值均〈0．01）。结论IGFBP7基因通过影响U937细胞增殖以及与基质内皮细胞的黏附、穿膜、侵袭能力而参与急性髓系白血病的发生、发展过程。
- 满孝蕊胡绍燕吴水燕岑建农陈子兴
- 关键词：基因IGFBP7细胞系U937
- IGFBP7基因慢病毒载体的构建及在K562细胞中的表达被引量：2
- 2012年
- 本研究构建胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)基因的慢病毒载体,为研究该基因在白血病中的作用提供基础。采用限制性内切酶酶切获得目的基因,基因重组构建慢病毒载体质粒venus-IGFBP7,用293T细胞包装慢病毒颗粒,感染K562细胞,并采用多种方法鉴定。结果表明,所获IGFBP7基因经测序与GenBank比对序列一致,慢病毒载体质粒venus-IGFBP7经BamHⅠ酶切鉴定片段大小正确,荧光显微镜及流式细胞术检测到绿色荧光蛋白在293T及K562细胞中表达,RT-PCR和Western blot检测到IGFBP7 mRNA和蛋白在K562细胞表达。结论:成功构建带有IGFBP7基因的慢病毒载体,为研究IGFBP7基因在K562细胞中的作用奠定了基础。
- 吴水燕胡绍燕岑建农陈子兴
- 关键词：慢病毒载体293T细胞K562细胞
- 急性髓细胞白血病儿童Wilms瘤基因1及其剪接异构体的表达及临床意义
- 2011年
- 目的:探讨急性髓细胞白血病(acute myeloblastic leukemia,AML)患儿骨髓细胞中Wilms瘤基因1(Wilms tumor gene1,WT1)及其剪接异构体WT1(17AA+)的表达及临床意义。方法:应用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative-PCR,RFQ-PCR)检测112例次AML患儿不同阶段骨髓细胞中WT1和WT1(17AA+)mRNA的相对表达量,计算WT1(17AA+)/WT1的比值,并以同期30例非白血病患儿作为对照。结果:AML初诊组患儿的WT1和WT1(17AA+)mRNA相对表达量均明显高于非白血病对照组及缓解期患儿(P<0.05)。复发组患儿的WT1和WT1(17AA+)mRNA相对表达量与初诊组和耐药组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。缓解组患儿的WT1(17AA+)/WT1比值明显低于初诊组、复发组和耐药组(P<0.05)。3例AML患儿的动态监测结果显示,临床耐药或复发患儿的WT1和WT1(17AA+)mRNA相对表达量以及WT1(17AA+)/WT1比值均呈持续高表达,或者表现为一过性下降后的再度上升。结论:WT1及WT1(17AA+)mRNA剪接异构体可能成为判断AML预后及临床治疗疗效的指标。
- 王颖胡绍燕满孝蕊吴水燕岑建农李捷何海龙陈子兴
- 关键词：儿童实时荧光定量PCR
