国家自然科学基金(30672204)
- 作品数：6 被引量：14H指数：2
- 相关作者：胡火珍杨明理刘新宇张勇刚杨金亮更多>>
- 相关机构：四川大学四川大学华西医院遵义医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- Cyclin B1正、反义全长cDNA腺病毒载体的构建及对HeLa细胞增殖和凋亡的影响被引量：2
- 2009年
- 目的利用pAd/CMV/V5-DEST腺病毒载体系统构建含有人细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)正、反义全长cDNA的重组腺病毒,并研究其对人宫颈癌细胞株HeLa增殖及凋亡的影响。方法通过RT-PCR获取Cyclin B1全长cDNA,分别以正、反方向插入pENTR11,与pAd/CMV/V5-DEST进行同源重组后获得正确的重组腺病毒质粒,经293A细胞包装扩增获得重组病毒颗粒。重组腺病毒体外感染HeLa细胞,通过细胞计数和流式细胞术观测其对细胞增殖及凋亡的影响。结果Cyclin B1基因成功克隆到载体上,并经293A细胞包装出病毒颗粒。此重组腺病毒感染HeLa细胞后,反义Cyclin B1能明显抑制细胞的生长并且促进细胞凋亡。结论成功构建了携带人Cyclin B1正、反义全长cDNA的重组腺病毒载体,此载体可在HeLa细胞中发挥生物学作用。
- 李洁陈平胡火珍
- 关键词：细胞周期蛋白B1重组腺病毒基因治疗
- 人骨髓间充质干细胞对小鼠神经干细胞增殖与分化培养的影响被引量：1
- 2009年
- 通过在体外培养、鉴定人的骨髓间充质干细胞与小鼠神经干细胞,用骨髓间充质干细胞条件培养基分别在增殖与分化条件下对神经干细胞进行培养。发现,间充质干细胞条件培养基在增殖条件下能加快神经球内神经干细胞的迁移,使神经球解聚,对神经干细胞增殖没有影响;而间充质干细胞条件培养基在分化条件下,能增加神经干细胞向少突胶质细胞分化的能力,降低向星型胶质细胞的分化能力,对向神经元分化能力没有影响,间充质干细胞可能是通过促进神经干细胞迁移、分化而加快神经损伤的修复的。
- 陈玉吴秦洁李舍予张勇刚胡火珍
- 关键词：骨髓间充质干细胞神经干细胞神经损伤修复
- 成年大鼠急性脊髓全横断损伤后差异表达蛋白的蛋白组学研究被引量：3
- 2008年
- 为进一步阐明脊髓损伤(SCI)的修复机制,对SD成年大鼠进行急性全横断损伤,将损伤前后的大鼠脊髓总蛋白质进行固相pH梯度双向凝胶电泳(2D-PAGE),经考马斯亮蓝染色后,借助PDQuest软件从中找出差异表达蛋白质点.应用基质辅助激光解吸电离串联质谱对差异表达的蛋白质点进行鉴定,成功鉴定出38种蛋白质.其中表达上调的蛋白质有电压依赖的阴离子选择通道蛋白1、α-烯醇酶、硫氧还蛋白依赖的过氧化物还原酶3、生长因子受体结合蛋白2等,表达下调的蛋白质有谷氨酰胺合成酶、14-3-3 epsilon、磷脂酰乙醇胺结合蛋白1、血红蛋白-β1等.鉴定出的差异蛋白多数涉及到神经细胞的增殖、凋亡、应激反应等过程.
- 谢玲林胡火珍杨明理刘新宇
- 关键词：急性脊髓损伤差异表达蛋白质
- 脊髓全横断损伤后差异表达蛋白的蛋白质组学分析被引量：8
- 2007年
- 对脊髓全横断损伤前后的大鼠脊髓全蛋白质进行双向凝胶电泳,借助PDQuest软件从中找出差异表达蛋白质点.应用基质辅助激光解吸电离串联质谱,对差异表达的蛋白质点进行鉴定,成功鉴定出18种蛋白质.脊髓损伤3d后表达上调的蛋白质有巨噬细胞游走抑制因子、S期激酶相关蛋白1、热休克蛋白27、多配体蛋白聚糖3、T细胞受体β链可变区、膜联蛋白Ⅲ、腺苷酸激酶1、半乳凝素3、丙酮酸脱氢酶、磷脂酶B、嗜铬粒蛋白A、热休克蛋白70凝结蛋白1;同时表达下调的蛋白质有磷酸丙糖异构酶、神经鞘氨醇磷酸化受体、热休克蛋白10、肽酰-脯氨酰-顺反式异构酶A.多数差异蛋白质涉及到神经细胞的增殖、凋亡、应激反应等过程,为进一步阐明中枢神经系统的损伤和修复机制提供了理论依据.
- 杨明理刘新宇杨金亮王黎明张勇刚胡火珍
- 关键词：差异表达蛋白质双向电泳蛋白质组学
- HCC细胞膜相关蛋白的快速鉴定
- 2009年
- 为快捷、特异地鉴定HCC(hepatocellular carcinoma,人肝细胞癌)细胞的膜相关蛋白,用DOC(脱氧胆酸钠)对贴壁培养的HCC细胞系HepG2进行处理,使细胞皱缩并脱离培养面,收集未脱离的HepG2膜相关蛋白,经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,最后应用ESIQUAD-TOF MS(electrospray ionization quadrupole time-of-flight mass spectrometry),成功鉴定出包括热休克蛋白90α、玻璃体粘连蛋白前体、层粘连蛋白α5亚单位前体、胶原蛋白前体、鳞状细胞癌T细胞识别抗原-3等35个蛋白质,其中膜相关蛋白18个,所占比例超过50%。
- 王玮杨金亮杨明理李洁刘康胡火珍
- 关键词：人肝细胞癌质谱
- 移动抑制因子和嗜铬粒蛋白A在脊髓损伤中的表达变化被引量：1
- 2009年
- 为研究移动抑制因子和嗜铬粒蛋白A(chromogranin A,CgA)在脊髓损伤过程中的表达变化及其参与急性脊髓损伤修复的作用机制,建立了完全脊髓横断实验模型.采用双向凝胶电泳和基质辅助激光解吸电离串联质谱对脊髓损伤的动物组织样品进行分析,鉴定出20种差异表达蛋白质,其中有巨噬细胞游动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)和CgA等.通过RT-PCR和Western印迹分析,移动抑制因子和CgA在损伤的脊髓组织中表达量发生变化,提示这两种蛋白可能均参与了脊髓损伤过程,但在脊髓损伤中的具体作用机制还有待于进一步的研究.
- 马天太谢玲林杨明理胡火珍
- 关键词：移动抑制因子嗜铬粒蛋白A脊髓损伤双向凝胶电泳
