国家科技重大专项(2009ZX08007-006B)
- 作品数：25 被引量：47H指数：4
- 相关作者：王洪梅何洪彬仲跻峰高运东刘晓更多>>
- 相关机构：山东省农业科学院东北农业大学山东师范大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项山东省自然科学基金山东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 轮状病毒疫苗的研究进展被引量：3
- 2011年
- 轮状病毒(RV)是引起全球婴幼儿腹泻的主要病源之一,它不仅在发展中国家流行,也在发达国家流行。有研究表明改变卫生条件并不能有效制止轮状病毒的传播。疫苗接种是唯一可行的预防控制轮状病毒较高发病率和死亡率的方法,因此轮状病毒疫苗的研发具有非常重要的现实意义。论文针对近几年来研发的轮状病毒疫苗作一综述。
- 宋玲玲王延东王洪梅武建明刘晓高运东仲跻峰何洪彬
- 关键词：轮状病毒疫苗腹泻
- 奶牛金黄色葡萄球菌乳腺炎及其疫苗的研究进展被引量：2
- 2011年
- 金黄色葡萄球菌是奶牛乳腺炎的重要致病菌,笔者对奶牛乳腺炎、金黄色葡萄球菌及其致病机理、金黄色葡萄球菌乳腺炎疫苗的研究等进行了综述,并对新型疫苗的研究进行了展望。
- 孙涛武泽轩王玲玲王洪梅杨宏军何洪彬
- 关键词：奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌疫苗
- 牛整合素β5亚基基因的构建与原核表达
- 2011年
- [目的]构建牛整合素β5亚基(ITGB5)基因,并进行原核表达。[方法]扩增目的基因,将其重组到pET-32a(+)质粒中,将经鉴定为阳性的重组克隆,转化大肠杆菌感受态细胞表达蛋白后纯化。[结果]从牛甲状腺、扁桃体扩增到目的基因ITGB5;ITGB5基因表达产物的SDS-PAGE结果显示,在88 KD处出现表达产物及纯化后的蛋白;W estern-blot分析表明,抗血清可与原核表达的蛋白特异性结合。[结论]表达、并纯化了ITGB5蛋白。
- 陈旭王洪梅武建明刘晓王立群何洪彬
- 关键词：基因
- 口蹄疫诊断技术研究进展被引量：6
- 2011年
- 口蹄疫是偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病,可使世界范围内的畜牧业遭受严重的经济损失,及时准确的诊断是防制口蹄疫的重要环节。诊断口蹄疫的方法可分为临床诊断、生物学实验、血清学诊断、分子生物学检测技术及环介导等五类技术,每类技术中又包括数个具体技术。论文对其优缺点进行比较,并对口蹄疫诊断技术研究进行了展望。
- 武刚王洪梅刘晓宋玲玲陈莉莉仲跻峰何洪彬
- 关键词：口蹄疫
- 轮状病毒VP7基因与LTB基因融合表达及其免疫原性
- 2010年
- 根据GenBank已发表的牛轮状病毒VP7基因核苷酸序列(DQ195152),成功克隆了牛轮状病毒野毒株CHLY VP7基因的3个主要抗原簇并在大肠杆菌中进行了高效表达,然后与LTB(大肠杆菌不耐热性肠毒素)基因融合后再一次成功表达,表达产物经镍离子螯合次氨基三乙酸(Ni-NTA)亲和层析纯化,得到了高纯度的目的蛋白。动物试验表明,该抗原蛋白可在小鼠体内诱导产生一定水平的抗体。
- 王延东杨少华高运东王洪梅郭学军刘晓杨宏军胡国良仲跻峰何洪彬
- 关键词：牛轮状病毒VP7
- 小RNA病毒与细胞凋亡
- 2010年
- 在小RNA病毒科中,口蹄疫病毒等不同病毒的不同基因可诱导宿主细胞发生凋亡,其作用机制也不完全相同。论文对小RNA病毒诱导细胞凋亡的机制进行了综述,并对相关研究进行了展望。
- 代文君王洪梅杨少华宋玲玲高运东杨宏军王立群仲跻峰何洪彬
- 关键词：细胞凋亡小RNA病毒
- 口蹄疫病毒VP1基因重组慢病毒载体的构建及VP1基因稳定表达细胞系的建立
- 2010年
- 【目的】构建口蹄疫病毒VP1基因重组慢病毒载体FG9-VP1,并建立稳定表达VP1基因的BHK-21细胞系。【方法】采用RT-PCR技术从口蹄疫病毒材料中扩增出VP1基因,并将其连入慢病毒载体FG9中,经PCR、酶切和测序鉴定正确后,转染BHK-21细胞,96h后经流式细胞分选筛选GFP阳性细胞,细胞增殖后经WB检测VP1基因的表达。【结果】VP1基因重组慢病毒载体FG9-VP1测序正确,转染BHK-21细胞经流式细胞仪筛选的GFP阳性细胞后可稳定表达VP1基因。【结论】VP1基因重组慢病毒载体构建成功并获得了稳定表达VP1基因的BHK-21细胞系。
- 代文君王洪梅刘晓高运东于力王立群仲跻峰何洪彬
- 关键词：口蹄疫病毒VP1稳定细胞系
- 动物转基因研究进展被引量：1
- 2011年
- 动物转基因技术是一项新的生物学技术,可应用于畜牧业及生物医学等领域。对转基因动物的制作方法及应用进行了综述,对其发展趋势进行展望,以促进动物转基因研究的开展。
- 杨慧婷王洪梅孙涛高运东仲跻峰何洪彬
- 关键词：转基因动物畜牧业生物医学
- Asia1型口蹄疫病毒P1基因的原核表达及其抗血清的制备
- 2011年
- [目的]研究Asial型口蹄疫病毒P1基因原核表达及其抗血清的制备。[方法]利用基因克隆技术获得Asia1型口蹄疫病毒(FM-DV)的P1基因,然后将P1基因重组到pET-32a(+)质粒中;转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导及蛋白纯化后,进行SDS-PAGE分析;将重组菌BL21培养物用超声波裂解,对该融合蛋白进行分离纯化后免疫新西兰兔,制备P1蛋白抗血清。[结果]获得了重组性阳性克隆;SDS-PAGE结果表明在105 kD处出现了目的条带;Western-blot分析表明,抗血清可与原核表达的P1蛋白特异性结合,ELISA方法检测抗血清的效价可达到1∶5 120,[结论]为建立FMDV的血清学诊断方法及其基因工程疫苗的研究奠定了基础。
- 武刚王洪梅刘晓王立群于力仲跻峰何洪彬
- 关键词：P1基因原核表达抗血清
- 牛轮状病毒结构蛋白VP4基因的真核表达
- 2012年
- [目的]克隆获得牛轮状病毒VP4全基因,并进行真核表达。[方法]采用RT-PCR技术,从牛轮状病毒总RNA中扩增出VP4基因,将其重组到含有Flag标签的pcDNA3.1(+)载体中,经PCR、酶切和测序鉴定正确后,通过Lipofect2000TM转染293T细胞,细胞增殖后经RT-PCR和Western Blot检测VP4基因的表达。[结果]获得了VP4基因的阳性重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-VP4;转染293T细胞后经RT-PCR和Western Blot检测表明,该基因的重组表达载体构建正确,可在293T细胞内瞬时表达。[结论]VP4基因的重组真核表达载体构建成功并可在真核表达细胞内表达,该研究为VP4基因的DNA疫苗的研发及应用奠定了基础。
- 王丹宋玲玲王洪梅杨宏军王立群何洪彬
- 关键词：牛轮状病毒VP4基因克隆真核表达
