国家自然科学基金(30972460)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- 相关机构：上海交通大学上海交通大学医学院附属仁济医院第二军医大学更多>>
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- 沉默HerpUD1基因表达提高人肝L-02细胞对放射处理的敏感性
- 2013年
- 目的:利用RNA干扰技术沉默人肝L-02细胞内可诱导的同型半胱氨酸内质网应激泛素样结构域1(homocysteine-inducible,endoplasmic reticulum stress-inducible,ubiquitin-like domain member 1,HerpUD1)基因表达,探讨其对人肝L-02细胞的辐射增敏作用。方法:根据HerpUD1基因序列设计shRNA片段,构建靶向HerpUD1基因的shRNA表达载体,稳定转染L-02细胞,采用real-time PCR和Western blotting检测转染后细胞中HerpUD1 mRNA及蛋白的表达。以8 Gy X射线照射转染后细胞,Hoechst荧光染色观察细胞的凋亡情况。结果:成功构建靶向HerpUD1的真核表达干扰载体,并建立稳定转染shHerpUD1的L-02细胞株。在稳定转染的L-02细胞中,shHerpUD1-1420干扰片段干扰效果最好,与pGPU6-NC组(阴性对照组)相比,shHerpUD1-1420组HerpUD1 mRNA表达显著下降[(0.15±0.05)vs(1.00±0.08),P<0.05],其蛋白水平的表达也显著降低[(0.19±0.01)vs(1.62±0.08),P<0.01]。转染后细胞经8 Gy X射线照射后24 h,L-02-shHerpUD1-1420组细胞凋亡率显著高于L-02-NC组(阴性对照组)[(10.23±3.37)%vs(6.89±1.49)%,P<0.01],而L-02-NC组与L-02-Neo组相比则无显著差异(P>0.05)。结论:HerpUD1基因表达沉默显著增加X射线辐射引起的L-02细胞凋亡,具有辐射增敏作用。
- 张乃宁杨彦勇马莉张情宋立华
- 关键词：RNA干扰增敏作用
- Genistein对受辐射L-02人肝细胞增殖和DNA损伤的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨金雀异黄素(genistein,GEN)对L-02人肝细胞DNA辐射损伤的防护作用。方法 (1)L-02细胞经不同浓度(1、5、10、20μmol/L)GEN预处理24 h后,接受不同剂量(6、8、12、16、20 Gy)X线照射,利用MTT法检测细胞增殖情况。(2)L-02细胞经不同浓度GEN预处理后接受8 Gy(300 cGy/min)X线照射,利用单细胞凝胶电泳检测照射后不同时间(24、48、72 h)细胞DNA损伤情况。另设正常对照(N)、单纯GEN处理(G)及单纯照射(R)组作为参照。结果 (1)当照射剂量为6、8及12 Gy时,5μmol/L GEN预处理组细胞增殖率显著高于R组(P<0.05),而照射剂量为16 Gy和20 Gy时,各浓度GEN预处理组细胞增殖率与R组相比未见明显升高。(2)DNA损伤检测结果显示,N组和不接受照射的各浓度G组细胞均未见彗星拖尾。经8 Gy X线照射后24 h,R组及各浓度GEN预处理组彗星出现率均小于1%,各组间彗星尾长差异无统计学意义;照后48 h,R组彗星出现率达(24.2±1.2)%,彗星尾长达(283.6±22.3)μm,而各浓度GEN预处理组的彗星出现率和彗星尾长均较R组明显降低(P<0.05);照后72 h,R组彗星出现率较48 h明显下降(P<0.05)、彗星尾长明显缩短(P<0.05),1、5μmol/L GEN预处理组彗星出现率和彗星尾长仍明显低于R组(P<0.05),但10、20μmol/L GEN预处理组彗星出现率则明显升高(P<0.05),彗星尾长明显增长(P<0.05)。结论低浓度(1、5μmol/L)GEN能有效减轻较低剂量(8Gy)照射对L-02人肝细胞的DNA辐射损伤。
- 类春燕沈秀华张乃宁丛峰松马俐君宋立华
- 关键词：金雀异黄素X线DNA损伤
- 利用油料籽粕酶法制备多肽工艺及其抗氧化活性研究进展被引量：2
- 2016年
- 油料籽粕经过酶水解可制备具有生物活性的多肽,其中部分多肽具有抗氧化活性。籽粕原料来源及水解工艺不同,活性肽的抗氧化活性也有所差别。本篇综述介绍目前国内外利用花生、大豆和油菜籽等主要油料籽粕原料酶解制备抗氧化活性肽的工艺方法及其抗氧化活性。
- 唐天悦周海玥姜婧宋立华
- 关键词：酶解工艺生物活性肽抗氧化活性
