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国家高技术研究发展计划(2006AA0903002007AA09Z400)
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韩跃
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海洋真菌多糖间接竞争ELISA检测方法的建立及方法学评价
2008年
目的建立酶联免疫吸附法(ELISA)以检测海洋真菌多糖YS4108发酵过程中抗肿瘤多糖(YCP)的含量。方法以CDAP(1-氰基-4-二甲胺吡啶四氟硼酸盐)为交联剂制备YCP-BSA偶联产物,利用该偶联产物为包被抗原,YCP为竞争抗原,两者与定量的YCP-McAb反应,建立检测YCP的间接竞争ELISA测定法。结果最佳抗原包被浓度为2.5mg/L,最佳单抗工作浓度为1:5000,HRP-抗小鼠IgG工作浓度为1:4000。得到回归方程lg(B/B0%)=-0.1718lgCYCP+1.9638,r=0.9916,可测量最适范围为1~1000μg/L,最小检测量为0.1μg/L,批内和批间RSD分别小于5.45%和8.37%。结论建立了快速测定YCP含量的间接竞争ELISA法。
韩跃
谭仁祥
宋勇春
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酶联免疫吸附测定
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