转基因生物新品种培育专项(2014ZX08001-002)
- 作品数:3 被引量:12H指数:2
- 相关作者:余宁赵春德程式华张迎信曹立勇更多>>
- 相关机构:中国水稻研究所中国科学院遗传与发育生物学研究所河北农业大学更多>>
- 发文基金:转基因生物新品种培育专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 水稻叶片衰老分子机制研究进展被引量:5
- 2015年
- 水稻的衰老对产量和品质影响很大,有关衰老机理的研究,有助于我们研究延缓水稻衰老的具体技术,对选育高产水稻品种具有重要的指导意义。各国科学家经过多年的努力,在水稻叶片衰老分子机制的研究中取得了一些初步的进展。本文对近年来前人在水稻叶片衰老相关突变体及基因克隆等方面的成果进行综述,探讨了水稻叶片衰老的分子调控机制,以期为水稻高产育种提供相应的参考。
- 赵春德张迎信刘群恩余宁朱爱科程式华曹立勇
- 关键词:水稻叶片衰老分子机制
- 水稻转基因系CX8621中Xa21的整合和表达被引量:1
- 2016年
- 农杆菌介导的转基因技术在植物中已被广泛应用,而目的基因能否发挥功能受到多种因素的影响。前期,通过农杆菌介导的转化,实验室创制了无选择标记、无载体骨架残留的水稻转Xa21基因系CX8621。截止目前,CX8621已稳定遗传16代,依然保持着对水稻白叶枯病的优良抗性。在此基础上,本研究对外源基因Xa21在CX8621中的整合和表达情况进行了分析。首先,通过在转化载体p BXa21的左右边界与Xa21基因序列设计嵌套引物,确定Xa21被完整地整合到CX8621中。随后,利用改良的Tail-PCR方法体外克隆了整合位点的边界序列,明确了Xa21被整合在CX8621的2号染色体上。然后,通过RT-PCR分析了Xa21在CX8621中不同时期和不同组织的表达情况,结果表明Xa21在CX8621中能稳定表达,其表达量的变化与之前报道的抗病性反应吻合。此外,还制备了天然XA21蛋白的抗体,对CX8621不同时期、不同组织中XA21蛋白的表达量进行了检测,结果发现在种子中检测不到XA21蛋白。由此,通过对外源基因Xa21的整合和表达分析,为CX8621的转基因生物安全评价提供了部分科学依据。
- 高利芬刘鹏程夏志辉赵纪莹史佳楠江光怀刘国振翟文学
- 关键词:转基因水稻XA21抗白叶枯病
- 一个水稻早衰突变体基因的精细定位被引量:6
- 2014年
- 【目的】对水稻叶片早衰突变体W330进行遗传分析及精细定位,获得控制突变表型的基因。【方法】用60Co-γ辐射诱变籼型水稻恢复系中恢8015,从突变体库获得一份叶片早衰突变体W330。对该突变体进行表型观察和主要农艺性状调查。利用多代自交稳定的突变体W330与粳稻品种02428杂交,观察F1和F2的表型,并统计F2群体中早衰突变表型与正常野生型的分离情况,分析该突变表型的遗传行为。利用构建的F2群体进行精细定位和候选基因分析,然后对候选基因进行DNA测序、酶切分析、表达分析、酶活测定及进化分析。【结果】突变体W330从三叶期开始出现叶片衰老,直至抽穗期及黄熟期。与野生型相比,突变体W330株高变矮、分蘖减少、叶片变窄、抽穗期不变、每株有效穗数、每穗着粒数和结实率亦显著降低。W330与02418杂交的F1表现正常,F2群体中正常植株与早衰突变植株的分离比符合3﹕1,表明突变体W330的突变性状受1对隐性核基因控制。利用F2定位群体及SSR、Indel标记,最终将目标基因定位在第3染色体短臂上2个分子标记CD-5与CD-7之间,物理距离约为21.5 kb。基因预测表明该区域共有4个完整的ORFs。其中,LOC_Os03g0131200编码一个过氧化氢酶OsCATC,基因组序列分析表明,W330突变体中的该基因从ATG开始第109位,在第一个内含子的末位发生了一个C到G的颠换,造成第一个内含子没有剪切,最终导致翻译提前终止,酶切试验验证了这一突变位点。与野生型亲本中恢8015相比,W330突变体在三叶期叶片中的过氧化氢酶的活力下降了47.8%,而过氧化氢含量上升了2.7倍。由此,推定W330与OsCATC等位。系统进化分析发现,OsCATC与水稻中同源的过氧化氢酶不在同一进化分支上。实时荧光定量PCR发现,与其野生型相比,突变体W330叶片中的OsCATA和OsCATB的表达量显著上升,而OsCATC的表达量没有明显的变化。推测,�
- 赵春德张迎信刘群恩余宁程式华曹立勇
- 关键词:水稻早衰