国家自然科学基金(30972407)
- 作品数：9 被引量：65H指数：5
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- 相关机构：南京林业大学教育部广西大学更多>>
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- 麝香百合及东方百合品种核型分析被引量：8
- 2013年
- 以麝香百合‘白狐狸’(‘White Fox’)和‘雷山’(‘Lei Shan’)、东方百合‘水晶布兰卡’(‘Crystal Blanca’)和‘康斯坦撒’(‘Constansa’)的试管苗根尖为研究材料,用环己酰亚胺预处理,然后卡诺氏固定液固定,纤维素酶和果胶酶解离后采用涂片法制片,对4种观赏百合进行核型分析。结果表明,‘白狐狸’核型为3A,‘雷山’、‘水晶布兰卡’和‘康斯坦撒’的核型均为3B。核型公式分别为:‘白狐狸’2n=2x=24=4m+4st(2SAT)+16t,‘雷山’2n=2x=24=2m+2sm+10st(2SAT)+10t,‘水晶布兰卡’2n=2x=24=4m+10st+10t,‘康斯坦撒’2n=2x=24=4m(1SAT)+10st+10t。‘白狐狸’、‘雷山’、‘水晶布兰卡’及‘康斯坦撒’的核不对称系数分别为83.11%、82.78%、79.75%、81.22%。
- 房磊姜珊席梦利施季森傅伟杨斌
- 关键词：麝香百合东方百合核型分析
- 东方百合SRAP体系优化及引物筛选被引量：24
- 2013年
- 以东方百合商品种‘索蚌’(‘Sorbonne’)和‘康斯坦撒’(‘Constantsa’)及其F1代杂交群体为实验材料,从100对SRAP引物中筛选出59对扩增产物丰富、具有较高多态性的引物,同时对PCR反应体系进行了优化。采用正交设计,对Mg2+、dNTPs、Taq聚合酶及引物浓度进行4因素4水平优化,并在此基础上对Mg2+、引物浓度和退火温度进行了单因素优化。结果表明,东方百合SRAP的最佳体系为:1×Buffer,Mg2+浓度2.7 mmol/L,dNTPs浓度0.25 mmol/L,引物浓度0.8μmol/L,Taq聚合酶1.5μmol/min,模板DNA 60～100 ng。SRAP两步反应最佳退火温度为第1步35℃,第2步退火59.3℃。最后用‘索蚌’、‘康斯坦撒’和部分F1植株对优化体系进行稳定性检测,发现所筛选出的59对引物在优化的体系下均有稳定的扩增产物。
- 邱帅丁信誉席梦利施季森
- 关键词：东方百合引物筛选
- 东方百合ISSR-PCR反应体系的正交优化被引量：9
- 2012年
- 以东方百合‘Constanta’和‘Sorbonne’以及9份‘Constanta’בSorbonne’的F1代为试材,采用改良的CTAB法提取百合嫩叶DNA,利用正交设计L16(45)对东方百合ISSR-PCR反应体系的Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs和引物5种因素在4个水平上进行优化试验,采用直观分析结合方差分析评价扩增结果。最终获得的最佳反应体系为:在20μL反应体系中,含Taq DNA聚合酶0.5μmol/min、Mg2+1.75 mmol/mL、模板DNA 40～100 ng、dNTPs 0.15 mmol/mL、引物0.6μmol/L、10×PCR Buffer 2μL,不足部分以ddH2O补足。在获得最佳反应体系的基础上采用单因素实验确定了引物最佳退火温度范围为55～45℃,最佳循环次数为30次以及延伸时间为1.5 min。应用该优化的反应体系,对‘Constanta’和‘Sorbonne’以及9份‘Constanta’בSor-bonne’的F1代DNA进行ISSR-PCR扩增,结果显示优化的反应体系具有较高的扩增稳定性。
- 丁信誉邱帅席梦利施季森
- 关键词：东方百合ISSR-PCR正交设计
- 亚洲百合杂交新品种‘雨荷’被引量：4
- 2012年
- ‘雨荷’是以二倍体亚洲百合‘金角’（Golden Horn）为母本,四倍体亚洲百合‘布鲁内罗’（Brunello）为父本,杂交选育而成的三倍体新品种。花橙红色,有少量紫褐色斑点,花瓣肥厚。花丝和花柱橙色,花粉黑褐色。株高75－80cm,花径14－15cm。生长强健,抗逆性强,适宜中国华东地区栽培。
- 席梦利吴祝华傅伟祁福娟张睿婧施季森
- 关键词：百合
- 百合花发育相关基因LLGLO1的RNAi载体构建被引量：4
- 2010年
- 百合花发育相关基因的研究是开展花卉分子育种的重要基础。以麝香百合(Lilium longi-florumThumb.)未开放的花蕾为材料提取总RNA。根据LLGLO1序列的同源比对选取特异区段,设计引物扩增区段cDNA并引入酶切位点。将PCR扩增片断连接到T载体上,经酶切及PCR验证后进行测序。测序结果表明:用于RNAi的cDNA片断与LLGLO1序列完全相同。通过中间载体pSK+intron引入一段内含子间隔区,RNA干扰片断经过多次的酶切和连接过程最终连入表达载体pCAMBIA1301中形成ihpRNA结构。PCR及双酶切鉴定结果显示,构建的RNA干扰载体的ihpRNA结构完整。
- 席梦利刘坡吴小萍施季森
- 关键词：百合RNAI载体
- 百合新品种‘初夏’被引量：5
- 2012年
- ‘初夏’百合是以亚洲百合杂种系黄色花品种‘金角’（Golden Horn）为母本,以亚洲百合杂种系橙色花品种‘布鲁内诺’（Brunello）为父本,杂交选育而成。切花生产日数短,丰花。株高65-70cm,花径16-17cm。花橙色,无斑点,花丝和花柱橙色,花粉黑褐色。三倍体,生长强健,抗逆性强,适宜中国华东地区栽培。
- 席梦利吴祝华傅伟祁福娟张睿婧施季森
- 关键词：百合
- 百合花发育基因LLTCP1在花蕾发育过程中的时空表达
- 为了获得百合花发育相关基因LLTCP1在调控百合花发育过程中的重要信息,本研究以麝香百合未开放的花蕾和幼嫩茎段为试验材料,以LLTCP1基因的全长序列为探针,应用RNA原位杂交技术,对LLTCP1基因在百合花发育各个阶段...
- 席梦利潘梅徐进施季森
- 关键词：麝香百合花蕾原位杂交
- 文献传递
- 麝香百合花发育基因LLGLO1在花蕾中的时空表达被引量：2
- 2012年
- 为了获得百合花发育相关的B功能基因LLGLO1在调控百合花发育过程中的重要信息,以麝香百合(Lilium longiflorum)未开放的花蕾为试材,以LLGLO1基因的特异片段为探针,应用RNA原位杂交技术,对LLGLO1基因在花发育各个阶段的时空表达动态进行了研究。结果表明,LLGLO1基因在外轮花被、内轮花被、雄蕊和心皮等4轮花器官中均有表达,但表达强度随不同的发育阶段而变化。长度2.0和3.0cm的花蕾中LLGLO1基因的表达量明显高于0.5和1.0cm的花蕾,说明随着花器官的发育成熟,该基因在各轮花器官中的表达量逐渐增加。
- 席梦利潘梅施季森徐进
- 关键词：百合麝香百合花蕾花发育原位杂交
- 麝香百合花蕾组织原位杂交体系的建立被引量：5
- 2011年
- 本研究以麝香百合未开放的花蕾为实验材料,以百合花发育相关的B功能基因LLGLO1的特异片段为探针,研究了花蕾切离时间对RNA结构完整性的影响,探讨了蛋白酶K消化浓度及时间对材料内蛋白质消化及材料结构完整性的影响。研究结果表明:花蕾离体1.5 h内RNA仍然保存完整,花蕾离体2 h RNA开始降解,因此,花蕾取材后应在1.5 h之内完成固定。10μg/mL的蛋白酶K在37℃孵育30 min可消化百合花蕾切片中的大部分蛋白质且材料结构完整。原位杂交结果显示LLGLO1基因在四轮花器官中均有表达。
- 席梦利潘梅施季森
- 关键词：麝香百合花蕾原位杂交
- 百合远缘杂交及其杂种鉴别研究被引量：10
- 2012年
- 百合种间远缘杂交的不亲和性和杂交后代鉴别,影响着百合杂交育种效率。以东方百合杂交品种‘康斯坦萨’(Lilium var.‘Constanta’)为母本,我国的特有野生百合岷江百合(Lilium re-gale Wilson)为父本,采用直接授粉法、切柱法、切柱加柱头液法3种方法在温室栽培条件下进行授粉实验;子房发育至20 d以后,采集不同处理的子房经过表面灭菌处理,横切为0.3 cm的子房薄片,接种于MS+6-BA(0.01 mg/L)+NAA(0.1 mg/L)的培养基上进行胚拯救培养;用SRAP分子标记对拯救获得的再生植株进行杂种鉴定。结果表明:3种不同授粉方法中,采用直接授粉法子房生长情况最好,切柱加柱头液法次之,切柱法最差。通过胚拯救培养获得一批杂种后代株系。分子检测结果显示,后代中7个株系均具有典型的父本及母本条带。因此可以认为,‘康斯坦萨’和岷江百合远缘杂交的障碍为受精后障碍,通过子房切片胚拯救培养获得的7个株系均为杂种。
- 张睿婧姜珊席梦利施季森黄寿先吴祝华
- 关键词：岷江百合远缘杂交杂种鉴定
