国家杰出青年科学基金(39825124)
- 作品数：8 被引量：38H指数：3
- 相关作者：罗慧玲曾益新刘然义彭吉林蔡体育更多>>
- 相关机构：中山大学郧阳医学院中山医科大学更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金广东省医学科学技术研究基金国家教育部“211”工程更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- E1B缺陷溶瘤腺病毒dl1520体外对鼻咽癌细胞的杀伤作用被引量：1
- 2005年
- 目的探讨E1B55KDa缺陷腺病毒dl1520体外对鼻咽癌细胞的杀伤作用。方法dl1520感染不同鼻咽癌株后测定病毒增殖;观察细胞病变效应;MTT法测定细胞生长抑制作用。结果dl1520在鼻咽癌细胞中可复制增殖并有致细胞病变效应,MTT法测定感染复数为0.032、0.16、0.8、4、20、100时CNE2细胞生长抑制率分别为2.78%、7.41%、10.19%、24.07%、45.37%、67.59%。结论dl1520体外可在鼻咽癌细胞中复制并裂解杀伤肿瘤细胞。
- 彭吉林罗慧玲刘然义
- 关键词：鼻咽癌细胞杀伤作用溶瘤腺病毒体外细胞生长抑制率CNE2
- E1B缺陷腺病毒对鼻咽癌CNE-2细胞杀伤作用及其机理研究被引量：2
- 2002年
- 目的 :研究E1B缺陷腺病毒dl15 2 0对鼻咽癌CNE 2细胞的杀伤作用及其作用机理。方法 :用MTT法和细胞病变试验 (CPE)测量dl15 2 0在体外对CNE 2细胞的抑制和杀伤作用 ,并通过测定病毒在CNE 2细胞中的复制产量和DAPI染色试验探讨其杀伤机理 ;瘤内注射dl15 2 0 ,观察其对CNE 2裸鼠移植瘤的治疗效果 ,用免疫织化方法检测肿瘤组织中病毒的复制。结果 :体外实验结果显示 :dl15 2 0能在CNE 2细胞中复制 ,导致明显的细胞病变 ,显著抑制CNE 2细胞的生长 ,在病变细胞中可见明显的核膨胀 ;瘤内注射dl15 2 0能明显抑制裸鼠移植瘤的生长 ,在肿瘤组织中可检测到病毒复制。结论 :dl15 2 0能在CNE 2细胞中复制并使之裂解 ,从而在体内外有效地抑制和杀伤CNE 2细胞。
- 刘然义罗慧玲彭吉林蔡体育张昌卿潘伟光吴沛宏黄文林曾益新
- 关键词：鼻咽癌CNE-2细胞杀伤作用基因治疗
- 一种用流式细胞术检测基因转移效率的新方法被引量：12
- 2002年
- 背景与目的:基因转移效率一直以来都是用表达报告基因的细胞(显色或发荧光)占细胞总数的百分比(即转染率)来表示,此百分比是由研究者借助显微镜(或荧光显微镜)计数得出来的。该方法(本文称为人工计数法)存在客观性、准确性不够和工作量大、且不能同时检测基因表达效率等问题。本研究拟寻找一种客观、准确、简便地检测基因转移和表达效率的新方法。方法:以绿色荧光蛋白(GFP)基因为目的基因、重组腺病毒(AdCMV/GFP)为基因载体,用人工计数法测定其对肝癌细胞株HepG2的转染率;用流式细胞术(flowcytometry,FCM)测定其对肝癌细胞株HepG2、Bel7402、Hep3B、SMMC7721和鼻咽癌细胞株CNE-2的转染效率和GFP(绿色荧光蛋白)基因的表达效率(以荧光指数表示)。结果:以FCM测得AdCMV/GFP对HepG2的转染率与载体量呈对数相关(与人工法相似,但前者略高),荧光指数与载体量呈线性相关(r=0.9984),其它细胞株的结果与HepG2相似。结论:采用FCM法测定基因转移效率克服了主观因素的影响,测定结果客观准确,可以用于测定基因载体对真核细胞的转染效率,或研究转录调控元件的功能。
- 刘然义罗慧玲冯海林彭吉林蔡体育黄文林曾益新
- 关键词：腺病毒载体流式细胞术绿色荧光蛋白人工计数
- E1B缺陷腺病毒dl1520联合化疗药物DDP体外对鼻咽癌细胞杀伤及诱导凋亡作用被引量：2
- 2004年
- 目的探讨E1B-55KDa缺陷腺病毒dl1520与DDP联合体外对鼻咽癌细胞的杀伤及诱导凋亡作用。方法采用MTT法体外测定细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果MOI(感染复数)=0.032、0.16、0.8、4、20、100时dl1520对CNE-2细胞的生长抑制率分别为2.78%、7.41%、10.19%、24.07%、45.37%、67.59%,而dl1520+DDP的抑制率分别为29.63%、32.41%、40.74%、52.78%、66.67%、74.07%,P<0.01;1.5μg/mlDDP24h诱导CNE-2细胞凋亡的比例为1.7%,dl1520在MOI=0.1、1、10、100时诱导的凋亡比例分别为1.2%、1.3%、14.1%、2.7%,而当dl1520与DDP联合后诱导的凋亡比例分别为1.8%、3%、18%、3.2%。结论dl1520与DDP联合可显著增强DDP对CNE-2细胞的杀伤及诱导细胞凋亡作用。
- 彭吉林罗慧玲刘然义曾益新
- 关键词：DDP鼻咽癌细胞毒作用
- 介入导向下Ad-p53基因治疗晚期恶性肿瘤的临床安全性初步观察被引量：12
- 2001年
- 目的：观察介入导向下经动脉导管系统灌注p53重组腺病毒（Ａd-p53)进行恶性肿瘤基因治疗的安全性。方法：选择经放化疗无效或复发及因故不能进行常规治疗的中晚期肿瘤患者１５例，经瘤组织主要供血动脉进行１.5×10^10-2.8±10^11pfu/次、累积剂量为９.5×10^10-1.40×10^12pfu/例的Ａd-p53基因治疗（其中５例宫颈癌病人联合化疗并观察出现的副作用。结果：临床观察发现以发热、流感样症状为主的５种不良反应，其中发热８例，流感样症状２例，胃不适、腹泻及心动过速 各１例；血常规检查发现白细胞和血小板减少各１例，血红蛋白减少２例；肝肾功能检查发现转氨酶ＣＧＴ、ＡＳＴ升高２例；治疗前后未见心电图改变（只有１例在化疗开始当天出现心动过速，第２天又恢复正常），与化疗联合治疗未产生强于单纯化疗的副作用。上述毒副反应以Ⅰ级反应为主（占８６.8%)，无Ⅲ、Ⅳ级反应。结论：在所用试剂量范围内Ａd-p53经动脉局部用药及与化疗联合治疗是安全可行的。
- 吴沛宏罗慧玲刘然义黄金华蔡体育张福君张彦娜曾益新
- 关键词：晚期恶性肿瘤介入治疗安全性基因治疗
- 腺病毒介导的p53抑制肝癌生长的实验研究被引量：9
- 2001年
- 目的探讨外源性野生型Ｐ５３（Ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ ｐ５３， ＷＴ－ｐ５３）基因对肝癌细胞生长的影响。方法通过表达ＷＴ－ｐ５３的重组腺病毒载体（Ａｄ－ｐ５３），将ｐ５３基因导入肝癌细胞株中，用ＭＴＴ法检测Ａｄ－ｐ５３对各细胞株生长特性的影响，流式细胞仪分析各组细胞中ＤＮＡ含量及凋亡的比例。建立裸小鼠移植瘤模型后，瘤内注射Ａｄ－ｐ５３。最后处死动物，移植瘤称重， ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ｐ５３和ｐ２１蛋白的表达情况。结果外源性ｐ５３基因的导入可导致肝癌细胞生长的明显抑制，表现为既诱导细胞凋亡，又诱导细胞周期阻滞。瘤内注射Ａｄ－ｐ５３后移植瘤生长明显受抑制，并出现瘤组织中ｐ５３和ｐ２１蛋白表达的上调。结论腺病毒介导的ｐ５３基因治疗能有效控制肝癌的生长。
- 郭英曾益新王坤朱孝峰罗慧玲郑美莲李满枝陈积圣
- 关键词：基因P53腺病毒肝细胞
- E1B-55kDa缺陷腺病毒dl1520联合DDP抗鼻咽癌作用的实验研究
- 2001年
- 目的:探讨E1B-55kDa缺陷腺病毒dl1520与顺铂(DDP)联合应用对鼻咽癌的抑制作用。方法:采用MTT法测定体外dl1520联合DDP对鼻咽癌的细胞毒作用;在鼻咽癌裸鼠移植瘤上进行抗瘤实验,并用免疫组化检测腺病毒六邻体抗原的表达,分析dl1520在肿瘤内的复制情况。结果:在体外,dl1520能明显抑制CNE-2鼻咽癌细胞的生长,当感染复数(MOI)为0.032、0.160、0.800、4.000、20.000、100.000时,dl1520对CNE-2细胞的抑制率分别为2.78%、7.41%、10.19%、24.07%、45.37%和67.59%;当同时加入1μg/ml顺铂时,抑制率分别为29.63%、32.41%、40.74%、52.78%、66.67%和74.07%,而单独顺铂对CNE-2的抑制率为24.07%,联合组与单用dl1520组和单用DDP组比较均存在显著差异(P<0.01)。在动物实验中,dl1520单独及联合较低剂量DDP能显著抑制裸鼠移植瘤的生长,抑瘤率分别为35.71%和55.13%,与对照组比较,P值分别小于0.01和0.001;联合组与单独DDP组(抑瘤率为21.65%)比较也存在显著差异(P<0.05)。免疫组化结果证实,在dl1520组和联合组的肿瘤组织内存在大量腺病毒的复制,而对照组和DDP组中未见。结论:E1B-55kDa缺陷腺病毒dl1520对鼻咽癌具有一定的抑制作用,而dl1520与DDP联合应用可显著增强其抗癌效果。
- 彭吉林罗慧玲刘然义蔡体育潘伟光吴沛宏曾益新
- 关键词：顺铂基因疗法化学疗法鼻咽肿瘤
- E1B缺陷腺病毒dl1520预感染CNE-2细胞对其致瘤性的影响被引量：1
- 2005年
- 目的探讨E1B-55KDa缺陷腺病毒dl1520预感染鼻咽癌细胞CNE-2对其致瘤性的影响。方法10MOI(感染复数)的dl1520感染CNE-2细胞后,按5%、20%的比例将感染细胞和未感染细胞混合后做裸鼠皮下注射,观察肿瘤生长情况并采用免疫组化检测腺病毒六邻体抗原,分析dl1520在肿瘤内的复制及分布情况。结果5%、20%组均可见肿瘤生长明显抑制,抑瘤率分别为30.59%、76.60%,P<0.01。免疫组化证实瘤内有大量病毒复制且20%组比5%组分布更广泛。结论dl1520预感染CNE-2细胞后对其裸鼠移植瘤的生长有明显抑制作用,进一步证实dl1520具有一定的抗肿瘤作用且病毒在瘤内的分布情况可影响抗肿瘤的效果。
- 彭吉林罗慧玲刘然义曾益新
- 关键词：鼻咽癌细胞致瘤性
