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2008～2011年贵州省肠道病毒71型分子流行特征分析被引量：7: 2013年; 为研究贵州省肠道病毒71型(EV71)的基因型和分子流行特征,监测了全省报告的手足口病病例,选择2008年以来贵州全省部分EV71阳性标本进行病毒分离及VP1全基因测序(含重症病例、死亡病例和轻症病例),与国内外近年流行毒株及各亚型代表株进行基因比对,分析同源性及基因亚型。2008年、2009年及2011年贵州省流行的主要病原为EV71,获得109株参比序列毒株的同源性为95.3%～99.7%,贵州省毒株与邻省及山东省、上海市、南京市、吉林省和宁波市代表株的同源性最高,轻症与重死病例的核苷酸及氨基酸序列无明显的特征性差异,未出现不同基因亚型病毒的输入或改变,仍属C4a亚型。同地区、同年度内的核苷酸序列差异小于跨地区、跨年度差异。; 阎岩郭军周敬祝唐光鹏王定明; 关键词：手足口病 VP1基因

单种及联合靶向EV71VP1～VP4基因的shRNA干扰病毒复制的研究被引量：1: 2014年; 目的检测单种及2种联合靶向Ev71病毒衣壳蛋白VP1、VP2、VP3、VP4基因（VP1～VP4）的shRNA干扰病毒复制的效果。方法靶向EV71病毒的VP1～VP4基因序列设计及合成shRNA，并分别将其克隆到慢病毒质粒表达载体pLOV．CMV.EGFP中。重组表达质粒同psPAX2和pMD2．G共转染293T细胞，3d后收集上清中的重组病毒颗粒。用荧光定量RT—PCR法（real—timeqRT—PCR）和Westernblot检测单种及2种联合shRNA干扰EV71mRNA的表达水平及病毒蛋白的表达水平。结果靶向EV71VP1-VP4基因的shRNA对本研究的毒株（含死亡病例、重症病例、普通病例，FY0805）复制干扰差异无统计学意义（P〉0．05），对EV71病毒的抑制率分别约为：sh-VP1—1（51．6％），sh—VP1—2（85．1％），sh—VP1-3（76．4％），sh-VP2—1（57．5％），sh-VP2-2（81．4％），sh—VP2-3（79．5％），sh—VP3（68．9％），sh—VP4（56．7％），且有剂量依赖性。干扰病毒效率最高的为sh—VP1-2联合sh—VP2—2，抑制率可达96．6％，联合组均比单种加倍剂量的抑制率高。结论本研究设计的单独及联合靶向EV71病毒衣壳蛋白每个基因区均筛选到抑制率均大于50％的shRNA，且联合shRNA可以增强其干扰复制的能力。; 阎岩李世军郭军周敬祝唐光鹏王定明; 关键词：基因靶向 EV71

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贵州省科学技术基金(J[2011]2280)

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