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柑橘杂种材料鉴定研究进展被引量：2: 2012年; 从形态鉴别法、化学鉴别法、同工酶鉴别法、分子标记鉴别法几方面,综述了目前国内外关于柑橘材料鉴定方法的研究进展。; 陈勇雷天刚何永睿陈善春; 关键词：柑橘分子标记杂交育种

柑橘转基因成分多重PCR检测体系的建立被引量：2: 2012年; [目的]建立柑橘转基因成分的多重PCR检测体系。[方法]根据GenBank中pBI121质粒序列和柑橘(Citrus.)Actin基因序列,分别设计CaMV35S启动子、NOS启动子、NOS终止子特异引物和Actin基因的特异引物,建立能同时检测出4种序列的多重PCR检测体系,同时通过正交试验确定该体系的最佳引物浓度和比例及PCR反应体系中各因素的浓度及反应程序,并对该方法的灵敏度进行验证。[结果]试验得到的最佳MPCR反应体系为:10×buffer 2.5μl,25 mmol/L MgCl22.0μl;dNTP Mixture(2.5 mmol/L each)2.0μl,10μmol/L的Actin基因、35S启动子、NOS启动子、NOS终止子引物分别加入1.0、1.0、1.5、0.5μl,模板DNA 0.1μg,Taq DNA聚合酶1.25U,加ddH2O至25μl。PCR反应程序为:94℃预变性5 min;94℃30 s,64.1℃45 s,72℃50 s,31个循环;72℃10 min。试验中,经正交优化后的4重PCR反应灵敏度达0.1%。[结论]该研究建立的MPCR检测体系,理论上已能满足柑橘或其深加工产品的转基因成分检测。; 李政利彭爱红邹修平何永睿姚利晓陈善春; 关键词：多重PCR 正交试验转基因成分

转基因植物疫苗的研究进展被引量：6: 2011年; 疫苗是目前预防和控制疾病最有效的方式之一。转基因植物疫苗作为一种新型口服疫苗是现代疫苗研究的一个热点,以其价廉、安全、有效、易于储存等优点而具有十分广阔的应用前景。从转基因植物疫苗的作用机理、生产方法和应用前景等方面进行了论述。分析了转基因植物疫苗的优点及不足,并对其未来的发展进行了展望。; 王军政彭爱红姚利晓范达陈善春

柑橘CAPS标记和AS-PCR引物的开发被引量：12: 2012年; 以从GenBank中下载的93 955条甜橙[Citrus sinensis(L.)Osbeck]EST序列为源序列,利用QualitySNP软件包从中挖掘出1 521个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)候选位点。进一步利用酶切位点查找软件WatCut进行分析,发现其中125个SNP为酶切扩增多态性序列(cleavedamplified polymorphic sequences,CAPS)位点。随机挑选40个CAPS候选位点设计引物,对12个含多种类型的柑橘品种进行分型,以此验证各标记的有效性。同时,还挑选了25个经生物信息学预测可导致其编码蛋白氨基酸序列改变的SNP位点,分别设计出一组等位基因特异PCR(allele specific PCR,AS-PCR)引物,以6个不同类型柑橘品种的DNA为模板进行PCR扩增,扩增产物采用琼脂糖凝胶电泳进行检测,筛选多态性引物。结果显示,40个CAPS候选位点中有26个位点具有酶切扩增多态性,且分型结果稳定,可作为CAPS标记。此外,还筛选获得15组在不同柑橘品种间检测到多态性的AS-PCR引物,重复性好,可有效用于柑橘品种的SNP分型。; 雷天刚何永睿彭爱红许兰珍刘小丰姚利晓邹修平江东陈善春; 关键词：柑橘表达序列标签单核苷酸多态性

资阳香橙根cDNA全长文库的构建及EST分析: 2011年; 以资阳香橙根RNA为材料，采用趴压ART技术构建了cDNA全长文库，并对其质量进行鉴定。结果显示，该文库的库容量为4．8×10。pfu／mL，重组率为93％，文库插入片段大小主要集中在0．5～1．0kb。从文库中随机挑取450个克隆进行5’端单向测序，去除载体序列及低质量的序列后，共获得有效长度大于150bp的高质量ESTs（expressed sequence tags）序列438条，利用Bi-oEdit软件对有效ESTS序列进行片段重叠群分析和拼接后，获得251个独立基因（Unigenes），其中包括87个片段重叠群（Contigs）和164个独立的ESTs（Singlets）；通过与NCBI的非冗余核酸数据库进行tBLASTx比对，初步确定已知功能基因146个，未知功能基因91个．另有14个umgene未与数据库中序列匹配。该研兜为进一步分离克隆资阳香橙根部功能基因奠定了基础。; 王金萍宋二玲姚利晓李凤龙何永睿陈善春; 关键词：CDNA文库表达序列标签测序

植物根特异性启动子研究进展被引量：3: 2012年; 特异性表达启动子在高等植物转基因育种中对外源基因的调控已经成为分子生物学研究领域的前沿和热点,近几年来,关于植物根特异性表达表达启动子的研究逐渐增多,该研究综述了根特异性启动子的种类、特点及研究方法,并对其应用前景进行了展望。; 李凤龙姚利晓马园园陈善春; 关键词：外源基因基因表达调控转基因植物

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教育部科学技术研究重点项目(109131)