江苏省自然科学基金(BK2002030)
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
- 相关作者：黄松明黄艳军陈荣华张爱华费莉更多>>
- 相关机构：南京医科大学附属儿童医院南京医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 儿童微小病变型肾病综合征激素耐药和敏感的比较尿蛋白质组学研究被引量：4
- 2006年
- 肾上腺皮质激素（激素）作为治疗小儿肾病综合征（NS）的首选药物已逾40年。既往对激素耐药的研究大多都集中在基因水平上，而蛋白水平的研究较少且集中在膜蛋白。无论激素耐药的机制如何，最终都会通过体内蛋白质水平的改变而实现。应用比较蛋白质组学的方法研究NS激素耐药与激素敏感之间的差异蛋白，希望能为今后进一步阐明激素的作用机制，为耐药型NS的诊断试剂的研制提供线索。
- 黄艳军黄松明费莉徐松周陈荣华
- 关键词：微小病变型肾病综合征激素耐药比较蛋白质组学儿童首选药物
- 儿童微小病变型肾病综合征尿蛋白组的双向电泳及PDQuest图像初步分析
- 2005年
- 微小病变型肾病约占儿童肾病综合征(NS)78%,我们以微小病变型肾病综合征的蛋白尿为研究对象,经条件优化后,以固相pH梯度(IPG)等电聚焦为第1向,SDS-PAGE均一胶(T=10%)的垂直电泳为第2向,即双向电泳(2DGE),对NS儿童的尿蛋白进行了研究。结果获得了满意的电泳图谱,将2DGE银染后,以扫描仪获取电泳图像,对图谱进行分析。
- 黄艳军黄松明张爱华费莉徐颂周陈荣华
- 关键词：电泳图谱双向电泳微小病变型肾病蛋白质点等电聚焦
- 尿蛋白组学在儿童微小病变型肾病综合征中的初步研究被引量：2
- 2006年
- 目的研究儿童微小病变型肾病综合征尿蛋白组分析所需的固相pH梯度等电聚焦双向电泳及相关技术。方法冷丙酮萃取肾病综合征患儿尿蛋白,去除白蛋白等高丰度蛋白,以固相IPGpH梯度等电聚焦为第一向,SDS均一胶(10.00%)的垂直电泳为第二向,银染后PDQuest软件进行分析,质谱分析。结果成功地得到儿童微小病变型肾病综合征尿蛋白双向电泳图谱。PDQuest7.3软件进行图像分析,检测到400个蛋白点。正常尿蛋白检测到112个蛋白点。肾病综合征与正常尿蛋白图谱相比差异蛋白表达明显的有20个,质谱鉴定出5个蛋白,分别是Alpha-1-antitrypsin、PITPNB、Zn-alpha-2-glycoprotein、Haptoglobin和Alpha-1B-gly-coprotein。结论用尿蛋白组学对儿童微小病变型肾病综合征的尿液进行研究是可行的。
- 黄艳军黄松明张爱华费莉徐颂周陈荣华
- 关键词：双向电泳质谱
- 儿童微小病变型肾病综合征尿蛋白组的双向电泳及PDQuest图像初步分析被引量：4
- 2006年
- 目的:建立儿童微小病变型肾病综合征尿蛋白组分析所需的固相pH梯度等电聚焦双向电泳及相关技术.方法:冷丙酮萃取肾病综合征患儿尿蛋白,去除白蛋白等高丰度蛋白、除盐,以固相IPGpH梯度等电聚焦为第一向,均一SDS胶聚丙烯酰胺凝胶(T=10%)为第二向,银染后PDQuest软件进行分析.结果:成功得到儿童微小病变型肾病综合征尿蛋白双向电泳图谱.尿蛋白用17cm,pH3-10L(线性)的IPG胶条进行二维电泳时上样量100μg,60000Vh的等电聚焦是恰当的.PDQuest7.3软件进行图像分析,检测到400个蛋白点.结论:用尿蛋白组学对儿童微小病变型肾病综合征的尿液进行研究是可行的.为今后从更高的水平来寻找肾脏疾病的功能蛋白和特异性蛋白质,阐明肾脏疾病发生发展的网络机制等后续研究提供了可能性.
- 黄艳军黄松明张爱华费莉徐颂周陈荣华
- 关键词：双向电泳
- 微小病变型肾病综合征激素耐药和敏感的比较尿蛋白质组学研究被引量：6
- 2007年
- 目的研究儿童微小病变型激素耐药与激素敏感型肾病综合征的尿中差异蛋白质表达,鉴定出肾病综合征激素耐药相关蛋白。方法应用双向电泳相关技术结合基质辅助激光/电离飞行时间质谱仪技术,比较激素敏感和激素耐药微小病变型肾病综合征尿蛋白表达图谱寻找差异蛋白,对差异蛋白质斑点酶切,质谱分析,获得肽质量指纹图,通过蛋白质数据库进行蛋白检索分析。结果成功地得到儿童微小病变型肾病综合征激素耐药尿蛋白双向电泳图谱。肾病综合征耐药型与激素敏感型蛋白表达比较,发现有30个蛋白质斑点显著差异改变。对14个差异蛋白质斑点酶切,质谱分析结合蛋白数据库检索获得12个蛋白,分别为驱动蛋白家族成员27、磷脂酰丝氨酸转移蛋白、大疱性类天疱疮抗原1异构体、α1蛋白酶抑制剂、Zn-α2糖蛋白、α1B糖蛋白、血清白蛋白前体、结合珠蛋白前体、类驱动蛋白样动力蛋白、白介素1受体相关激酶4、胞质动力蛋白、细胞角蛋白9。与激素敏感蛋白图谱比较,在激素耐药蛋白图谱上蛋白酶抑制剂、α1B糖蛋白、IRAK4表达下调,其余9种蛋白表达上调。结论上述蛋白的鉴定将对激素耐药治疗靶位和耐药型肾病综合征诊断的分子标志物发现可能有所裨益。
- 黄艳军黄松明张爱华郑帼陈荣华
- 关键词：原发性肾病综合征微小病变激素耐药尿蛋白质组学质谱
