国家自然科学基金(30801332)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：李园周总光王玲于永扬蒋小更多>>
- 相关机构：四川大学华西医院华西医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PPARδ基因RNA干扰慢病毒载体的构建及稳定干扰结肠癌细胞株KM12C的建立被引量：2
- 2010年
- 大肠癌是常见的恶性肿瘤,其发病率和病死率正逐年递增。过氧化物酶体增殖因子活化受体δ(peroxisome pro1iferator-activated receptorδ,PPARδ)是结肠腺瘤性息肉基因通路的下游靶标,很可能参与了大肠癌发病机制。然而,目前对该基因在大肠癌中的功能尚未阐明。本实验采用慢病毒三质粒包装系统构建特异靶向人PPARδ基因的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)慢病毒载体,用以建立PPARδ基因稳定沉默的结肠癌细胞株。测序证实,成功构建编码表达PPARδ短发夹结构RNA(sh-PPARδ)的慢病毒载体pLVshPPARδ以及对照载体pLVControl。病毒载体转导结肠癌细胞株KM12C后,荧光显微镜及流式细胞术(fluorescence-activated cell sorting,FACS)证实细胞转染效率>90%,RT-PCR测定实验组KM12C细胞PPARδ的mRNA表达比未处理细胞下降70%,对照组与未处理细胞无显著差异。Western blot显示实验组PPARδ蛋白表达量比未处理细胞明显下降,对照组与未处理细胞无显著差异。结果显示成功构建特异靶向人PPARδ基因的RNAi慢病毒载体,并成功建立PPARδ表达稳定干扰的人结肠癌细胞株KM12C,为PPARδ在大肠癌中的功能研究提供了新的细胞模型。
- 蒋小杨烈周总光李园王玲于永扬王存
- 关键词：结直肠癌RNA干扰慢病毒
- Caspase-10(367G>A)单核苷酸多态性与大肠癌的相关性研究
- 2009年
- 目的探讨Caspase-10(367G>A)单核苷酸多态性在中国汉族人群中的分布特点及其与大肠癌发病的相关性。方法采用高通量TaqMan探针基因分型方法,检测351例大肠癌患者和141例健康体检者Caspase-10(367G>A)基因型频率及等位基因频率的分布。结果在中国汉族人群中Caspase-10(367G>A)等位基因位点均为野生型G,未见突变型A,其基因型频率和等位基因频率在大肠癌组和对照组中的差异无统计学意义(P>0.05)。结论在中国汉族人群中Caspase-10(367G>A)多态性可能与大肠癌的遗传易感性无关,还不能作为预测中国汉族人群发生大肠癌危险性的遗传学标志。
- 崔长富王玲李园王默进张鹏张益詹兰周总光
- 关键词：单核苷酸多态性大肠癌
