国家自然科学基金(81070830)
- 作品数：12 被引量：11H指数：2
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- 重编程相关因子在牙髓和牙周组织损伤修复中的表达和作用被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨重编程相关因子Oct-4、Sox2和c-Myc在大鼠牙髓组织和牙周韧带组织损伤修复过程中的表达及作用。方法:建立大鼠牙髓牙周联合损伤动物模型,HE染色观察4周后牙髓牙本质复合体及牙周附着装置修复情况,免疫组织荧光染色检测重编程相关因子Oct-4、Sox2和c-Myc在牙髓和牙周联合损伤修复动物体内模型的表达和分布。结果:HE染色显示,大鼠牙髓牙周联合损伤4周后,新生的牙髓牙本质复合体及牙周附着装置形成;免疫荧光显示,在体内牙髓牙周组织损伤修复的过程中,Oct-4、Sox2和c-Myc在牙髓及牙周损伤修复的新生组织均明显激活,Oct-4和Sox2呈现相似的表达趋势。结论:Oct-4、Sox2和c-Myc均参与体内牙髓牙本质复合体和牙周附着装置的损伤修复,Oct-4和Sox2呈现相似的表达趋势,提示Sox2和Oct-4可能存在协同调控作用,而c-Myc可能具备独立的功能。
- 刘路韦曦凌均棨彭正军吴莉萍
- 关键词：牙髓组织牙周组织
- 八聚体结合转录因子4调控细胞应激反应的研究进展
- 2013年
- 八聚体结合转录因子(Oct)4是维持胚胎干细胞多能性和自我更新的关键性调控因子,其功能多样性已成为研究热点之一。本文就Oct4基因转录异构体、Oct4基因剪接异构体、Oct4基因对细胞应激反应的调控作用、Oct4基因对牙髓细胞的调控作用等研究进展作一综述。
- 黄蓉韦曦
- 关键词：转录因子应激反应牙髓炎
- Oct4基因转染对人牙髓细胞增殖和多向分化能力的影响被引量：1
- 2013年
- 目的研究腺病毒介导的转录因子Oct4转染人牙髓细胞(DPCs)对其增殖和多向分化能力的影响。方法以Admax包装系统构建携带目的基因Oct4和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的腺病毒载体Ad5-Oct4-EGFP,筛选最佳感染复数(MOI)转染DPCs,检测其增殖及成牙本质、成脂分化能力的改变。结果采用Admax包装系统成功构建并获得高滴度的腺病毒载体,筛选最适MOI=200,CCK-8检测结果显示,Ad5-Oct4-EGFP组2d起吸光度(A)值高于对照组,7、14d与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),矿化诱导21d后,茜素红染色显示Ad5-Oct4-EGFP组与对照组相比,矿化结节数量多且体积最大,实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)结果显示,DSPP、BSP和CollagenⅠmRNA的表达量高于对照组(P<0.05);成脂诱导后细胞胞体呈立方状,油红O染色显示Ad5-Oct4-EGFP组细胞浆内出现较多脂滴,脂肪特异性标志LPL和PPARγ2mRNA水平较对照组显著上调(P<0.05),Ad5-EGFP和空白对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论转录因子Oct4可促进DPCs增殖和多向分化能力,改善DPCs的干性。
- 张芳刘路韦曦
- 关键词：牙髓细胞增殖多向分化
- 骨髓基质细胞亚群中多能性相关因子的表达和作用
- 2012年
- 目的通过检测体外培养人骨髓基质细胞(BMSCs)各细胞亚群中多能性相关因子Sox2、c-Myc和hTert表达水平的影响,探讨BMSCs各细胞亚群多能性和重编程能力的差异。方法采用有限稀释法克隆化培养BMSCs,从快速生长克隆、慢速生长克隆和混合培养BMSCs中各选择3个样本,免疫荧光染色检测Sox2、c-Myc和hTert表达,实时荧光定量聚合酶链反应检测Sox2、c-Myc和hTert mRNA表达,进行统计学分析。结果 Sox2在快速生长BMSCs细胞克隆为细胞核强表达,在其他各组为胞浆表达,Sox2 mRNA在快速生长细胞克隆表达显著高于其他各组(P<0.05)。c-Myc和hTert呈现相似的表达模式,在快速生长细胞克隆和混合培养BMSCs均为细胞核强表达,在慢速生长细胞克隆为胞浆表达,而三组间c-Myc和hTert mRNA表达水平均差异无统计学意义(P>0.05)。结论快速生长BMSCs细胞克隆中多能性相关因子Sox2表达高于慢速生长细胞克隆,提示细胞亚群的克隆形成能力可能与细胞多能性和重编程能力正相关,Sox2可能是细胞未分化性能的关键调控因子。c-Myc和hTert可能存在协同作用。
- 刘路韦曦凌均棨彭正军吴莉萍
- 关键词：骨髓基质细胞细胞亚群
- 正常及炎症状态人牙髓中八聚体结合转录因子4B的表达被引量：1
- 2012年
- 目的研究人正常及炎症牙髓组织中八聚体结合转录因子4B(Oct-4B)的表达特点,检测大肠杆菌脂多糖刺激后人牙髓细胞(HDPCs)中Oct-4B的表达水平,以探讨Oct-4B在牙髓炎症中的可能作用。方法采用免疫组织化学和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测正常及炎症牙髓组织中Oct-4B的表达情况。RT-PCR检测1mg/L脂多糖刺激HDPC24、48、72h后Oct-4B和热休克蛋白70(HSP70)表达水平的变化。结果正常牙髓组织中未检测到Oct-4B的表达,炎症牙髓组织病灶处牙髓成纤维细胞和炎症细胞胞质中Oct-4B表达强阳性。炎症牙髓组织中Oct-4BmRNA水平显著高于正常牙髓组织(P<0.05)。脂多糖刺激48、72h后,HDPC中Oct-4B和HSP70mRNA水平同步上调(P<0.05)。结论 Oct-4B在炎症牙髓组织中高表达,且脂多糖刺激可上调牙髓细胞内Oct-4B表达,Oct-4B可能参与牙髓炎症修复过程。
- 韦曦孔倩颖黄奕俊刘路张芳
- 关键词：牙髓细胞牙髓炎
- OCT4B1在牙髓细胞的表达及其对凋亡相关因子的调控作用
- 2013年
- 目的研究人牙髓细胞(HDPCs)中八聚体转录结合因子4剪接异构体B1(OCT4B1)的表达及基因转染OCT4B1后对凋亡相关因子的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和荧光原位杂交(FISH)技术检测正常HDPCs中OCT4B1的表达;利用慢病毒载体构建OCT4B1高表达模型并转染HDPCs,检测半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶(Caspase)3和7的表达变化。结果 OCT4B1表达于正常HDPCs且在第三代中表达最高;上调OCT4B1后与空载体组相比,OCT4B1高表达组Caspase-3、Caspase-7 mRNA表达降低(P<0.05)。结论 HDPCs中上调OCT4B1可抑制Caspase-3和Caspase-7的表达,说明OCT4B1参与细胞应激反应,可能与细胞凋亡相关。
- 黄蓉刘路韦曦
- 关键词：牙髓细胞
- 干扰八聚体转录结合因子4A对人牙髓细胞增殖与多向分化能力的影响被引量：2
- 2013年
- 目的研究八聚体转录结合因子4A（octamer—bindingtranscriptionfactor4A，Oct4A）在人牙髓细胞（humandentalpulpcells，DPC）的表达及对细胞增殖、成牙本质向和成脂向分化能力的影响。方法实时荧光定量PCR（reahimequantitativePCR，RT—qPCR）技术检测健康人DPC中Oct4A的表达；合成特异性针对Oct4A的siRNA（Oct4A干扰组），50nmol／LsiRNA经脂质体Lipofectamine。TMRNAiMAX转染DPC24、48、72、96和120h，以无义序列一siRNA转染的DPC作为阴性对照，细胞计数试剂盒法检测细胞增殖情况、RT—qPCR检测OctdA的mRNA水平以选取最佳转染时间；茜素红染色检测成牙本质诱导DPC14d后矿化结节形成情况，油红0染色检测成脂诱导DPC14d后脂滴形成情况，RT—qPCR技术检测成牙本质向分化标志物牙本质涎磷蛋白（dentinsial叩hosph叩rofein，DSPP）和成脂向分化标志物脂蛋白脂酶（1ipoproteinlipase，LPL）的mRNA表达变化；蛋白质印迹法检测DSPP和LPL的表达。结果Oct4A在第3代DPC中表达最高（2．10±0．10），为第1代DPC的2．10倍（与第1、7代相比P=0．000），之后随细胞传代表达下降；Oct4A—siRNA转染DPC72h，干扰效率达峰值（69．7％）；与正常细胞组及阴性对照组相比Oct4A干扰组细胞增殖能力显著下降，矿化结节和脂滴形成显著减少（P=0．000），分化标志物DSPP和LPL表达量显著下降（P=0．000）。结论瞬时干扰牙髓细胞中Oct4A的表达可以降低细胞增殖和成牙本质向、成脂向分化能力。
- 伍丽静刘路陈丽虹韦曦
- 关键词：细胞增殖细胞分化牙髓细胞
- Oct4调节成体干细胞多能性的研究进展
- 2013年
- 成体干细胞是存在于人和哺乳动物特定组织中的具有自我更新和一定分化潜能的未成熟细胞,参与成体组织的更新和创伤修复。牙髓干细胞是牙髓损伤修复的潜能所在,如何调控其生物学行为以促进牙髓修复再生是当前的研究热点。Oct4在干细胞发育的基因调控网络中居核心地位,近年研究显示Oct4具有维持成体干细胞多能性的功能。本文通过阐述Oct4的结构和功能,揭示其在成体干细胞中的调节作用,为研究Oct4对牙髓干细胞的调节作用提供理论基础。
- 伍丽静韦曦
- 关键词：OCT4成体干细胞牙髓干细胞
- 骨形成蛋白4对人骨髓基质细胞端粒酶表达的调控作用
- 2011年
- 目的:检测外源性骨形成蛋白4(bone morphogenetic protein4,BMP4)对体外连续传代培养人骨髓基质细胞(bonemarrow stromal cells,BMSCs)生长和人端粒酶反转录酶催化亚单位(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)表达水平的影响,探讨BMP4对BMSCs体外传代培养过程中细胞老化的调控作用。方法:取第1、3和7代rhBMP4诱导组和对照组BM-SCs,细胞计数,免疫荧光染色检测hTERT表达,实时荧光定量聚合酶链反应检测第3和7代BMSCs中hTERT mRNA表达,统计学分析。结果:rhBMP4诱导组各代BMSCs细胞数均显著高于对照组(P<0.05)。免疫荧光示hTERT在第1和第3代rh-BMP4诱导组和对照组BMSCs均为细胞核表达,在第7代诱导组保持细胞核表达,而第7代对照组则表现为细胞浆表达。实时荧光定量聚合酶链反应显示,hTERT在第3和第7代诱导组BMSCs的表达均显著高于对照组(P<0.05)。结论:BMP4可促进BMSCs生长,维持传代后期hTERT表达,延缓细胞老化。
- 刘路韦曦凌均棨张芳吴莉萍
- 关键词：骨形成蛋白-4端粒酶骨髓间充质细胞
- Oct4及其亚型调控细胞多能性的研究进展被引量：1
- 2011年
- 利用oct4、sox2、c-Myc、klf4基因转染体细胞可获得与胚胎干细胞(ESC)类似的诱导性多能干细胞。其中,Oct4作为体细胞重编程必不可少的核心转录因子,在转录调节、信号传导通路、表观遗传修饰等方面具有重要调控作用。本文通过阐述Oct4及其亚型调控ESC多能性的作用机制,揭示其在体细胞重编程中的调节作用,以期为研究Oct4对牙髓干细胞的调节作用提供一定的理论依据。
- 孔倩颖韦曦
- 关键词：OCT4重编程多能干细胞牙髓干细胞
