国家自然科学基金(31260339)
- 作品数：7 被引量：15H指数：3
- 相关作者：李鸿彬李榕郝晓云寇伟梁卓更多>>
- 相关机构：石河子大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 植物GDSL脂肪酶家族研究进展被引量：4
- 2013年
- GDSL脂肪酶是一种新的脂肪酶家族成员,由于对其研究起步较晚,尤其是对植物GDSL脂肪酶的研究较少,因此对它们的很多功能和特点的研究还不够深入。近年来的研究表明,GDSL脂肪酶催化位点非常灵活,在与底物结合后其构象会改变,因此,该类酶具有多种潜在的功能。目前,已经克隆和鉴定了部分植物GDSL脂肪酶基因,分析并鉴定了一些基因的功能。对植物中GDSL脂肪酶的功能方面研究较多的是其参与植物生长发育、油脂代谢和抗逆性反应等。文章介绍了植物中的GDSL脂肪酶在结构和生理功能等方面的研究进展。
- 郝晓云蔡永智钱雯婕袁哈利李榕李鸿彬
- 关键词：植物脂肪酶
- 棉纤维细胞色素单加氧酶基因GhCYP714A1促进活性氧的累积被引量：3
- 2017年
- 本研究利用RT-PCR技术从陆地棉纤维组织中克隆得到了1个棉花细胞色素P450基因(Cytochrome P450714A1)的全长c DNA序列,将该基因命名为GhCYP714A1。序列分析发现,该cDNA包含1563 bp的完整开放读码框,编码521个氨基酸的蛋白质,理论分子质量为57.31 kDa;氨基酸序列生物信息学分析显示,Gh CYP714A1蛋白具有跨膜结构域和多个蛋白结合位点;进化树分析结果表明,棉花Gh CYP714A1与禾草SiCYP714B1在进化上亲缘关系上较近;半定量RT-PCR的组织表达特异性分析表明GhCYP714A1基因与纤维突起形成发育有关。本研究构建了pET28a-GhCYP714A1原核表达载体并进行体外诱导表达,获得分子质量约为57.31 kDa的重组蛋白。将GhCYP714A1基因转化烟草验证其参与活性氧产生的功能,与非转基因的野生型烟草相比,转基因烟草叶片中具有较高的H_2O_2累积。本实验结果为深入研究该基因在棉纤维发育中的作用奠定了基础。
- 辛珊李榕谢全亮寇伟李鸿彬
- 关键词：棉花纤维发育细胞色素P450基因细胞伸长活性氧
- 一个棉花微管结合蛋白基因GhSP1L5的克隆及表达分析
- 2014年
- 利用RT-PCR技术从处于快速伸长发育时期的棉花纤维组织中克隆得到Spiral1-Like(SP1L5)基因(GhSP1L5),其开放读码框为315 bp,编码105个氨基酸的蛋白质,生物信息学分析表明,GhSP1L5蛋白N端和C端较为保守,并含有SCOP结构域,是典型的微管结合蛋白。进化树分析表明该基因与SP1L5家族基因的亲缘关系较近。构建原核表达载体pET28a-GhSP1L5,转化大肠杆菌BL21(DE3)并进行体外诱导表达,通过SDS-PAGE检测目的蛋白的表达,获得分子质量约为12 kD的重组蛋白。QRTPCR结果分析表明GhSP1L5基因在开花后15和20 dpa的纤维组织中表达量较高,在棉纤维发育的其他时期及根、茎、叶组织中表达量较低。
- 李榕寇伟谭兰贺怡梁卓李鸿彬
- 关键词：棉花纤维微管结合蛋白
- 过量表达棉花GDSL脂肪酶提高甘蓝型油菜油脂含量的研究被引量：4
- 2014年
- GDSL脂肪酶作为一种脂质水解酶具有广泛的底物特异性，在植物的油脂代谢、生长发育等众多生理过程中发挥着重要作用。利用RT—PCR技术从发育的陆地棉种子中克隆得到棉花的GDSL脂肪酶基因的cDNA，该基因开放读码框为1068bp，编码含有356个氨基酸的蛋白质。对棉花种子发育不同时期进行半定量PCR分析的结果表明，在种子发育15—20d时，GhGLIP基因的表达量较高。将该基因构建到真核表达载体pCAMBIA2300中，转入农杆菌GV3101后转化甘蓝型油菜野油19，通过筛选和鉴定获得转基因阳性油菜株系。转基因油菜的GDSL脂肪酶活力获得了显著提高，转基因油菜种子的油脂含量比野生型油菜提高了8．68％，提高比率为24．3％。
- 郝晓云蔡永智袁哈利李榕王斐李鸿彬
- 关键词：棉花种子油脂含量甘蓝型油菜
- 甘蓝型油菜下胚轴和带柄子叶再生体系研究被引量：2
- 2013年
- 以甘蓝型油菜野油19号的下胚轴和带柄子叶为外植体,研究其下胚轴和带柄子叶在不同浓度激素配比下的分化率及再生频率的变化。该品系的油菜下胚轴和带柄子叶在1.5 mg/L的2,4-D中预培养4 d后,转入分化培养基中,其愈伤组织形成早,发生快,再生频率和分化频率均较高。其中,下胚轴转入MS+3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA培养基中的分化率和再生频率最高,再生频率达到86.67%;带柄子叶外植体的再生频率要比下胚轴的再生频率低,在MS+4 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA的分化培养基中芽的再生频率为46.67%。本研究初步建立了甘蓝型油菜野油19号的高频率再生体系。
- 郝晓云沈海涛李鸿彬
- 关键词：甘蓝型油菜下胚轴带柄子叶
- 陆地棉GDP-L-半乳糖磷酸化酶基因启动子的克隆及活性分析被引量：2
- 2016年
- 抗坏血酸(Ascorbic acid,As A)在植物发育和响应逆境胁迫过程中发挥着重要作用。GDP-L-半乳糖磷酸化酶(GDP-L galactose phosphorylase,GGPase)是As A合成过程中关键酶之一,在As A的生物合成和代谢调控中具有重要作用。为深入了解棉花Gh GGPase基因的表达调控模式,本研究利用PCR技术克隆得到Gh GGPase基因起始密码子上游2 464 bp的启动子序列,序列分析发现该启动子包含多个参与激素信号、光调节和抗逆信号应答的顺式作用元件。构建p Gh GGPase::GFP-GUS过量表达载体,采用农杆菌介导法瞬时转化烟草叶片,进行GUS组织化学染色和酶活性检测,GUS染色实验结果显示,瞬时转化启动子的烟草叶片表现出较深的蓝色,并且具有较高的酶活性表达,这表明Gh GGPase启动子能够显著的驱动GUS的表达。以上结果表明:Gh GGPase启动子是一个完整的功能序列,具有较强的表达活性。
- 左晓宇梁卓安晶潘泽李鸿彬
- 关键词：陆地棉启动子GUS
- 棉花GhSP1L基因克隆与表达分析
- 2015年
- 【目的】棉花Spiral1-LIKE(SP1L)基因(Gh SP1L)的克隆、功能序列分析及原核表达。【方法】通过RT-PCR从棉纤维中克隆Gh SP1L基因,进行Gh SP1L蛋白的功能结构域分析,构建原核表达载体p ET28a-GhSP1L,进行蛋白体外诱导表达,SDS-PAGE分析蛋白的表达情况;RT-PCR检测Gh SP1L基因的表达特征。【结果】从陆地棉纤维组织中克隆得到Gh SP1L基因的全长c DNA,其开放读码框为318 bp,编码106个氨基酸的蛋白质,理论分子质量为11.76 k Da。对氨基酸序列进行生物信息学分析,其N端和C端较为保守,含有SCOP结构域,属于SP1L家族蛋白,能够在其他微管蛋白协助下与微管结合,SPR1的定位可能与其结合的微管结合蛋白相关。构建了p ET28a-Gh SP1L原核表达载体,并通过体外诱导表达后获得分子质量约为12 k Da左右的重组蛋白Gh SP1L;半定量RT-PCR结果表明,Gh SP1L基因开花后3 d的纤维组织中表达量较高。【结论】Gh SP1L基因的克隆、序列分析和表达,重组蛋白的诱导表达,为深入研究该基因在棉纤维发育中的作用奠定了基础。
- 李榕寇伟梁卓谢全亮李鸿彬
- 关键词：棉花纤维微管结合蛋白
