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河北省卫生厅资助项目(02076)
作品数:
2
被引量:5
H指数:1
相关作者:
王秀荣
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马翠卿
魏林
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CpG寡核苷酸增强UPEC FimH疫苗黏膜免疫的实验研究
2009年
尿路致病性大肠杆菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC)是引起尿路感染(UTI)的主要病原菌。FimH蛋白是UPECI型菌毛的黏附成分,介导UPEC侵入膀胱上皮细胞。本实验用FimH的真核表达质粒和蛋白免疫小鼠可产生较高浓度的IgG抗体。
李博
刘颖
尹晓琳
魏林
马翠卿
曾瑞红
王秀荣
关键词:
CPG寡核苷酸
黏膜免疫
尿路致病性大肠杆菌
膀胱上皮细胞
真核表达质粒
尿路致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛fimH和fimC基因原核表达质粒的构建及表达
被引量:5
2007年
目的构建以尿路致病性大肠杆菌(UPEC)Ⅰ型菌毛编码基因fimH和fimC为目的基因的原核重组表达质粒,诱导其在E.coliBL-21中表达,并对其免疫原性进行分析。方法PCR法自UPEC标准菌株J96获取fimH和fimC基因,分别插入原核表达载体pGEX-4T-2;将重组表达质粒转染感受态E.coliBL-21,经IPTG诱导表达、SDS-PAGE和Westernblot鉴定并纯化目的蛋白fimH和fimC蛋白,定量后免疫BALB/c小鼠,动态检测抗体产生水平。结果PCR法克隆出全长为903bp的fimH和720bp的fimC基因,构建的原核表达质粒pGEX-4T-2-fimH及pGEX-4T-2-fimC经诱导可分别表达出60KD和48KD左右的GST融合蛋白;蛋白经纯化后免疫动物能诱导产生高效价的IgG抗体。结论成功获取了UP-ECⅠ型菌毛基因fimH和fimC,所构建的原核表达质粒在BL-21中成功表达;fimH有免疫原性。
尹晓琳
石新丽
魏林
王秀荣
马翠卿
冯惠东
关键词:
尿路致病性大肠杆菌
原核表达
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