国家自然科学基金(81370315)
- 作品数：8 被引量：23H指数：3
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- 香烟提取物对血栓调节蛋白与凝血酶结合力的影响被引量：2
- 2014年
- 目的利用单分子力谱法检测香烟提取物(cigarette smoke extract,CSE)对血栓调节蛋白(thrombomodulin,TM)与凝血酶间单分子水平相互作用,探讨吸烟致血管内血栓形成机制。方法构建TM-GFP质粒并转染至COS-7细胞,应用原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)分组测力:(1)空白质粒对照组(GFP-Thr);(2)TM-Thr对照组;(3)5%CSE孵育TM-Thr细胞组(CSE-TM-Thr);(4)5%CSE孵育空白质粒细胞组(CSE-GFP-Thr)。结果 (1)TM与凝血酶的相互作用力为(60.90±0.82)pN,成键几率为(22.58±3.95)%,抗体阻断后成键几率为(2.58±2.0)%。(2)与TM-Thr组比较,GFP-Thr组、CSE-TM-Thr组、CSE-GFP-Thr组,3组AFM成键几率明显减低,P<0.05;但3组间两两比较差异无统计学意义。在定量TM修饰的硅片表面检测证实CSE同样可减少TM与凝血酶的成键几率。结论吸烟可能通过减少TM与凝血酶结合几率,抑制TM的抗凝作用,从而导致血管内血栓形成。
- 魏玉杰刘惠亮李屹张蛟徐丽张雪洁
- 关键词：香烟提取物血栓调节蛋白凝血酶人脐静脉内皮细胞
- 香烟提取物对COS-7细胞表面血栓调节蛋白荧光表达的影响
- 2015年
- 目的:探讨香烟提取物(CSE)是否对非洲绿猴肾成纤维细胞(COS-7)表面血栓调节蛋白(TM)荧光蛋白表达的影响。方法:成功构建TM-绿色荧光蛋白(GFP)质粒后,使其转染至COS-7细胞,用制备好的5%CSE孵育(5%CSE组);将无血清最低必需培养基(MEM,单纯培养基)加入一定体积的PBS进行同步培养作为对照组;采用流式细胞仪计数方法检测不同时间点COS-7表面TM荧光蛋白表达量的变化。结果:与对照组比较,5%CSE在1h、6h对COS-7表面TM荧光蛋白表达没有明显变化[1h:(134.99±18.41)比(146.61±12.06),6h(116.89±27.28)比(123.89±39.24),P均>0.05]。结论:5%香烟提取物对非洲绿猴肾成纤维细胞表面血栓调节蛋白荧光表达没有影响。
- 魏玉杰刘惠亮李屹赖斌
- 关键词：血栓调节蛋白COS细胞绿色荧光蛋白质类
- TNF-α对血栓调节蛋白表达活性的影响及其作用机制的探讨被引量：5
- 2016年
- 目的观察肿瘤坏死因子(TNF)-α对血栓调节蛋白(TM)在原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的表达和活性的影响,并初步探讨其作用机制。方法体外培养HUVECs,实验分为3组:1对照组:加入与TNF-α等体积的PBS培养细胞6 h;2 TNF-α组:TNF-α终浓度为10 ng/ml孵育细胞6 h;3 BAY11-7082抑制组:BAY11-7082终浓度2μg/ml孵育细胞1 h阻断NF-κB通路后再用10 ng/ml的TNF-α干预细胞6 h。分别采用流式细胞技术、荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和酶标仪检测TM蛋白、mRNA表达及活性强度。结果 TNF-α组相比与对照组和BAY11-7082抑制组在TM的蛋白、mRNA水平上均明显降低(P<0.05),TM活性也明显减弱(P<0.05)。而BAY11-7082抑制组相比与对照组在TM蛋白水平和活性均无差异,在mRNA水平上升高(P<0.05)。结论 TNF-α可明显降低TM表达,并抑制其活性,NF-κB通路参与了这一过程。
- 赖斌魏玉杰刘惠亮李屹谢玉凤付玲
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α血栓调节蛋白NF-KB脐静脉内皮细胞
- KDR rs1870377基因与经皮冠状动脉介入治疗术后氯吡格雷耐药相关性分析
- 2022年
- 目的:探讨与分析KDR rs1870377基因与经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention, PCI)术后氯吡格雷耐药相关性。方法:2018年5月到2021年2月选在航天中心医院(北京大学航天临床医学院)老年医学一科住院的冠心病患者97例作为研究对象,所有患者在PCI术后判定氯吡格雷耐药情况,检测KDR rs1870377基因多态性状况并进行相关性分析。结果:在97例患者中,PCI术后氯吡格雷耐药22例(耐药组),耐药率为22.7%。耐药组的空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯等与非耐药组对比差异无统计学意义(P>0.05)。KDR rs1870377基因主要包括AA、CC、CA三种基因型,两组都与Hardy-Weinberg平衡定律相符合,研究对象具有群体代表性。耐药组的KDR rs1870377基因CC基因型高于非耐药组(P<0.05),耐药组的等位基因C频率高于非耐药组(P<0.05)。Spearsman分析显示KDR rs1870377基因CC基因型、等位基因C与氯吡格雷耐药存在相关性(P<0.05)。多元Logistic回归分析显示KDR rs1870377基因CC基因型、等位基因C为导致PCI术后氯吡格雷耐药的重要因素(P<0.05)。结论:冠心病患者PCI术后氯吡格雷比较常见,也伴随有KDR rs1870377基因多态性,KDR rs1870377基因CC基因型、等位基因C为导致PCI术后氯吡格雷耐药的重要因素。
- 孟锐魏玉杰王彦宏刘阳李向楠易忠
- 关键词：基因多态性经皮冠状动脉介入治疗氯吡格雷
- 复方丹参滴丸联合沙库巴曲缬沙坦对老年心肌梗死患者PCI术后炎性反应、心室重塑和心肌灌注的影响被引量：11
- 2021年
- 目的:探讨复方丹参滴丸联合沙库巴曲缬沙坦对老年心肌梗死患者经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronary intervention,PCI)术后炎性反应、心室重塑和心肌灌注的影响。方法:采用随机数字表法将本院2017年3月至2020年2月间收治的行PCI治疗的68例老年心肌梗死为研究对象,分为对照组(34例)和观察组(34例)。两组均行常规药物治疗,在此基础上予以对照组沙库巴曲缬沙坦治疗,予以观察组复方丹参滴丸联合沙库巴曲缬沙坦治疗。比较两组治疗前后血浆中超敏C反应蛋白(high-sensitivity creactive protein,hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、N末端脑钠肽前体(N-terminal-pro-brain-natriuretic-peptide,NT-proBNP)、左室舒张末期前后径(left ventricular end-diastolic diamete,LVEDD)、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室质量指数(left ventricular mass index,LVMI)以及治疗后TIMI血流分级。结果:两组血浆hs-CRP、TNF-α、IL-8和NT-proBNP水平以及LVEDD和LVMI水平较治疗前明显降低,LVEF水平明显增加(P<0.05)。观察组治疗后血浆hs-CRP、TNF-α、IL-8和NT-proBNP水平以及LVEDD和LVMI水平明显低于对照组,LVEF水平明显高于对照组(P<0.05)。两组术后20 minTIMI血流分级均明显好转,观察组术后20 min时TIMI血流分级明显优于对照组(P<0.05)。两组不良反应总发生率比较无明显差异(P>0.05)。结论:复方丹参滴丸联合沙库巴曲缬沙坦能够明显降低老年心肌梗死患者PCI术后炎性反应,抑制心室重塑,改善心肌灌注,安全性较高。
- 孟锐魏玉杰董建增易忠王恩宁
- 关键词：复方丹参滴丸老年心室重塑心肌灌注
- 高糖对人脐静脉内皮细胞表面血栓调节蛋白表达及活性的影响
- 2015年
- 目的观察高糖对血栓调节蛋白在原代人脐静脉内皮细胞的表达和活性的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,实验分为三组:1对照组;210 mmol/L葡萄糖组;320 mmol/L葡萄糖组,孵育细胞24 h。分别用流式细胞术、实时荧光定量聚合酶链反应和酶标仪检测血栓调节蛋白的蛋白、m RNA表达及活性强度。结果20 mmol/L葡萄糖组和10 mmol/L葡萄糖组相比于对照组在血栓调节蛋白的蛋白(41.38±3.41、32.60±2.59比27.96±1.58)、m RNA(2.05±0.19、1.44±0.32比1)水平上均升高(P<0.05),20 mmol/L葡萄糖组与对照组相比在血栓调节蛋白活性上也增强(0.4157±0.0129比0.3957±0.0100,P<0.05),但10 mmol/L葡萄糖组与对照组在血栓调节蛋白活性上差异无显著性。结论高糖可增加血栓调节蛋白表达,并增强其活性,提示这可能为内皮细胞对于高糖的一种防御机制。
- 赖斌魏玉杰刘惠亮李屹谢玉凤付玲
- 关键词：高糖血栓调节蛋白人脐静脉内皮细胞
- 不同浓度的烟焦油与尼古丁对脐静脉内皮细胞增殖作用的研究被引量：2
- 2016年
- 目的研究不同浓度烟焦油与尼古丁对人脐静脉内皮细胞增殖的影响。方法采用Ⅰ型胶原酶消化法从人脐静脉中分离人脐静脉内皮细胞,Ⅷ因子免疫细胞化学染色方法鉴定分离、培养的脐静脉内皮细胞(HUVECs),CCK-8法、Brd U染色法检测不同浓度焦油与尼古丁对HUVECs增殖的影响。结果 1、Ⅷ因子免疫细胞化学染色法显示人脐带中分离、培养的HUVECs阳性率大于95%。2、细胞培养至6 h,50 mg/L焦油组A(450)值低于对照组A(450),具有统计学意义(P<0.05);细胞培养至24 h,50 mg/L焦油组A(450)值低于其他各组A(450)值,具有统计学意义(P<0.05);而不同浓度尼古丁组6 h、24 h与对照组相比随浓度的升高,A(450)值呈现逐渐升高的趋势,但无统计学意义。3、细胞培养至6 h,不同浓度焦油组Brd U阳性率无统计学意义;细胞培养至24 h,50 mg/L焦油组Brd U阳性率低于其他各组,具有统计学意义(P<0.05);不同浓度尼古丁组6 h、24 h与对照组相比Brd U阳性率无统计学意义。结论 50 mg/L焦油抑制HUVECs的增殖,尼古丁具有增强HUVECs增殖的趋势。
- 吴雨径张晶赖斌李屹魏玉杰刘惠亮
- 关键词：焦油尼古丁增殖脐静脉内皮细胞
- 冠状动脉介入术治疗前后CRP、MMP-9水平变化及对患者预后的预测价值研究被引量：3
- 2021年
- 目的探讨冠状动脉介入术治疗前后CRP、MMP-9的变化及对患者预后的预测价值。方法选取98例冠状动脉介入术治疗患者,分为不稳定型心绞痛组(n=36)、急性心肌梗死组(n=28)和稳定性心绞痛组(n=34),对比3组冠状动脉介入术治疗前后CRP和MMP-9水平变化及预后情况;依照预后分为预后不良组(n=28)与预后良好组(n=70),对比2组手术前后CRP和MMP-9水平。结果 3组在手术后CRP和MMP-9水平明显高于手术前(P<0.05),且3组组间CRP和MMP-9水平对比差异显著,急性心肌梗死组最高,稳定心绞痛组次之,不稳定型心绞痛组最低(P<0.05);3组不良心血管事件对比无明显差异(P>0.05);预后良好组与预后不良组术前CRP和MMP-9水平对比无明显差异(P>0.05),2组手术后CRP和MMP-9水平明显升高,且预后不良组显著高于预后良好组(P<0.05);对单因素分析具有统计学差异指标进行赋值:术后CRP≥5.57为1,<5.57为0;术后MMP-9≥63.04为1,<63.04为0;术前CRP≥2.07为1,<2.07为0;术前MMP-9≥6.54为1,<6.54为0。术后CRP和术后MMP-9表达为冠状动脉介入患者不良预后的影响因素(P<0.05)。结论冠状动脉介入术治疗前CRP和MMP-9水平无明显差异,治疗后均升高,对患者预后预测具有一定价值。
- 孟锐李新建魏玉杰王彦宏易忠
- 关键词：冠状动脉介入基质金属蛋白酶-9预后预测
