安徽省自然科学基金(090413111)
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 相关作者：章尧陈昌杰杨清玲程龙强王惠更多>>
- 相关机构：蚌埠医学院皖南医学院蚌埠医学院第二附属医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 干扰肝细胞核因子-1α对HepG2细胞载脂蛋白M及胆固醇相关代谢酶表达的影响被引量：5
- 2011年
- 目的检测肝细胞癌和癌旁组织中肝细胞核因子（HNF）1α、肝受体同系物（LRH）-1与载脂蛋白（apo）M表达的相关陛，探讨HNF-1α对apoM、apoAI和胆固醇合成与转化关键酶表达的影响。方法RT—PCR检测人肝细胞癌组织和癌旁组织中HNF-1α、LRH-1apoM的表达水平。采用小干扰RNA（siRNA）在人肝癌细胞株HepG2细胞中干扰HNF1d表达后，RTPCR检测apoM、apoA—I及羟甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMGCR）、胆固醇7α-羟化酶1（CYP7A1）、法尼醇X受体（FXR）、小异源二聚体伴侣（SHP）-1的变化情况；Westernblot检测apoM在蛋白水平的变化情况。对不同数据进行单因素方差分析、配对t检验或直线相关分析。结果HNF-1α、LRH1、apoMmRNA在人肝细胞癌组织中明显高于癌旁组织（t值分别为-7．075，-8．803，-7．167，P值均〈0．01）；HNF-1α和LRH-1与apoM的mRNA表达水平呈正相关（r=0．353，P〈0．01；r=0．523，尸〈0．01）。干扰HNF-1α后，与阴性对照相比，apoM、FXR、SHP1mRNA水平分别下降47．4％（F=77．627，P〈0．01）、47．9％（F=76．363，P〈0．01）、65．2％（F=365．772，P〈0．01），apoM蛋白水平下调54．3％（F=43．482，P〈0．01）；HMGCR、CYP7A1mRNA水平分别升高101．1％（F=218．666，P〈0．01）、138．5％（F=171．926，P〈0．01）；而对apoAI无明显影响（，==0．170，P〉0．05）。结论HNF-1α可提高apoM的表达水平，并通过促进胆固醇代谢关键酶的表达和抑制胆固醇代谢相关抑制因子的生成而促进胆固醇的转化，对心血管疾病具有保护作用。
- 章尧陈昌杰杨清玲程龙强王惠黄丽珠
- 关键词：载脂蛋白类RNA干扰
- 人载脂蛋白M野生型和突变型表达载体的构建及鉴定
- 2011年
- 目的:构建人载脂蛋白M(ApoM)野生型和突变型原核表达载体pGEX-KG-ApoM及真核表达载体pcDNA3.1(+)-ApoM。方法:Trizol法抽提HepG2细胞总RNA,RT-PCR扩增ApoM全长基因,将基因片断重组到PMD18-T质粒中构建PMD18-T-ApoM重组质粒载体,转化到大肠埃希菌JM109后筛选阳性克隆,提取质粒酶切和测序鉴定。采用Sited-directedMutagenesis定点诱变试剂盒对ApoM基因进行体外定点诱变,DNA测序鉴定定点诱变成功与否。用双酶切方法分别将ApoM野生型和突变型基因定向连接到原核表达载体pGEX-KG和真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建野生型和突变型pGEX-KG-ApoM重组体和pcDNA3.1(+)-ApoM重组体,分别转化到大肠埃希菌DH5α内,提取质粒酶切鉴定和测序鉴定。结果:成功克隆了ApoM并构建了野生型和突变型原核表达载体和真核表达载体。结论:通过RT-PCR,定点诱变及基因重组技术成功构建野生型和突变型重组表达质粒pGEX-KG-ApoM和pcDNA3.1(+)-ApoM,为进一步研究ApoM的功能奠定了基础。
- 丁淑琴章尧陈昌杰杨清玲程龙强
- 关键词：载脂蛋白MPCDNA3.1(+)定点诱变
- ApoM在不同肝细胞中的表达及其与临床病理因素的关系被引量：2
- 2012年
- 目的:检测ApoM基因在肝硬化肝组织、正常肝组织、肝癌组织和癌旁组织中的表达并探讨其与肝癌临床病理联系。方法:采用免疫组化方法检测79例肝癌及癌旁组织、32例肝硬化及7例正常标本中ApoM的表达。结果:肝细胞癌患者组织中ApoM表达水平明显高于癌旁组织(P<0.001)。ApoM在肝细胞癌组织、癌旁组织肝硬化组织和正常肝组织中表达具有显著性差异(P<0.05)。ApoM在中、高分化肝癌组织中表达高于低分化型。结论:ApoM在正常肝细胞中呈弱表达,肝硬化组织中较高表达,但在肝癌组织中呈低表达。其表达水平与肝癌细胞分化有一定关联,这表明ApoM在肝癌细胞发生、发展中发挥着作用。
- 黄丽珠章尧陈昌杰杨清玲孙淼丁淑琴
- 关键词：载脂蛋白M组织分型细胞分化
- 肝细胞癌中载脂蛋白M,肝受体同系物1和肝细胞核因子1α表达的相关性分析被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨肝细胞癌(HCC)组织和癌旁组织中载脂蛋白M(apoM)、肝受体同系物1(LRH-1)和肝细胞核因子1α(HNF-1α)的表达并分析3者之间的相关性。方法:采用RT-PCR和免疫组化分别检测17例原发性肝细胞癌和相应癌旁组织中apoM、LRH-1、HNF-1αmRNA的表达及apoM和HNF-1α蛋白的表达。结果:apoM、LRH-1和HNF-1αmRNA及apoM和HNF-1α蛋白在癌组织中的表达均明显高于癌旁组织(P均<0.01)。LRH-1、HNF-1αmRNA和apoMmRNA表达均呈正相关关系(依次为r=0.463,P<0.01;r=0.356,P<0.05)。结论:肝细胞癌中apoM的表达和LRH-1及HNF-1α表达密切相关,LRH-1和HNF-1α可能是apoM表达的重要调节因子。
- 程龙强章尧陈昌杰杨清玲王惠
- 关键词：肝细胞癌载脂蛋白M
- 载脂蛋白M与冠心病及其相关因素的关联性分析
- <正>目的:为调查载脂蛋白M在冠心病发展中的角色及其与相关脂蛋白的关联性。方法选择88例经冠脉照影确认的冠心病患者和88例健康对照,利用ELISA检测血清apoM及相关血脂水平。通过进一步病例收集筛查apoM近端启动子r...
- 章尧杨清玲黄丽珠陈昌杰孙淼丁淑琴
- 关键词：冠心病发病机制载脂蛋白M生物指标
- 文献传递
