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排序方式：

脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白结合肽序列的亲和筛选被引量：1: 2006年; 应用噬菌体展示肽库技术,以重组的脑膜炎大肠杆菌致病蛋白IbeA作为靶分子,经过吸附-洗脱-扩增-再吸附的亲和筛选,随机挑选亲和力强的噬菌体克隆,进行ELISA、竞争抑制实验和序列测定。结果显示,经3轮淘选后,间接ELISA鉴定得到高亲和性结合IbeA蛋白的15个阳性克隆。竞争抑制实验结果表明,游离IbeA蛋白能竞争抑制噬菌体结合肽克隆与固相包被的IbeA蛋白的结合,其抑制作用随游离IbeA蛋白浓度的降低而减弱。测序结果得到5种阳性噬菌体克隆展示肽序列。上述结果提示以脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白为靶筛选所获得的噬菌体12肽克隆,具有特异性,其结合肽序列呈现相对保守性。建立的从噬菌体随机肽库筛选IbeA蛋白结合肽的方法具有方便、灵活和高效可行的特点。; 曹虹林琳刘北一陈丽丹杨军贡树基李明; 关键词：噬菌体展示肽库结合肽

脑膜炎大肠杆菌新基因cg1E的表达及生物信息学分析: 大肠杆菌(E.coil)是引起新生儿脑膜炎最常见的革兰氏阴性细菌,其发病率和死亡率较高,幸存者往往出现严重的神经系统后遗症。目前,关于血循环中的大肠杆菌如何穿透由脑微血管内皮细胞(brain microvascular ...; 陈丽丹曹虹杨军; 文献传递

致脑膜炎大肠杆菌穿透血脑屏障机制的研究进展被引量：4: 2005年; 陈丽丹曹虹; 关键词：血脑屏障细菌性脑膜炎神经系统后遗症中枢神经系统高感染率幸存者

脑膜炎大肠杆菌新基因cglE的克隆、表达及功能分析被引量：5: 2006年; 目的研究脑膜炎大肠杆菌新基因cglE在细菌穿透血脑屏障中的作用。方法1)PCR扩增cglE基因片段,克隆到原核表达载体pET22b,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达并对目的蛋白进行纯化及初步鉴定。2)应用生物信息学方法对cglE表达产物进行一级和二级结构预测。结果经Western-blot验证原核表达的CglE蛋白,SDS-PAGE电泳显示其分子量大小约50 000 Da。生物信息学分析表明,该基因与编码二氢硫辛酰胺脱氢酶(Dihydrolipoamide Ddhydrogenase,DLDH)的基因有同源性,与脑膜炎大肠杆菌侵袭素IbeA在二级结构上有相似性。结论建立稳定的原核表达系统并成功表达cglE基因产物,cglE基因可能与能量代谢及细菌穿透血脑屏障有关。目的蛋白CglE的表达及初步鉴定可为研究其功能及脑膜炎大肠杆菌的感染组学奠定了良好的基础。; 陈丽丹曹虹黄胜和杨军周浩贡树基; 关键词：脑膜炎大肠杆菌生物信息学

脑膜炎大肠埃希菌侵袭素IbeA结合多肽的初步研究被引量：1: 2006年; 目的脑膜炎大肠埃希菌(E.coli)侵袭素IbeA通过与脑微血管内皮细胞表面受体结合,从而介导细菌穿透血脑屏障引起新生儿细菌性脑膜炎。为通过肽库筛选获得与IbeA蛋白结合的多肽,建立噬菌体随机肽库筛选IbeA结合多肽模体的方法。方法首先制备靶分子,用PCR扩增出全长ibeA基因序列,克隆至表达载体pET28a中,转化大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达出带有His-tag的目的蛋白,经变性复性后通过Ni2+-NTA亲和层析柱得到纯度达90%的重组蛋白。然后以固相化IbeA重组蛋白为靶亲和筛选噬菌体线性12肽库。结果经过3轮淘选,得到能和IbeA结合的24个重组噬菌体克隆;挑选15个亲和力高的克隆进行DNA测序,对比分析所得的短肽序列。固相Fmoc法合成短肽,并进行结合实验、阻断实验和竞争抑制实验。结论以重组表达的IbeA融合蛋白为靶筛选得到的重组噬菌体十二肽克隆,能够和IbeA蛋白结合,为IbeA蛋白结合多肽。结果提示所筛选的阳性噬菌体克隆及其合成肽可能模拟IbeA受体表位的结构。; 曹虹陈丽丹林琳刘北一杨军贡树基李明; 关键词：噬菌体展示肽库结合多肽

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广东省自然科学基金(C020094)