福建省自然科学基金(C0620002)
- 作品数:8 被引量:10H指数:2
- 相关作者:林默君刘晓如杨娜张明芳朱壮丽更多>>
- 相关机构:福建医科大学福建卫生职业技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金福建省自然科学基金更多>>
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- 急性分离大鼠心室肌细胞的Ca^(2+)电流和细胞内Ca^(2+)浓度被引量:1
- 2007年
- 目的在急性分离SD大鼠心室肌细胞上,检测Ca2+电流(ICa)和Ca2+浓度[Ca2+]i的变化。方法改良Langendroff法,用含胶原酶I(1750U/mL)和蛋白酶ⅩⅣ(0.28mg/mL)的无Ca2+台氏液经大鼠主动脉循环灌流法,急性分离大鼠心室肌细胞;采用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞的ICa,动态细胞荧光成像技术检测心室肌细胞[Ca2+]i的变化。结果在20min内新鲜分离大鼠心室肌细胞,全细胞膜片钳技术可记录电刺激引起心室肌细胞的ICa,1μmol/L异丙肾上腺素可显著增加ICa;并观察到心室肌细胞[Ca2+]i以及电刺激增强[Ca2+]i的效应。结论大鼠心室肌细胞急性分离方法简便实用,所分离的心室肌细胞形态和功能正常,适用全细胞膜片钳和动态细胞荧光成像技术检测实验。
- 林默君刘晓如张小军
- 关键词:心室钙通道FURA-2
- TRPC6介导肺动脉高压大鼠肺动脉张力和肺动脉平滑肌细胞Ca^(2+)浓度的升高被引量:6
- 2010年
- 经典瞬时感受器电位通道6(transient receptor potential channel6,TRPC6)蛋白是受体操纵性Ca2+通道(ROCC)的分子基础。本文旨在研究TRPC6/ROCC在野百合碱(monocrotaline,MCT)诱发的肺动脉高压大鼠模型中的作用。Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组(CON组)和MCT组,CON组正常饲养三周,而MCT组按60mg/kg剂量一次性腹腔注射2%MCT,建立MCT诱导的慢性肺动脉高压大鼠模型。通过测定右心室收缩压(RVSP)和右心室重量指数(RVMI)、HE染色观察肺动脉血管形态,分析肺动脉结构重建。半定量RT-PCR和Western blot检测大鼠肺动脉TRPC6 mRNA和蛋白表达水平。血管张力实验中用可特异性激活ROCC、可透膜的DAG拟似物1-oleoyl-2-acetyl-sn-glycerol(OAG)检测大鼠离体肺动脉环的收缩效应。用荧光探针Fluo3-AM测定OAG诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)胞浆游离Ca2+浓度([Ca2+]i)。结果显示,与CON组相比,MCT组的RVSP、RVMI均明显增高(P<0.01);形态学观察可见肺小动脉平滑肌层明显增厚,管腔减小;TRPC6的mRNA和蛋白质表达无明显变化。在CON组,OAG几乎不引起肺动脉环收缩,而在MCT组,肺动脉环的收缩反应显著增强,差别有显著性意义(P<0.01)。相比较于CON组,MCT也可使OAG触发的PASMCs[Ca2+]i增量值显著升高(P<0.05)。上述结果提示,MCT预处理对肺动脉TRPC6mRNA和蛋白质水平的表达无显著增强效应,但可促进TRPC6/ROCC介导的PASMCsCa2+内流和肺动脉张力升高,诱导大鼠产生肺动脉高压,并进一步诱发肺血管及右心室重构。
- 张明芳刘晓如杨娜林默君
- 关键词:钙离子野百合碱
- 瞬时感受器电位M与V通道蛋白在血管功能调控中的作用
- 2010年
- 瞬时感受器电位(TRP)M与TRPV蛋白家族成员在血管功能调控中发挥重要的作用,主要对钙离子的调节。TRPM4参与大脑血流自动调节;TRPM7在增生血管镁离子内流通道中发挥作用;TRPV1介导血管周围感觉神经的传出功能等;TRPV4对血管平滑肌细胞功能有一定的影响。该文对目前TRPM与TRPV蛋白的认识进行概述,讨论它们在心血管功能方面的作用。
- 杨娜林默君
- 关键词:瞬时感受器电位血管平滑肌钙离子
- 慢性低氧左移5-HT诱发大鼠肺内动脉环收缩反应的浓度-依赖性曲线
- 2009年
- 目的探讨慢性低氧对大鼠肺内动脉血管重构以及5-HT诱发肺内动脉血管环收缩效应的影响。方法常压慢性低氧诱导慢性肺动脉高压大鼠模型。比较正常组(NOR组)和慢性低氧组(CH组)大鼠血流动力学参数平均右心室收缩压(mRVSP),平均右心室压(mRVP)及右心室压最大上升速率(dp/dtmax)及右心室肥厚指数以鉴定模型;光学显微镜下观察肺血管的病理改变;记录肺内动脉血管张力,观察5-羟色胺(5-HT)收缩效应;比较不同Ca2+通道阻断剂对5-HT引起的收缩效应的阻断作用。结果与NOR组比较,低氧3~4周后CH组的mRVSP、mRVP、dp/dtmax和右心室肥厚指数均明显增高(P<0.01);CH组大鼠肺内动脉中膜显著增生;CH组的5-HT引起的肺内动脉环收缩的浓度-依赖性反应曲线左移;30μmol/L氯化镧对30μmol/L5-HT预收缩肺内动脉血管环效应的阻断作用在CH组显著增高(P<0.01),但30μmol/LSKF96365的阻断作用无显著性意义。结论慢性低氧3~4周可稳定引起大鼠肺动脉高压,并左移5-HT诱发的肺内动脉环收缩的浓度-依赖性反应曲线;Ca2+池操纵性Ca2+通道功能的上调可能是CH组5-HT高反应性的一种机制。
- 朱壮丽林秀珍林默君
- 关键词:肺性血清素血管舒张
- 瞬时感受器电位超家族与血管平滑肌功能被引量:4
- 2008年
- 血管平滑肌的功能主要是通过多种机制激活Ca^2+内流使胞内Ca^2+浓度持续升高来实现的。目前的研究表明这种Ca^2^+内流与一系列瞬时感受器电位超家族成员有关,瞬时感受器电位超家族主要成员有:瞬时感受器电位C1、C3~6、V1、V2、V4、M4、M7和P2。文章概述瞬时感受器电位在血管平滑肌功能方面的作用。
- 刘晓如林默君
- 关键词:病理学与病理生理学瞬时感受器电位血管平滑肌CA^2+通道
- 眼镜蛇毒细胞毒素13诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及对Bcl-2家族基因表达的影响
- 2009年
- 目的研究眼镜蛇毒细胞毒素13诱导人脐静脉内皮细胞凋亡作用及其对Bcl-2家族基因表达的影响。方法CCK-8法测定细胞毒素13对人脐静脉内皮细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI双染法观察细胞凋亡形态学改变;流式细胞术分析DNA倍体及细胞凋亡率;逆转录聚合酶链反应检测Bcl-2、Bax和Bcl-xL基因表达的变化,Western blotting检测Bcl-2和Bax蛋白表达的变化。结果细胞毒素13对人脐静脉内皮细胞增殖具有显著的抑制作用,并可诱导其发生凋亡,其抑制作用呈剂量依赖性。细胞毒素13可上调促凋亡蛋白Bax,而对抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xL的表达无明显影响。结论细胞毒素13可能通过上调Bax表达诱导细胞凋亡,抑制人脐静脉内皮细胞增殖。
- 张明芳许云禄林默君
- 关键词:眼镜蛇毒细胞毒素人脐静脉内皮细胞细胞凋亡
- 大鼠肺动脉平滑肌细胞培养及对不同类型激动剂刺激产生的反应
- 2008年
- 目的分离和培养SD大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCc),并检测其功能状态。方法显微分离肺内小动脉,并在含胶原酶(1750 U·mL^-1)和木瓜蛋白酶(9.5U·mL^-1)的低钙HBSS溶液中酶解和培养PASMCs,采用动态细胞荧光成像技术检测PASMCs胞浆游离Ca^2+浓度([Ca^2+]i)的变化。结果在18~24h内可获得PASMCs,并可观察到环匹阿尼酸和5-HT可引起PASMCs[Ca^2+]i的升高效应。结论大鼠PASMCs一步酶消化法,方法简便实用。所分离的PASMCs细胞形态和功能正常,适用于动态细胞荧光成像技术检测实验及PASMCs信号转导功能的研究。
- 郑向红刘晓如林默君
- 关键词:肺动脉平滑肌细胞细胞培养
- 肺动脉高压与经典瞬时感受器电位通道
- 2009年
- 肺动脉高压(PAH)的发病机制目前还不十分清楚,近来越来越多的研究发现经典瞬时感受器电位通道(TRPC)参与PAH的发生、发展。目前认为TRPC家族成员是构成质膜上受体操纵性钙通道和钙池操纵性钙通道的分子基础,TRPC作为主要的钙内流通道,参与多种生理及病理过程。TRPC通过多种机制影响肺动脉平滑肌细胞基础钙水平,在肺血管紧张度的调节及肺动脉平滑肌细胞增殖中发挥了重要作用。TRPC的研究为PAH发病机制的研究提供了一个新的思路。本文简要介绍TRPC与PAH的联系。
- 朱壮丽林默君
- 关键词:肺动脉高压钙离子肺动脉平滑肌细胞