内蒙古自治区高等学校科学研究项目(NJ09165)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：王永福庞春艳刘媛张伟居红格更多>>
- 相关机构：内蒙古科技大学包头医学院更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- α-胞衬蛋白siRNA对干燥综合征模型NOD小鼠血清中IL-2、IL-6和TGF-β的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:观察α-胞衬蛋白(α-Fodrin)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对干燥综合征动物模型非肥胖糖尿病(NOD)小鼠细胞因子IL-2、IL-6和TGF-β的影响及泪腺的病理改变。方法:0.5 mg/kg体重的pGFPV-RS空载体和α-Fodrin-siRNA表达载体分别尾静脉注射NOD小鼠,1周/次,共2次。注射后2、4、6 d尾部采血,酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中细胞因子IL-2、IL-6和TGF-β的表达;注射后7 d病理切片,苏木精-伊红(HE)染色法观察各组小鼠泪腺的病理变化。结果:注射后2 d和4 d siRNA 1组和siRNA2组NOD小鼠血清中IL-6的浓度明显低于对照组和空载体组,差异有统计学意义;而对照组和空载体组间、siRNA 1组和siRNA 2组间比较差异无统计学意义。注射后2、4和6 d siRNA 1组和siRNA 2组NOD小鼠血清中TGF-β和IL-2的浓度较对照组和空载体组升高,但差异无统计学意义。病理切片结果显示,siRNA 1组和siRNA 2组与对照组和空载体组比较,小鼠泪腺淋巴细胞浸润减少。结论:NOD小鼠注射α-Fodrin siRNA载体后,血清中IL-6的水平降低、IL-2和TGF-β的浓度升高,泪腺淋巴细胞浸润减少,提示α-Fodrin siRNA可以减轻炎症反应。
- 庞春艳王蓓王永福
- 关键词：Α-胞衬蛋白小干扰RNANOD小鼠白介素-2
- α-胞衬蛋白-小干扰RNA真核表达载体的构建及其对原发性干燥综合征模型小鼠治疗作用的研究被引量：1
- 2012年
- 目的针对α胞衬蛋白（α-Fodrin）构建2段小干扰RNA（siRNA）真核表达载体，观察其对原发性干燥综合征模型小鼠（NOD小鼠）的治疗作用。方法16只8周龄的NOD小鼠采用单纯随机抽样法分为4组，对照组、空载体组、α-胞衬蛋白．siRNA1组及α-胞衬蛋白-siRNA2组，每组4只。化学合成siRNA的模板DNA4条，退火形成2条双链DNA（dsDNA），BamH Ⅰ和HindⅢ双酶切后插入线性化质粒载体pGFP—V—RS的启动子下游，重组体采用双酶切和测序鉴定。将测序鉴定成功的0．5mg／kg siRNA真核表达载体分别尾静脉注射NOD小鼠，1次／周，共2次，对照组注射等体积的磷酸盐缓冲液（PBS），空载体组注射等剂量的空载体。组织切片在荧光显微镜下观察其是否靶向到泪腺，反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测NOD小鼠肺脏α-胞衬蛋白（mRNA）的表达，免疫组织化学法检测NOD小鼠泪腺和肺脏仪．胞衬蛋白的表达水平。酶联免疫吸附（ELISA）法检测NOD小鼠血清中干扰素叫和白细胞介素（IL）-17的表达水平；苏木精-伊红（HE）染色法观察各组小鼠泪腺和脏器的病理变化。统计学方法采用重复测量的方差分析。结果①成功构建2段siRNA真核表达载体；②α-胞衬蛋白-siRNA质粒载体靶向到泪腺；③α-胞衬蛋白-siRNA组与对照组和空载体组相比，α-胞衬蛋白mRNA和蛋白的表达明显降低；④α-胞衬蛋白-siRNA组[1组（4．38±1．02）pg／ml，2组（4．55±0．06）pg／ml]与对照组[（11．73±2．73）pg/ml]和空载体组[（15．40±1．99）pg／ml]相比，2次注射后小鼠血清中IL-17水平显著下降（P〈0．05），干扰素-γ水平无明显下降（P〉0．05）；⑤α-胞衬蛋白-siRNA组与对照组和空载体组相比，小鼠泪腺淋巴细胞浸润减少，肺间质炎细胞浸润明显减少。结论α-胞衬蛋白siRNA能抑制炎症反应，减轻NOD小鼠的泪腺和肺脏炎细胞浸润程度，�
- 刘媛庞春艳居红格张伟吕凤凤王永福
- 关键词：干燥综合征Α-胞衬蛋白
