国家自然科学基金(30671082)
- 作品数：18 被引量：103H指数：6
- 相关作者：贾敬芬郝建国王英娟张改娜王玉华更多>>
- 相关机构：西北大学河南科技大学青海大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 青稞hblt14.2基因的克隆及功能分析被引量：4
- 2009年
- 根据大麦blt14.2基因序列设计引物,用青稞基因组DNA为模板扩增低温反应基因的全长序列,命名为hblt14.2,在GenBank登录号为EF514912。该基因含470bp,包括249bp的开放阅读框、69bp的5'非翻译区和152bp的3'非翻译区,编码82个氨基酸残基,富含Gly、Ala、Leu和Val,与其他冷诱导基因编码蛋白具相似性。与大麦blt14.2基因具98.9%同源性,所编码的蛋白存在2个氨基酸的差别。将hblt14.2基因连接CaMV35S启动子和NOS终止子后定向插入质粒pCAMBIA1301的多克隆位点中,构建植物表达载体pCAMBIA-BI-hblt,通过农杆菌介导转化烟草,并对转基因烟草进行抗寒性检测。结果表明,青稞hblt14.2基因与植物的抗寒性有一定关系。
- 何涛贾敬芬
- 关键词：青稞功能分析
- RP-HPLC法测定不同芦荟中褪黑激素含量被引量：5
- 2008年
- 目的:建立测定芦荟组织中有效成分褪黑素的反相高效液相色谱分析方法,并用该方法测定不同品种的芦荟组织。方法:以SymmetryC18(150mm×4.6mm,5.0μm)为色谱柱;甲醇:水(1:1)为流动相,流速为1.0ml/min;检测波长为223nm,灵敏度为2.00AUFS。结果:褪黑素浓度在2.0～200.0pg/ml(r=0.9892)范围内线性关系良好,平均加样回收率为98.8%(n=6),RSD=1.13%。结果表明,利用RP-HPLC法分析不同芦荟中褪黑激素含量简便、易行。芦荟组织中褪黑素含量随品种、组织不同而不同,其中花高于同种的叶。库拉索芦荟中的褪黑素含量远高于其它不同品种的芦荟的同类组织。
- 王英娟步怀宇贾敬芬索志荣
- 关键词：RP-HPLC芦荟褪黑素
- 草木樨状黄芪和木本霸王的科间体细胞杂交被引量：4
- 2009年
- 在成功培养原生质体的基础上,用改进的PEG-高pH高钙法诱导草木樨状黄芪(Astragalus melilotoides)和木本霸王(Zygophyllum xanthoxylum)原生质体融合,得到了科间体细胞杂种融合细胞。采用罗丹明-6G预处理草木樨状黄芪原生质体以及UV-B辐照霸王原生质体,使双亲原生质体及其同源融合产物均不能持续分裂而死亡,融合后的杂种细胞由于生理互补可恢复持续分裂能力而被筛选出来。融合产物经培养分裂获得了2个杂种细胞系,其中1个分化出芽。染色体计数和分子鉴定证明了杂种的真实性。初步比较了杂种细胞系及亲本对盐分和水分胁迫的耐受性,结果表明杂种细胞系对盐分和水分胁迫的耐受性介于两个亲本之间。
- 张改娜贾敬芬
- 关键词：原生质体融合体细胞杂交
- 骆驼刺发根农杆菌转化系的原生质体培养和植株再生被引量：4
- 2009年
- 从发根农杆菌A4转化的荒漠植物——骆驼刺毛状根愈伤组织中分离的原生质体培养的结果表明,酶解新转代7～10d的淡黄色松软愈伤组织,可获得大量有活力的原生质体。原生质体在附加有1.5mg·L-12,4-D、0.2mg·L-16-BA、0.3mol·L-1甘露醇、2%(W/V)蔗糖和500mg·L-1水解酪蛋白的DPD培养基中进行液体浅层培养可持续分裂。培养基的最适渗透压为(450±3)mOsm·kg-1,原生质体的最适植板密度为4×105个·mL-1。制备原生质体的愈伤组织以低温(4℃)预处理后,原生质体的产率和分裂频率均提高,分裂频率最高可达50%。原生质体分裂形成的愈伤组织转移在附加1～2mg·L-16-BA(或KT)和0.2mg·L-1NAA的MS培养基上培养后,可以分化并获得再生植株。纸电泳检测表明,原生质体再生的愈伤组织和分化植株仍然含有毛状根转化系的特异产物——冠瘿碱。
- 张改娜贾敬芬
- 关键词：骆驼刺原生质体培养
- 裂叶荆芥的组织培养和快速繁殖
- 2007年
- 1植物名称裂叶荆芥[Schizonepeta tenufolia（Benth．）Briq．]，又称假苏、四棱杆蒿。2材料类别种子无菌萌发苗的叶和茎段。3培养条件种子萌发培养基：（1）MS；不定芽诱导和分化培养基：
- 王英娟赵宇玮贾敬芬
- 关键词：快速繁殖分化培养基种子萌发不定芽诱导植物名称无菌萌发
- 霸王的原生质体培养及植株再生研究被引量：11
- 2009年
- 本研究建立了霸王原生质体再生植株的试验体系。以子叶切块诱导的松软愈伤组织为材料,通过酶法分离出大量有活力的原生质体,原生质体经培养持续分裂形成了愈伤组织,并分化出再生苗。比较了不同培养基和培养密度对原生质体分裂和再生的影响。结果表明,原生质体以2×105个/mL的植板密度,采用液体浅层法培养在附加1.0 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、0.2 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)、0.2 mg/L激动素(KT)、500 mg/L水解酪蛋白(CH)、2%蔗糖和0.5 mol/L甘露醇的DPD培养基中,可获得最佳效果,其细胞分裂频率达28.4%左右。转移到附加1.0 mg/L 6-BA、0.5 mg/L萘乙酸(NAA)的MS分化培养基上,获得大量的再生苗。
- 王瑛华陈刚贾敬芬郝建国
- 关键词：霸王原生质体培养植株再生
- 豌豆清蛋白1(PA1)基因的克隆及对苜蓿的转化被引量：14
- 2009年
- 本研究用PCR方法从豌豆(食荚大菜豌)克隆出富含硫氨基酸、同时具有抗虫作用的双功能的蛋白质基因-豌豆清蛋白1(PA1)基因,并构建了植物表达载体pCAMBIAl301-PA1。采用农杆菌介导法转化了紫花苜蓿,并对其转化体系进行了优化,得到了多个转基因胚性愈伤组织及其再生植株。PCR和Southern杂交检测表明,PA1基因和潮霉素抗性基因已被整合到了宿主细胞。SDS-PAGE分析表明该基因在再生植株中有一定表达。游离氨基酸分析表明,PA1基因的表达转基因苜蓿中蛋氨酸和半胱氨酸的含量从0.1%提高到0.4%。
- 张改娜贾敬芬
- 关键词：苜蓿
- 毛脉蓼的离体培养
- 2009年
- 1植物名称毛脉蓼[Polygonum ciliinerve（Nakai）Ohwi]。
2材料类别幼叶和茎段。
3培养条件基本培养基为MS。愈伤组织诱导培养基：（1）MS＋2，4-D1．0mg·L^-1（单位下同）＋6-BAO．5；（2）MS＋2，4-D2．0＋6-BA0．5。芽分化培养基：（3）MS＋6-BA2．0＋NAA0．1；（4）MS＋6-BA1．0＋NAA0．1；
- 王英娟步怀宇贾敬芬
- 关键词：离体培养基本培养基诱导培养基分化培养基植物名称愈伤组织
- 褪黑素合成酶基因转化烟草及转化植株抗氧化系统变化被引量：4
- 2009年
- 通过根癌农杆菌(含植物表达载体YXu55)介导的转化技术,将褪黑素生物合成酶-芳烷基胺N-乙酰转移酶(Arylalkylamine N-acetyltransferase,AANAT)与羟基吲哚O-甲基转移酶(Hydroxyindole O-methyltransferase,HIOMT)基因导入到烟草(秦烟95)中。对所获得的庆大霉素抗性烟草株系进行Southern blotting和RT-PCR分子生物学检测,结果表明,AANAT-HIOMT基因已成功地整合到烟草基因组中,并且可以在mRNA水平上进行转录。用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定转化株系的褪黑素含量表明,转AANAT-HIOMT基因烟草株系的褪黑素含量均明显高于pZP122(不含AANAT和HIOMT基因的空白质粒)转基因株系和未转基因的对照植株,证明AANAT-HIOMT基因在转基因植株中的表达增强了褪黑素的合成能力。对不同株系抗氧化系统的部分指标进行了测定,并与其亲本对照植株比较,发现AANAT-HIOMT基因在转基因植物中的表达引起超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性增加,谷胱甘肽(GSH)浓度以及总抗氧化能力升高,且没有引起膜脂质过氧化物丙二醛(MDA)的变化,说明转基因烟草抗氧化潜能得到提高。
- 王英娟贾敬芬步怀宇赵宇玮许耀Carl Hirschie JohnsonJan Kolár
- 关键词：烟草褪黑素抗氧化
- 甘薯质体中的乙酰辅酶A羧化酶亚基基因accD的克隆与序列分析被引量：1
- 2009年
- 依据烟草质体全基因组序列设计引物,以甘薯质体基因组DNA为模板,PCR扩增包含质体accD基因完整编码区在内的一段序列(GenBank登录号为GQ395771)。序列分析表明:该片段全长为2209bp,包括1548bp的accD基因编码序列,推测编码515个氨基酸的蛋白质,该蛋白序列具有异质型β-CT中保守的锌指结构和C末端5个基元。同时绘制了该DNA片段的限制性酶切图谱。相似性比较显示,甘薯accD基因与大豆、马铃薯、拟南芥、人参、莴苣、葡萄、海岛棉、甘蓝、辣椒、菠菜、番茄和烟草的accD基因核苷酸相似性为72%～87%,氨基酸相似性为58%～83%。
- 王玉华郝建国贾敬芬
- 关键词：甘薯
