国家林业局948项目(2010-S19)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
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- 相关机构：福建农林大学福建师范大学更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划福建省科技计划重点项目国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 基因枪法获得转cry1Ac基因甘蔗的研究被引量：6
- 2011年
- 根据定向克隆原则,以pGreenⅡ0229为载体骨架,cry1Ac为目的基因,bar为筛选标记基因,构建了大小为8602bp的植物表达载体pUBCG0229-cry1Ac。酶切结果表明,构建的载体pUBCG0229-cry1Ac结构完全正确。用基因枪轰击法将pUBCG0229-cry1Ac质粒DNA转化甘蔗(Saccharum Complex)品种福农95-1702和桂糖94-119的胚性愈伤组织,使用PPT(phosphinothricin)对轰击后的材料进行继代、分化和生根筛选,移栽成活后使用Basta溶液喷洒进行初步筛选,共获得86株抗性植株,通过PCR检测、Dot-Southern检测及PCR产物测序,证明已将cry1Ac基因整合到其中22株甘蔗基因组中。
- 高世武郭晋隆许莉萍陈如凯傅华英
- 关键词：甘蔗CRY1AC基因BAR基因基因枪
- 甘蔗单花粉全基因组扩增(WGA)与SCoT分子标记研究被引量：6
- 2011年
- 从一个完整的甘蔗花粉囊中分离出单个花粉粒．利用特制取样器进行收集，采用碱裂解法释放单花粉DNA．裂解液可以直接作为WGA模板进行全基因组扩增．制备出单个花粉粒大量DNA。通过5SrRNA—ITS鉴定WGA产物真实性．并以目标起始密码子多态性标记对真实的WGA产物进行分析，显示出丰富的多态性。利用NTSYSpc软件分析花粉粒间遗传距离，并进行聚类分析，显示单花粉间遗传距离变幅为0．0888-0．3654，在相似系数0．187处．受试花粉粒中的36个明显分为2组．占总数的69％。说明减数分裂染色体重组过程中，有一定比例的基因位点为多数花粉粒所共有。根据SCoT标记聚类图可将所有供试花粉分为4大类．不同类花粉粒的分布具有一定的规律性．
- 陈平华陈如凯许莉萍王恒波陈利平林冰施桂姣张卓高三基郭晋隆潘永保
- 关键词：甘蔗全基因组扩增
- 球磨机高通量提取甘蔗叶片DNA研究
- 2010年
- 简便快速地获得高质量、高纯度的DNA模板是进行分子遗传学研究和大批量分子检测的基础。常用的液氮手工研磨提取DNA方法存在着耗时、费力、污染等诸多不足。利用从美国引进的球磨机,根据甘蔗叶片的特点,采用国产钢珠,通过优化实验步骤,建立了一种高通量制备甘蔗叶片DNA的方法,其中,叶片快速研磨使用不锈钢珠的直径为4 mm,对叶片进行液氮预冻,时间为30～45 min,叶片用量为50～100 mg,打磨时间为30～40 s。这种方法缩短了提取DNA的时间,提高了效率,而DNA质量与经典方法相当,能够满足分子生物学研究的需要。
- 陈平华方静平许莉萍王恒波高三基陈由强陈如凯
- 关键词：球磨机高通量甘蔗叶片基因组DNA
