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国家自然科学基金(31260224)

作品数:5 被引量:8H指数:2
相关作者:左丽裴华马静崔丽丽余芳芳更多>>
相关机构:贵阳医学院贵州医科大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 5篇医药卫生

主题

  • 3篇登革病毒
  • 3篇细胞
  • 3篇内皮
  • 3篇病毒
  • 2篇脐静脉内皮
  • 2篇内皮细胞
  • 2篇静脉内
  • 2篇静脉内皮
  • 1篇代人
  • 1篇凋亡
  • 1篇水凝胶
  • 1篇脐静脉内皮细...
  • 1篇自噬
  • 1篇窦内皮细胞
  • 1篇细胞产生
  • 1篇细胞分泌
  • 1篇细胞感染
  • 1篇细胞培养
  • 1篇静脉内皮细胞
  • 1篇分泌

机构

  • 4篇贵阳医学院
  • 1篇贵州医科大学

作者

  • 5篇左丽
  • 3篇裴华
  • 2篇余芳芳
  • 2篇崔丽丽
  • 2篇马静
  • 1篇孙伟
  • 1篇商正玲
  • 1篇龙世棋
  • 1篇赵军
  • 1篇袁静
  • 1篇尹科
  • 1篇孟庆红
  • 1篇王琨

传媒

  • 3篇中华微生物学...
  • 2篇中国免疫学杂...

年份

  • 1篇2016
  • 3篇2015
  • 1篇2013
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
2型登革病毒对原代人肝窦内皮细胞凋亡、自噬以及相关基因表达的影响被引量:2
2016年
目的研究2型登革病毒(DENV-2)感染原代人肝窦内皮细胞(HHSECs)后,HHSECs的凋亡、自噬,细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及Beclin-1 mRNA水平的表达,分析DENV-2致病过程中可能的作用机制。方法用DENV-2(MOI=1)作用于HHSECs,Real-time PCR动态检测DENV-2 NS1部分序列;CCK-8法动态检测DENV-2对HHSECs的毒性作用。real-time PCR动态检测被感染HHSECs的ICAM-1、Beclin-1 mRNA的表达水平。流式细胞术检测被感染HHSECs的细胞凋亡率,以及LC3B和ICAM-1的表达。结果被DENV-2作用后的HHSECs有NS1部分基因序列的表达。DENV-2感染细胞后,CCK-8法检测细胞的抑制率分别为(10.90±1.24)%(12 h)、(16.40±0.42)%(24 h)、(17.00±0.46)%(36 h)、(29.60±0.26)%(48 h)。Real-time PCR检测HHSECs中Beclin-1及ICAM-1 mRNA的表达,以未感染组为对照,2^-△△Ct值于24 h达峰值,分别为46.77±2.55和40.97±4.91。流式细胞术动态观察被DENV-2感染的HHSECs的凋亡,于12 h较明显,凋亡率为13.17%;36 h时LC3B的表达率(35.50%)达到峰值;ICAM-1的表达率分别为9.17%(12 h)、14.7%(24 h)、12.7%(36 h)、11.6%(48 h)。结论HHSECs对DENV-2易感。DENV-2可激活HHSECs,诱导ICAM-1上调;可促进自噬的发生,于早期诱导HHSECs细胞凋亡。
戴雪婷左丽赵军袁静裴华孔维莹
关键词:登革病毒自噬BECLIN-1
重组HMGB1对DEN2感染Ana-1细胞分泌TNF-α及NO的影响被引量:2
2015年
目的:观察不同浓度重组高迁移率族蛋白1(recombination high mobility group box protein 1,r HMGB1)对DEN2感染鼠源单核巨噬细胞Ana-1分泌TNF-α、NO及DEN复制的影响。方法:直接免疫荧光法鉴定DEN2吸附Ana-1细胞;qRTPCR检测不同时间胞内病毒载量变化;双抗体夹心ELISA法检测感染不同时间TNF-α的分泌水平,Griess试剂检测细胞释放NO变化。结果:不同剂量r HMGB1处理Ana-1细胞后,对DEN2感染细胞的病毒抑制率(%)分别为41.53±2.12﹑55.30±1.59﹑74.75±1.12﹑86.35±1.42,差异有统计学意义(P<0.05)。r HMGB1处理后,感染细胞分泌TNF-α和NO水平均有所下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:r HMGB1可有效调节DEN2感染Ana-1细胞的TNF-α和NO分泌,并抑制DEN2的增殖。
孙伟商正玲左丽龙世棋孟庆红王琨尹科
关键词:HMGB1
细胞培养基底刚度对人原代脐静脉内皮细胞增殖率及经登革病毒感染后释放 NO、ET-1的影响被引量:3
2015年
目的:探讨细胞培养基底刚度在登革病毒( Dengue virus,DENV)感染人原代脐静脉内皮细胞( HUVEC)中的影响。方法利用丙烯酰胺和双丙烯酰胺制备模拟正常人血管内皮细胞基底刚度的水凝胶[(0±4)kPa],MTS法检测细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,常规方法鉴定增殖登革病毒2型(DENV-2),DENV-2(MOI=10)感染人原代脐静脉内皮细胞,MTS法比较种植在传统塑料基底与水凝胶上的HUVEC被DENV-2感染后对细胞增殖率的影响,并通过硝酸还原酶法检测两组细胞释放一氧化氮(NO)的水平以及双抗体夹心ELISA法检测内皮素-1(ET-1)的表达。结果自重弯曲法测得2%双丙烯酰胺和40%丙烯酰胺配比水凝胶的弹性模量为(3030±0.44) Pa;血管内皮细胞经登革病毒感染后其细胞增殖率与培养基底刚度呈正相关;两组不同刚度基底培养的细胞生长周期和细胞凋亡率无明显差异,但可引起NO和ET-1水平的变化。结论实验结果证实基底刚度可影响人原代HUVEC的增殖效率及释放的NO与ET-1浓度的变化,血管内皮受损后,其分泌合成的血管活性物质减少,参与了登革热的致病发生。同时水凝胶模型的建立为研究DENV感染的体外模型提供一定的新思路。
余芳芳崔丽丽裴华马静左丽
关键词:登革病毒
水凝胶上培养的原代人脐静脉内皮细胞感染登革病毒Ⅱ型对细胞产生IL-29的表达影响被引量:2
2015年
目的:利用水凝胶(hydrogel)模拟人血管内皮细胞基底膜弹性硬度,以登革病毒2型(DENV-2)NGC株感染接种于水凝胶为基底的原代人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),观察HUVECs在不同弹性硬度材质上培养产生IL-29的情况。方法分离培养原代HUVECs,将细胞接种于水凝胶,以MOI(multiplicity of infection)=10的DENV-2感染原代HUVECs,流式细胞术检测48 h细胞凋亡率及病毒感染率,并送检mRNA基因表达谱芯片,通过实时荧光定量PCR及双抗体夹心ELISA法检测IL-29的表达情况。结果 DENV-2感染原代HUVECs 48h,培养于水凝胶上的细胞的病毒感染率较低,细胞凋亡率与未感染组比较,差异无统计学意义(P>0.05),基因芯片检测发现IL-29的产生与普通塑料培养瓶接种的脐静脉内皮细胞受到DENV-2感染后存在差异,实时荧光定量PCR和双抗体夹心ELISA法检测IL-29的表达,差异均存在统计学意义(P<0.05)。结论水凝胶模拟人血管内皮细胞基底膜硬度,用DENV-2感染接种于水凝胶上脐静脉内皮细胞,基因芯片检测发现IL-29的产生,与体外正常培养条件下受到DENV-2感染后存在差异,水凝胶的建立可能为DENV发病机制的研究提供一个新的模型。
崔丽丽余芳芳马静裴华左丽
关键词:登革病毒IL-29水凝胶
DENV-2NGC株诱导HUVEC凋亡及与Fas/FasL表达的关系
2013年
目的:观察登革2型病毒NGC株(Dengue virus-2 NGC strain,DENV-2 NGC)诱导的HUVEC凋亡及其Fas/FasL表达的变化。方法:利用BALB/c乳鼠脑内接种以及C6/36细胞增殖病毒,RT-PCR鉴定病毒,细胞半数感染量(TCID50)测定法确定病毒滴度。直接免疫荧光法观察DENV-2吸附HUVEC;AO/EB染色法检测DENV-2感染后HUVEC细胞凋亡形态;流式细胞术动态测定不同滴度DENV-2诱导HUVEC凋亡率的变化,检测不同剂量病毒感染48小时的细胞感染情况及HUVEC膜表面Fas/FasL的表达水平。组间比较采用独立样本t检验。结果:DENV-2能够吸附于HUVEC并诱导HUVEC凋亡,凋亡率达(18.44±1.29)%,与未接种病毒组比较(5.78±1.43)%,差异有显著性(P<0.05),但凋亡率并未随着时间延长和病毒剂量增加,呈现出明显的上升或下降的趋势。DENV-2对HUVEC的感染率并未与细胞凋亡率呈现明显的相关性。与对照组相比,接种病毒组的HUVEC膜表面Fas的表达水平均有明显的增加,但FasL表达水平仅在接种病毒的1 000TCID50组显著增加。结论:DENV-2 NGC能够感染HUVECs并诱导其凋亡,可能是DHF/DSS发病机制中血管内皮屏障损伤导致血浆外渗的主要原因之一,Fas/FasL激活的凋亡死亡受体途径可能在DENV-2 NGC诱导的HUVECs凋亡中发挥了作用。
王念雪左丽
关键词:HUVECS凋亡FASFASL
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