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广东省自然科学基金(s2011010000764)
作品数:
1
被引量:5
H指数:1
相关机构:
广州市红十字会医院
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发文基金:
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2014
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整合素连接激酶对瘢痕成纤维细胞增殖和分化的影响
被引量:5
2014年
【摘要】目的观察整合素连接激酶(integrin—linkedkinase,ILK)对人瘢痕成纤维细胞增殖和分化的影响,以探讨其在瘢痕形成中的作用。方法体外分离培养瘢痕成纤维细胞,并按下述方法处理并分组:①空白对照组,仅含有常规高糖DMEM培养液;②转染试剂jetPRIME。TM对照组(jetPRIME。TM对照组),常规高糖DMEM培养液与200μljetPRIME。TMbuffer及4txljetPRIME。TM反应试剂;③ILK小分子干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)组(ILKsiRNA组),常规高糖DMEM培养液与siRNA转染复合物;④ILK互补DNA(complementaryDNA,cDNA)组(ILKcDNA组),常规高糖DMEM培养液与cDNA转染复合物。分别检测细胞增殖、ILK信使RNA(messengerRNA,mRNA)、仅.平滑肌肌动蛋白(0I—smoothmuscleaetin,d—SMA)mRNA表达及其蛋白表达水平。结果①四唑翁盐(XTT)检测结果表明,转染后48h,各组成纤维细胞增殖水平,空白对照组为0.820±0.065,jetPRIMETM对照组为0.873±0.041,ILKsiRNA组为0.554±0.013,ILKcDNA组为1.296±0.094。各组48h内的细胞增殖曲线见,ILKsiRNA组的细胞增殖极为平缓,而ILKcDNA组的细胞增殖水平从12h开始逐渐升高。转染后48h,ILKsiRNA组细胞增殖水平明显低于其他3组(P值分别为0.021、0.034、0),ILKcDNA组细胞增殖水平明显高于其他3组(P值分别为0.017、0.009、0)。②实时荧光定量聚合酶链式反应(Real—timeqPCR)技术检测结果显示,ILKmRNA和OL.SMAmRNA的表达水平,空白对照组为0.6934-0.412和0.4224-0.037,jetPRIME“对照组为0.621±0.183和0.3884-0.005,ILKsiRNA组为0.0524-0.019和0.0734-0.023,ILKcDNA组为240.1934-35.170和138.056±24.060。ILKsiRNA组ILKmRNA和OL—SMAmRNA表达水平均显著低于其他组,差异有统计学意义(P〈0.05);而ILKcDNA组ILKmRNA和d—SMAmRNA表达水平均显著高于其他3组,差异有统计学意义�
林伟华
李叶扬
米兰
李罡
孙敬恩
王仁坤
梁振文
关键词:
瘢痕
成纤维细胞
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